u87mg细胞 （人脑星形胶质母细胞瘤细胞）

U-87 MG人脑星形胶质母细胞瘤细胞是一种具有上皮形态的细胞系，从一名男性患者的恶性胶质瘤中分离出来，可能患有胶质母细胞瘤。用于神经科学和免疫肿瘤学研究。

u87mg细胞系为亚二倍体，模式染色体数为44，出现在48%的细胞中，并具有高达5.9%的高倍性率。U-87 MG细胞系包含12个标记物，包括der（1）t（1；3）（p22；q21）、der（16）t（2；p12）、del（9）（p13）等，标记der（1）在大多数细胞中具有两个拷贝。正常的X染色体只有一个拷贝，N1，N6和N9染色体没有找到。

U-87 MG细胞系具有致瘤性，在裸鼠皮下接种后能够成瘤。其同工酶谱为AK-1,1；ES-D,1；G6PD,B；GLO-I,1；Me-2,1；PGM1,2；PGM3,1。通过STR图谱、Y染色体图谱和Q带分析，确认该细胞系起源于雄性，且可能为中枢神经系统起源的胶质母细胞瘤（Allen，2016）。

u87mg细胞由Ponten J等于1966年至1969年间建立，支原体污染于1975年9月消除。U-87 MG细胞适用于3D细胞培养、神经科学和免疫肿瘤学研究，也是合适的转染宿主。

u87mg细胞特性

• U-87 MG细胞系具有上皮形态。

• 该细胞系为亚二倍体，模式染色体数为44，出现在48%的细胞中，高倍性率为5.9%。

• 细胞系具有12个标记物，包括der（1）t（1；3）（p22；q21）、der（16）t（2；p12）、del（9）（p13）等。

• 标记der（1）在大多数细胞中具有两个拷贝，只有一个拷贝的正常X染色体，N1，N6和N9没有找到。

• 裸鼠皮下接种可成瘤。

• 同工酶：AK-1,1；ES-D,1；G6PD,B；GLO-I,1；Me-2,1；PGM1,2；PGM3,1。

• U-87 MG细胞适用于3D细胞培养、神经科学和免疫肿瘤学研究，也是合适的转染宿主。

u87mg细胞参数表

u87mg人脑星形胶质母细胞瘤细胞培养教程

细胞复苏

• 解冻后，将含有1 mL 细胞悬液的冻存管中的细胞悬液缓慢加入含有4-6 mL 完全培养基的离心管中，轻轻混合均匀。

• 在1000 RPM 条件下离心3-5 分钟，弃去上清液。

• 重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液加入含有6-8 mL 完全培养基的培养瓶或培养皿中。

• 将培养瓶或培养皿放入37°C培养箱中，培养过夜。

传代步骤

• 当U-87 MG细胞密度达到70%-80%时进行传代。

• 准备好新的培养瓶或培养皿，以及所需的传代培养基（MEM培养基含有NEAA、10% FBS、1% P/S）。

• 弃去旧的培养基，用不含钙、镁离子的PBS轻轻冲洗细胞1-2 次，使细胞表面清洁。

• 向培养瓶中加入适量的0.25% 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA 消化液（T25 瓶约1-2 mL，T75 瓶约2-3 mL），放置于37°C培养箱中消化1-2 分钟（需要视觉观察消化情况）。

• 当绝大多数细胞变圆并脱落时，立即将培养瓶拿回操作台，轻轻敲击几下促进细胞的分散。

• 加入3-4 mL 含10% FBS的培养基终止消化作用。

• 将消化后的细胞收集到离心管中，以1000 RPM 离心5分钟，弃去上清液。

• 补加1-2 mL 培养基，轻轻悬浮混匀。

• 按照1：2 的比例将细胞悬液分配到新的培养瓶或培养皿中，加入6-8 mL 新鲜配置的完全培养基。

• 将培养瓶或培养皿放入37°C培养箱中继续培养。

冻存步骤

• 在细胞生长状态良好时进行细胞冻存。

• 弃去培养基，用PBS洗涤瓶底1-2 次，使细胞表面清洁。

• 加入1 mL 胰蛋白酶消化液（0.25%）至瓶中，放置于37°C培养箱中消化1-2 分钟，直到细胞大多数变圆并脱落。

• 加入2 mL 完全培养基终止消化作用，轻轻悬浮混匀。

• 离心5分钟以1000 RPM 速度离心，去除上清液。

• 加入适量含10% DMSO的完全培养基，使DMSO最终浓度达到10%。

• 按每管至少1x10^6 个细胞的数量，将细胞悬液分装到冻存管中。

• 记录冻存管的标识信息。

• 将冻存管置于程序降温盒中快速冷却，然后转移到液氮罐中长期存储。