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MRC-5细胞培养常见问题
MRC-5的推荐培养密度是多少？
细胞种子密度对于细胞获得足够的营养和表面积以进行良好的气体交换和生长是极其重要的。关于MRC-5细胞的推荐接种密度，请参阅分析证书（COA），以获得相应信息资料。
建议启动种子密度：2.0 x 104到6.0 x 104个活细胞/cm2
推荐培养的种子密度：1.0 x 104至6.0 x 104活细胞/cm2
MRC-5细胞可以生长多久，直到它们开始衰老？
MRC-5细胞能够在衰老开始前进行42至46次倍增（PDL）。PDL与通道号不同。在常规亚培养过程中，计算这种正常二倍体人类细胞系的PDL是非常重要的。这将确保细胞被最低限度地培养并尽快冷冻，以免它们开始衰老。
传代次数是指培养物中的细胞被亚培养的次数，通常不考虑所涉及的接种密度或回收率。群体倍增水平（PDL）是指自体外初次分离以来，群体中细胞倍增的总次数。这通常是四舍五入到最接近的整数的估计值。
MRC-5细胞的最大传代次数是多少？
MRC-5细胞对DMSO敏感，解冻后应立即通过在9-10ml补充有10%胎牛血清的完全配制的Eagle’s Minimum Essential Medium中缓慢离心（125 x g离心10分钟）除去冷冻保护剂。MRC-5成纤维细胞系来源于正常肺组织，并且这些细胞能够在衰老开始前进行42至46次倍增。
如果漂浮的MRC-5细胞没有贴壁，该怎么办？
应保留在MRC-5培养物中发现的漂浮物，并将其添加回培养物中。初次接种后，不要丢弃任何漂浮的细胞，因为这些细胞仍然可以存活。通过温和离心（以125xg离心5-10分钟）将它们保留，并将它们添加回与具有新鲜培养基的贴壁细胞群体相同的烧瓶中。该细胞系从冷冻保存中完全复苏可能很慢，只需使用思泰默推荐的培养基继续生长细胞，直到它们膨胀并达到融合。MRC-5细胞可能需要长达6天的时间才能达到传代融合。
MRC-5的完整培养基是如何制备的？
MRC-5细胞系使用的生长培养基是配制的Eagle’s Minimum Essential medium EMEM，补充有10%未经热灭活的胎牛血清。
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