细胞培养 
细胞工程 
细胞生物学 
参考文献 
关于思泰默 
品牌价值 
货号：STM-CL-5131 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
D283Med细胞系（人脑髓母细胞瘤细胞系）
- 来源：脑组织
- 细胞特征：半贴半悬，上皮细胞样
- 培养基：生长培养基：MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：基因表达：谷氨酰胺合成酶、神经元特异性烯醇化酶阳性，但不表达胶质纤维酸性蛋白和S100蛋白。
D283 Med细胞系由Friedman等人在1985年建立，源自一名6岁患有神经管细胞瘤且有腹腔转移的白人男性小孩的腹水细胞。D283 Med细胞是一种上皮样细胞系。
D283 Med细胞系特性
源自6岁白人男性小孩的神经管细胞瘤腹水细胞和腹膜转移，用于研究人脑髓母细胞瘤。
裸鼠实验中可以形成连续移植的颅内和皮下肿瘤。
具有特定的染色体核型：45, XY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1;20)(q12;q13), 8q+, 17p+。
基因表达：谷氨酰胺合成酶、神经元特异性烯醇化酶阳性，但不表达胶质纤维酸性蛋白和S100蛋白。
表达SCLC（小细胞肺癌）的生化标志物：神经元特异性烯醇化酶、肌酸激酶的脑同工酶、L-DOPA脱羧酶和蛙皮素样免疫反应性
表达同工酶：AK-1, ES-D, G6PD, PGM1, PGM3。
D283 Med细胞系参数表
| 细胞名称 | D283Med细胞系（人脑髓母细胞瘤细胞系） |
| 别称 | D283 MED; D283-MED; D283_Med; D-283 Med; D-283MED; D283MED; D283Med; D283-Med; D-283; D283; Med 283; H283 |
| 来源 | 一名6岁患有神经管细胞瘤且有腹腔转移的白人男性小孩的腹水细胞 |
| 细胞形态 | 上皮样细胞 |
| 生长特性 | 悬浮细胞的多细胞聚集体，和一些贴壁细胞 |
| 倍增时间 | ~52小时 |
| 致瘤性 | 是，在裸鼠中形成可连续移植的颅内和皮下肿瘤 |
| 基因表达 | 谷氨酰胺合成酶阳性；神经元特异性烯醇化酶阳性；胶质纤维酸性蛋白阴性；S100蛋白阴性； 表达升高水平的SCLC四种生化标志物（神经元特异性烯醇化酶；肌酸激酶的脑同工酶；L-DOPA脱羧酶；蛙皮素样免疫反应性） |
| 同工酶 | AK-1, 1；ES-D, 1；G6PD, B；GLO-I, 2；Me-2, 0；PGM1, 1；PGM3, 1 |
| 细胞污染 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性 |
| 细胞生长 | 细胞生长良好，形态正常 |
| 临床数据 | D283-Med细胞系由Friedman等人于1985年从恶性腹水细胞和腹膜转移中建立。 核型为45，XY，-7，-8，-17，-20，der（20）t（1；20）（q12；q13），8q+，17p+。具有5.4%的较高倍体频率。 存在三条标记染色体：der（20）t（1；20）（q12；q13）、8q+和17p+。N7、N17和N20具有单个副本。 单个X在结构上是正常的，并且通过荧光显微镜证实存在Y染色体。 |
| 细胞生长特性 | 悬浮聚团生长，有少数贴壁细胞 |
| 保藏机构 | ATCC; HTB-185 |
| 用途 | 研究人脑髓母细胞瘤 |
培养教程
D283Med人脑髓母细胞瘤细胞系培养
传代方法
收集细胞：
将培养瓶中的悬浮细胞收集到离心管中。
用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，PBS润洗后细胞会脱落，PBS也要回收到离心管中。
消化细胞：
加入0.25%（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2 mL，T75瓶2-3 mL），置于37°C培养箱中消化1-2分钟。
在显微镜下观察细胞消化情况，细胞大部分变圆并脱落后，轻敲培养瓶并加入3-4 mL含10% FBS的培养基来终止消化。
离心：
将收集到的悬浮细胞、PBS清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。
重悬：
加入1-2 mL培养基重悬混匀，将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中，添加6-8 mL新完全培养基以保持细胞的生长活力。
后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
冻存步骤
细胞收集和消化：
按照传代过程收集和消化细胞。
使用血球计数板计数，决定细胞的冻存密度，一般为1×10^6~1×10^7个活细胞/mL。
离心和重悬：
1000 rpm离心3-5分钟，去掉上清。
用配制好的细胞冻存液重悬细胞，每1 mL冻存液含1×10^6~1×10^7个活细胞，分配到冻存管中。
冻存和储存：
标注好名称、代数、日期等信息。
将细胞置于程序降温盒中，在-80°C冰箱中过夜，然后转入液氮容器中储存。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X,Y |
| CSF1PO | 9,12 |
| D2S1338 | 17,23 |
| D3S1358 | 15 |
| D5S818 | 11 |
| D7S820 | 10 |
| D8S1179 | 12,13 |
| D13S317 | 8,10 |
| D16S539 | 11 |
| D18S51 | 16,18 |
| D19S433 | 13,14 |
| D21S11 | 28,30.2 |
| FGA | 20,23 |
| Penta D | 9,13 |
| Penta E | 7,10 |
| TH01 | 7 |
| TPOX | 8,11 |
| vWA | 16,18 |
