细胞培养 
细胞工程 
细胞生物学 
参考文献 
关于思泰默 
品牌价值 
货号：STM-CE-3009 规格：5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
大鼠脊髓神经元细胞（原代细胞）
- 来源：脊髓组织
- 细胞特征：贴壁 , 神经元细胞样
- 培养基：原代细胞专用培养基
- 其他：脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞，不能分裂增殖，培养要求高。
大鼠脊髓神经元细胞源自中枢神经系统的延伸部分，即脊髓组织。
大鼠脊髓神经元细胞具有高度的分化程度，无法进行分裂增殖，在培养过程中要求较高。神经干细胞作为一种特殊类型的细胞，具有自我维持和多种分化潜能，对损伤和疾病有较强的反应能力，是神经系统损伤修复和再生研究的热点。
大鼠脊髓神经元细胞特性
大鼠脊髓神经元细胞分离自脊髓组织，是源自脑的中枢神经系统延伸部分。
脊髓主要功能是传送脑与外周之间的神经信息，是许多简单反射的中枢。
脊髓的结构包括灰质区和白质区，其中灰质区主要由神经细胞构成。
脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞，不能分裂增殖，培养要求高。
神经干细胞具有自我维持和多种分化潜能，对损伤和疾病具有反应能力，是神经系统损伤修复和再生研究的热点。
大鼠原代脊髓神经元细胞是用于神经科学研究和药物筛选的重要工具。
大鼠脊髓神经元细胞参数表
| 细胞名称 | 大鼠脊髓神经元细胞（原代细胞）RN-SC |
| 来源 | 大鼠脊髓组织 |
| 功能 | 传递脑与外周神经系统之间的信息；许多简单反射的中枢 |
| 细胞形态 | 神经元细胞样，长梭状或不规则形 |
| 神经元含量 | 低，分离纯化难度大 |
| 分化程度 | 高度分化，不能分裂增殖 |
| 培养基 | 神经元细胞专用培养基 |
| 初期形态 | 刚接种时呈圆形，体积小，透亮，无突起 |
| 培养进展 | 2-3天：胞体增大，突起增多延长；6-7天：细胞体饱满，突起增多并交织成网；20天后：细胞死亡增加，出现内空泡，突起粗细不均甚至脱壁，细胞崩解 |
| 培养神经干细胞 | 3-4天后形成神经球，悬浮生长 |
| 生长特性 | 贴壁生长，属于终末分化细胞，不具备传代能力 |
| 包被条件 | 使用0.1mg/ml聚-L-赖氨酸（PLL）进行包被 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 培养环境 | 空气（95%）和CO2（5%） |
| 消化液 | 使用0.125%胰蛋白酶进行消化 |
| 细胞鉴定 | 通过Neurofilament、MAP2和β-tubulin III免疫荧光染色为阳性，细胞纯度可达90%以上 |
| 病原体检测 | 不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
培养教程
大鼠脊髓神经元细胞分离及培养操作步骤
1. 培养皿的包被
将盖玻片裁成 0.5cm×0.5cm 大小，洗洁精浸洗、烘干。
经 5%盐酸浸泡30min，自来水冲洗20min，三蒸水冲洗，浸泡过夜并烘干；移入 95%酒精浸泡保存。用前酒精灯烤干，放入 24 孔细胞培养板。
用 0.01%的 L-多聚赖氨酸溶液包被培养皿和小玻片，37℃恒温孵育 4h 或常温过夜。吸弃 L-多聚赖氨酸溶液，灭菌去离子水漂洗培养孔及小玻片，晾干备用。
2. 大鼠脊髓神经元细胞的分离及培养
用 75%酒精消毒新鲜 24h 内的健康 SD 大鼠，在无菌条件下断头，分离并切取脊髓，置于盛冷的pH7.2、无钙、镁的D-Hank's液的平皿中（下置冰袋）。
无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。
用虹膜剪将组织剪切成 1mm3左右的组织块，用 0.125%胰蛋白酶消化，37℃作用 10min，期间振摇 2~3次。
巴斯德吸管轻轻吹打 20次，静置 5min，将细胞上清移入新的无菌离心管，加入完全接种液终止消化。剩余组织按照上述步骤继续消化，重复2-3次，制成细胞悬液。
将新的离心管中细胞悬液，离心（1000r/min，10 min，4℃），弃去上清液。加入完全培养液重悬，200 目不锈钢网过滤。
将滤液进行台盼蓝拒染试验，血细胞计数板镜下计数。以 8.0 × 104 至 1.0 × 105/mL 的密度将细胞以 400µl/孔接种到预先用 L-多聚赖氨酸包被的 24 孔培养板。
置于 37℃、5% CO2 培养箱培养 4～6h，全量更换为无血清培养液。
体外培养第 3天，加入 Ara-C 工作液，以抑制非神经细胞过度增殖，作用 24 h 后吸出。
此后每 3d 半量换液1次，体外培养第 7～21天的细胞用于实验。
无菌操作注意事项
细胞培养过程中保持操作区域的无菌清洁，包括使用紫外线和臭氧消毒设备、更换专用拖鞋、穿戴一次性橡胶手套、实验服、口罩和帽子等。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
- Sertoli细胞促进大鼠胚胎中脑神经前体细胞分化的作用及其对Sertoli细胞DHH基因的相关研究 《河北医科大学》 2005年
- 摘要：...多向分化能力的原始细胞,在特定因素影响或诱导下能向神经元和胶质细胞分化。深入研究并获...
- 血管内皮生长因子基因修饰C17.2神经干细胞移植治疗脑梗死的实验研究 中华神经医学杂志 > 2007年7期
- 摘要：...皮生长因子(VEGF)基因修饰神经干细胞(NSC)移植治疗脑梗死大鼠模型的治疗效果,...
- SD-BMSC-Exosome对氧化损伤的神经细胞HT22的保护修复 《兰州大学》 2017年
- 摘要：本论文主要研究了大鼠骨髓间充质干细胞BMSC来源的Exosome对受到H2O2损伤后的HT...
- 疼痛对Wistar大鼠皮下Walker-256肿瘤细胞生长的影响及机制研究 《上海交通大学》 2016年
- 摘要：【目的】:创建疼痛伴肿瘤的大鼠模型,并应用该模型探讨疼痛对肿瘤发生、发展的影响及其相关机制...
- 大鼠C6胶质瘤细胞系中肿瘤干细胞样细胞的鉴定及其生物学特性的研究 《浙江大学》 2008年
- 摘要：背景:胶质瘤,尤其是胶质母细胞瘤,恶性程度高,术后复发快,且对放化疗敏感性差,5年生存率仅...
- 查看完整内容 >
上一篇：没有了
下一篇：大鼠下丘脑神经元细胞（原代细胞）