
HMC3细胞系(人脑小胶质细胞系)
- 来源:脑组织
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1%P/S
- 其他:HMC3细胞可以无限期生长,适合用于小胶质细胞功能生化分析。
HMC3细胞是一种通过SV40永生化人胎儿大脑原代小胶质细胞培养物建立的人脑小胶质细胞系。HMC3细胞系保留了原代小胶质细胞的特性,可以无限期生长的同质细胞群。
HMC3细胞对小胶质细胞/巨噬细胞标记物IBA1呈强阳性,对内毒素受体CD14呈阳性,但对星形胶质细胞标记物GFAP呈阴性。
HMC3细胞系特性
通过SV40永生化的HMC3细胞保留了原代小胶质细胞的特性。
HMC3细胞可以无限期生长,适合用于小胶质细胞功能生化分析。
HMC3细胞支持转染,可用于研究各种基因的表达调控。
静息状态下,HMC3细胞对小胶质细胞/巨噬细胞标记物IBA1和内毒素受体CD14呈阳性,但对星形胶质细胞标志物GFAP呈阴性。
活化状态下,HMC3细胞的MHCII、CD68和CD11b在静息状态下为阴性,但在被IFN-γ(10ng/ml,24小时)激活后上调。
HMC3细胞系参数表
细胞名称 | HMC3细胞系(人脑小胶质细胞系) |
别称 | Human Microglia Clone 3 (CHME-3, CHME3, HMC-3) |
种属 | 人类 |
年龄(性别) | 胎儿 |
组织来源 | 脑组织 |
细胞类型 | 转化细胞系 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
生物安全等级 | BSL-2 |
背景描述 | HMC3细胞系是通过SV40依赖性永生化人类胎儿脑源性原代小胶质细胞培养物建立的。 永生化的小胶质细胞群能无限性生长,用于小胶质细胞的生化功能分析; HMC3细胞也易于转染而通常用于转染基因的表达研究,具有原代小胶质细胞的特性。 |
主要标记物 | 静息状态下:IBA1(强阳性)、CD14(阳性)、GFAP(阴性)。活化状态 下(IFN-γ 10ng/mL,24小时):MHCII、CD68、CD11b上调。 |
生长培养基 | MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃;湿度:70%-80% |
推荐传代比例 | 1:3-1:8 |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO;温度:液氮 |
支原体检测 | 阴性 |
应用 | 神经科学,神经炎症研究。HMC3细胞用于小胶质细胞功能的生化分析,并支持各种基因 的转染表达调控研究。 |
保藏机构 | ATCC; CRL-3304 |
培养教程
HMC3人脑小胶质细胞系培养教程
HMC3细胞的复苏
将含有1mL HMC3细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。
加入解冻的HMC3细胞悬液到含8-10mL完全培养基的离心管中,混合均匀。
在1000RPM条件下离心3-5分钟,弃去上清液,重悬HMC3细胞。
将HMC3细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中,在37℃培养过夜。第二天使用显微镜观察HMC3细胞生长情况和密度。
HMC3细胞的传代
当HMC3细胞密度达到80%-90%时,进行传代培养。
使用不含钙、镁离子的PBS润洗HMC3细胞,加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mM EDTA于培养瓶中消化1-2分钟。
消化后观察HMC3细胞状态,绝大多数细胞变圆并脱落时,加入含10% FBS的培养基终止消化。
离心并去除上清液,重悬HMC3细胞并按1:3的比例分到新培养瓶中,根据需要调整培养基。
HMC3细胞的冻存
在HMC3细胞培养前3代时,冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
制备冻存液(推荐配比:55%(基础培养基DM/F12)+ 40%(血清)+ 5%(DMSO))。
将HMC3细胞悬液加入冻存液后,分装到冻存管中,放入-80℃冰箱过夜,随后转移到液氮长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 17,25 |
D3S1358 | 16,18 |
D5S818 | 11,12 |
D6S1043 | 11 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 13,14 |
D12S391 | 16,21 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 18 |
D19S433 | 15,15.2 |
D21S11 | 30,31.2 |
FGA | 21,25 |
Penta D | 10,14 |
Penta E | 7,13 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 17,19 |