
ND7/23细胞(大鼠小鼠神经元融合细胞)
- 来源:神经节神经元
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:ND7/23细胞可以被诱导分化为多种不同类型的细胞,如成熟神经元和胶质细胞
ND7/23大鼠小鼠神经元融合细胞系是通过聚乙二醇(PEG)介导的小鼠神经母细胞瘤N18TG2细胞与大鼠背根神经节神经元(由PEG介导细胞融合)融合生成的杂交细胞株。ND7/23细胞系结合了小鼠肿瘤细胞的快速增殖能力和大鼠成熟神经元的功能特性,表现出神经元样形态和功能。ND7/23细胞作为一种稳定的神经模型,在神经科学的基础研究中具有广泛应用,特别是在神经母细胞瘤机制及神经退行性疾病模型的研究中提供了重要支持。ND7/23细胞融合技术使其保留了各自的生物学特性,为神经系统发育、病理机制探索及药物筛选提供了可靠的实验工具。
ND7/23细胞特性特征
钠通道表达:ND7/23细胞内源性表达多种电压依赖性钠通道,包括Nav1.2、Nav1.3、Nav1.6和Nav1.7。这些通道在神经信号传递中起关键作用,特别是在感觉传入神经和背根神经节的神经元中。
电生理特性:表现出对河豚毒素(TTX)敏感的钠电流,适合用于膜片钳实验和离子通道功能研究。
基因表达:ND7/23细胞系具有稳定的遗传学特性,能够表达与神经元功能相关的多种基因。
ND7/23神经元融合细胞参数表
细胞名称 | ND7/23细胞(大鼠小鼠神经元融合细胞) |
细胞别称 | ND7-23;ND723 |
种属来源 | 小鼠(N18TG2)与大鼠背根神经节神经元的杂交细胞株 |
组织来源 | 脊髓 |
细胞形态 | 神经元样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
培养基 | DMEM高糖培养基 + 10%胎牛血清 + 1%青霉素-链霉素(P/S) |
培养条件 | 温度:37℃,气相:95%空气 + 5%二氧化碳 |
pH值 | 7.2 - 7.4 |
无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检测均为阴性 |
运输方式 | 冻干运输或干冰冷冻运输 |
安全性说明 | 所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在生物危害性,需在二级生物安全台内操作。 |
冻存条件 | 90%胎牛血清 + 10% DMSO |
保存条件 | 液氮存储 |
传代方式 | 胰酶消化 |
传代比例 | 1:3至1:6 |
换液频率 | 每周2至3次 |
电生理特性 | 表现出对河豚毒素(TTX)敏感的钠电流,内源性表达Nav1.2、Nav1.3、Nav1.6和Nav1.7通道。 |
基因表达特征 | 表达与神经元功能相关的多种基因,适合用于基因功能分析和转基因研究。 |
应用领域 | 药物筛选、基础研究、神经发育和疾病机制研究等 |
培养教程
ND7/23大鼠小鼠神经元融合细胞培养教程
ND7/23细胞复苏
将冻存的ND7/23细胞管置于37℃水浴中快速摇动解冻,避免水进入管内。
解冻后,将ND7/23细胞悬液(约1 mL)转入含4 mL新鲜培养基的无菌离心管中,轻轻混匀以减小冷冻对细胞的损伤。
以1000 rpm离心3分钟,去除上清液。
加入1-2 mL新鲜培养基重新悬浮ND7/23细胞,确保充分混匀。
将悬浮的ND7/23细胞转移至培养瓶或10 cm培养皿中,加入8 mL培养基。
过夜培养,次日更换培养基并检查ND7/23细胞的贴壁和生长状态。
ND7/23细胞传代
当ND7/23细胞密度达到80%-90%时,可进行传代操作。
弃去培养液,用无钙镁离子的PBS洗涤ND7/23细胞1-2次。
加入1-2 mL胰蛋白酶-EDTA消化液,覆盖ND7/23细胞表面,并置于37℃培养箱中消化1-2分钟。
观察ND7/23细胞状态,大部分细胞变圆、脱落后,轻轻敲击瓶壁终止消化,加入新鲜培养基稀释消化液。
在1000 rpm条件下离心4分钟,去除上清液后重新悬浮ND7/23细胞。
将ND7/23细胞按1:2至1:5的比例分瓶,加入8 mL新鲜培养基,继续培养。
ND7/23细胞冻存
当ND7/23细胞状态良好时收集,离心后用PBS洗涤,去除上清液。
使用无血清冻存液,细胞浓度调整为5×10^6至1×10^7 cells/mL。每支冻存管加入1 mL ND7/23细胞悬液,密封并标记。
将ND7/23细胞冻存管置于-80℃环境下预冻24小时,再转移至液氮中长期保存。
注意事项
操作过程中应严格保持无菌环境,以避免ND7/23细胞污染。
定期检查和更换培养基,保持ND7/23细胞的健康生长。
完整记录每次操作时间及ND7/23细胞状态,以便后续实验追踪。
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参考文献
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