
STC1细胞(小鼠小肠内分泌细胞)
- 来源:小肠
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:90%DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:STC1细胞产生激素分泌素;转染效率较低,不易于转染
STC-1细胞系是一种来源于小鼠小肠内分泌肿瘤的细胞系,最初于1990年从10至13周大的双转基因小鼠肠道中分离。
STC1细胞系源自于携带特定转基因的双转基因小鼠,这些小鼠通过以下方式获得转基因:一个基因构建将大鼠胰岛素启动子(RIP)与多瘤小T(PyST)抗原融合,另一个将大鼠胰岛素启动子(RIP)与SV40早期区域(Tag)融合。通过交配这两种转基因小鼠,得到的双转基因小鼠通常会出现肠道肿瘤和胰腺β细胞瘤。肠道和胰腺肿瘤是作为单独的实体出现的。
STC1细胞特性特征
分子基因特征:STC-1细胞系表达大鼠胰岛素启动子(RIP)与多瘤病毒小T抗原(PyST)和SV40早期区域(Tag)融合基因。
表达特征:STC-1细胞系主要表达激素分泌素。
肿瘤特性:肠道肿瘤和胰腺β细胞瘤
转染特性:转染效率较低,不易于转染
STC1细胞参数表
细胞名称 | STC1细胞(小鼠小肠内分泌细胞) |
细胞别称 | STC-1; 小肠内分泌细胞 |
细胞来源 | 种属: 小鼠; 组织: 小肠; 年龄: 10-13周;双重转基因小鼠的肠肿瘤组织 |
细胞类型 | 肠神经内分泌细胞 |
形态特性 | 形态: 上皮细胞样; 生长: 贴壁 |
疾病背景 | 癌; 侵袭性小肠神经内分泌 |
安全等级 | 生物安全等级1级 |
培养基 | DMEM (高糖) + 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37°C, 95%空气 + 5%CO2, 湿度70%-80% |
传代与换液 | 传代比例: 首次1:2; 换液频率: 2~3次/周 |
冻存与储存 | 冻存液: 90% FBS + 10% DMSO; 储存: 液氮或-80°C |
基因表达 | 分泌素; 大鼠胰岛素基因启动子融合基因 |
功能特性 | 产生激素分泌素 |
用途 | 科研用途; 人类肠道内分泌肿瘤模型 |
支原体检测 | 无 |
细胞代数 | 10代以内 |
保藏机构 | ATCC; CRL-3254 |
运输与接收 | 活细胞: 常温; 冻存管: 干冰; 接收后立即处理 |
培养教程
STC1小鼠小肠内分泌细胞培养教程
STC-1细胞接收处理
活细胞 (T25 瓶):使用 75% 酒精消毒瓶壁,然后置于 37°C 培养箱中孵育 2-3 小时。
冻存管:立即转入液氮或直接进行复苏处理。
STC-1细胞复苏
在 37°C 水浴中快速解冻STC-1细胞。
将STC-1细胞悬液转移到含 9ml 预热完全培养基的离心管中。
以 1000rpm 离心 5 分钟,弃去上清。
重悬STC-1细胞并将其转移到培养瓶中,置于培养箱中培养。
STC-1细胞传代
传代密度:STC-1细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。
首次传代比例:建议 1:2(1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或 2 个 6cm 皿)。
换液频率:每周 2~3 次。
STC-1细胞传代步骤
弃去培养上清,用 PBS 润洗STC-1细胞 1-2 次。
加入 1ml 0.25% 胰蛋白酶-EDTA,37°C 消化 1-2 分钟。
在显微镜下观察,当STC-1细胞变圆并脱落时,加 2-3ml 完全培养基终止消化。
以 1000rpm 离心 5 分钟,弃去上清。
重悬STC-1细胞,并按 1:2 比例分装到新的培养瓶中。
STC-1细胞冻存
冻存液:90% FBS + 10% DMSO
细胞密度:5 x 10^5 cells/ml
储存:液氮或 -80°C 冰箱
STC-1细胞培养注意事项
STC-1细胞生长较慢,倍增时间较长。
STC-1细胞的转染效率较低,不易于转染。
每次传代后仔细观察STC-1细胞状态。
避免过度消化和机械损伤STC-1细胞。
定期检查STC-1细胞的支原体污染。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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