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hcmec/d3细胞(人脑微血管内皮细胞)货号:STM-CL-5158 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

hcmec/d3细胞(人脑微血管内皮细胞)

  • 来源:大脑微血管
  • 细胞特征:贴壁细胞 ,纺锤形细胞
  • 培养基:生长培养基:hCMEC/D3 细胞专用培养基
  • 其他:hCMEC/D3细胞表达多种血脑屏障标志物,如CD34、CD31、CD40、CD105和CD144。
价格:¥ 1,900.00

hcmec/d3细胞系源自人类颞叶微血管(癫痫手术中切除的组织)。

hcmec/d3细胞特性

  • hcmec/d3细胞系通过慢病毒载体转导与人端粒酶催化亚基(hTERT)和SV40大T抗原连续永生化。

  • hcmec/d3细胞通过有限稀释克隆选择性分离CEC,经鉴定hCMEC/D3细胞系特定表型特征与脑内皮细胞(Cerebral Endothelial Cell, CEC)相符。

  • hcmec/d3细胞系是一种稳定、易于生长的血脑屏障(BBB)模型。

  • hcmec/d3细胞适用于药物摄取和主动转运研究,以及了解大脑内皮细胞对不同病原体和炎症刺激的反应。

  • hcmec/d3细胞表达多种血脑屏障标志物,如CD34、CD31、CD40、CD105和CD144。

  • hcmec/d3细胞可用于研究中枢神经系统(CNS)病理学、药物转运机制、神经毒性和神经系统细胞与分子机制。

hcmec/d3细胞参数表

细胞名称hcmec/d3细胞(人脑微血管内皮细胞)
细胞简称HCMEC/D3;hcmecd3
种属来源人类
组织来源颞叶微血管,从癫痫手术中切除的组织分离
细胞形态上皮细胞样,细长型
生长特性贴壁生长,形成毛细血管样结构
主要分离物脑内皮细胞(CECs)
冻存液90% FBS,10% DMSO 或非程序冻存液
培养基础永生化人脑微血管内皮细胞基础培养基
培养条件气相:95% 空气,5% 二氧化碳;温度:37摄氏度,湿度70%-80%
培养周期传代比例:1:2-1:4,每2-3天换液一次
生长因子内皮细胞生长因子(EGF)+ 5% FBS
生长倍增时间每周2至3次
表型鉴定鉴定为脑内皮细胞表型
质控细菌、真菌、支原体检测均为阴性
用途仅限科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
应用神经科学、神经退行性疾病、药物转运机制、神经毒性和细胞分子研究等
冻存条件60% 基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO,液氮储存
保藏机构BCRJ 0401

培养教程

hcmec/d3人脑微血管内皮细胞培养

细胞复苏过程

  • 快速将冻存管放入37°C水浴中,摇动直至完全解冻(<1分钟)。

  • 将解冻后的细胞转移至预先加热至37°C的离心管中,含有3 mL完全培养基。

  • 在1000 rpm下离心5分钟,去除上清液。

  • 使用新的完全培养基完全重悬细胞,确保细胞单个化,并将其接种到10cm培养皿中。

  • 培养过夜,并在第二天进行液体更换并检查细胞密度。

细胞冻存过程

  • 配置冻存液为血清:二甲基亚砜(DMSO)= 9:1的比例。

  • 取长势良好、无细菌污染的hCMEC/D3细胞,汇合度达80%-90%。

  • 使用含0.25% EDTA的胰蛋白酶溶液消化细胞(1-2分钟),并用完全培养基终止消化。

  • 将细胞以1.5 mL冻存液重悬,并转移至预标记好的冻存管中。

  • 标记好细胞种类、日期和操作者信息,并放入梯度冻存盒中。

  • 置于-80°C冰箱中快速冷冻。

细胞传代过程

  • 当hCMEC/D3细胞汇合达到80%时,丢弃旧的培养基。

  • 用PBS润洗细胞两次,每次使用2 mL。

  • 使用1 mL含0.25% EDTA的胰蛋白酶溶液消化细胞,放入培养箱中1-2分钟直至细胞圆形化。

  • 使用1 mL完全培养基终止消化,用九宫格法将细胞吹落并收集至离心管中。

  • 以800-1000 rpm室温离心5分钟,去除上清液。

  • 使用2-3 mL完全培养基重悬细胞,确保细胞沉淀为单个状态。

  • 将细胞以“Z”字形播撒至预先加入7 mL培养基的10cm培养皿中。

  • 轻柔十字交错晃动并静置数分钟,然后放入37°C培养箱中培养。

相关资料

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STR鉴定及相关

AmelogeninX
CSF1PO10,12
D1S165615.3,17.3
D2S44113
D2S133816,20
D3S135816,17
D5S81811
D7S82010,12
D8S117915,16
D10S124814,15
D12S39119.3,22
D13S31711,14
D16S5399,12
D18S5112,19
D21S1130,32.2
D22S104511,15
FGA22,26
Penta D10,12
Penta E5,10
TH017,9
TPOX10,11
vWA14,17

参考文献

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