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D283Med细胞系(人脑髓母细胞瘤细胞系)货号:STM-CL-5131 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

D283Med细胞系(人脑髓母细胞瘤细胞系)

  • 来源:脑组织
  • 细胞特征:半贴半悬,上皮细胞样
  • 培养基:生长培养基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
  • 其他:基因表达:谷氨酰胺合成酶、神经元特异性烯醇化酶阳性,但不表达胶质纤维酸性蛋白和S100蛋白。
价格:¥ 1,450.00

D283 Med细胞系由Friedman等人在1985年建立,源自一名6岁患有神经管细胞瘤且有腹腔转移的白人男性小孩的腹水细胞。D283 Med细胞是一种上皮样细胞系。

D283 Med细胞系特性

  • 源自6岁白人男性小孩的神经管细胞瘤腹水细胞和腹膜转移,用于研究人脑髓母细胞瘤。

  • 裸鼠实验中可以形成连续移植的颅内和皮下肿瘤。

  • 具有特定的染色体核型:45, XY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1;20)(q12;q13), 8q+, 17p+。

  • 基因表达:谷氨酰胺合成酶、神经元特异性烯醇化酶阳性,但不表达胶质纤维酸性蛋白和S100蛋白。

  • 表达SCLC(小细胞肺癌)的生化标志物:神经元特异性烯醇化酶、肌酸激酶的脑同工酶、L-DOPA脱羧酶和蛙皮素样免疫反应性

  • 表达同工酶:AK-1, ES-D, G6PD, PGM1, PGM3。

D283 Med细胞系参数表

细胞名称D283Med细胞系(人脑髓母细胞瘤细胞系)
别称D283 MED; D283-MED; D283_Med; D-283 Med; D-283MED; D283MED; D283Med; D283-Med; D-283; D283; Med 283; H283
来源一名6岁患有神经管细胞瘤且有腹腔转移的白人男性小孩的腹水细胞
细胞形态上皮样细胞
生长特性悬浮细胞的多细胞聚集体,和一些贴壁细胞
倍增时间~52小时
致瘤性是,在裸鼠中形成可连续移植的颅内和皮下肿瘤
基因表达

谷氨酰胺合成酶阳性;神经元特异性烯醇化酶阳性;胶质纤维酸性蛋白阴性;S100蛋白阴性;

表达升高水平的SCLC四种生化标志物(神经元特异性烯醇化酶;肌酸激酶的脑同工酶;L-DOPA脱羧酶;蛙皮素样免疫反应性)

同工酶AK-1, 1;ES-D, 1;G6PD, B;GLO-I, 2;Me-2, 0;PGM1, 1;PGM3, 1
细胞污染HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性
细胞生长细胞生长良好,形态正常
临床数据

D283-Med细胞系由Friedman等人于1985年从恶性腹水细胞和腹膜转移中建立。

核型为45,XY,-7,-8,-17,-20,der(20)t(1;20)(q12;q13),8q+,17p+。具有5.4%的较高倍体频率。

存在三条标记染色体:der(20)t(1;20)(q12;q13)、8q+和17p+。N7、N17和N20具有单个副本。

单个X在结构上是正常的,并且通过荧光显微镜证实存在Y染色体。

细胞生长特性悬浮聚团生长,有少数贴壁细胞
保藏机构ATCC; HTB-185
用途研究人脑髓母细胞瘤

培养教程

D283Med人脑髓母细胞瘤细胞系培养

传代方法

  1. 收集细胞:

    • 将培养瓶中的悬浮细胞收集到离心管中。

    • 用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,PBS润洗后细胞会脱落,PBS也要回收到离心管中。

  2. 消化细胞:

    • 加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2 mL,T75瓶2-3 mL),置于37°C培养箱中消化1-2分钟。

    • 在显微镜下观察细胞消化情况,细胞大部分变圆并脱落后,轻敲培养瓶并加入3-4 mL含10% FBS的培养基来终止消化。

  3. 离心:

    • 将收集到的悬浮细胞、PBS清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000 rpm离心5分钟,弃去上清。

  4. 重悬:

    • 加入1-2 mL培养基重悬混匀,将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8 mL新完全培养基以保持细胞的生长活力。

    • 后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

冻存步骤

  1. 细胞收集和消化:

    • 按照传代过程收集和消化细胞。

    • 使用血球计数板计数,决定细胞的冻存密度,一般为1×10^6~1×10^7个活细胞/mL。

  2. 离心和重悬:

    • 1000 rpm离心3-5分钟,去掉上清。

    • 用配制好的细胞冻存液重悬细胞,每1 mL冻存液含1×10^6~1×10^7个活细胞,分配到冻存管中。

  3. 冻存和储存:

    • 标注好名称、代数、日期等信息。

    • 将细胞置于程序降温盒中,在-80°C冰箱中过夜,然后转入液氮容器中储存。

相关资料

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STR鉴定及相关

AmelogeninX,Y
CSF1PO9,12
D2S133817,23
D3S135815
D5S81811
D7S82010
D8S117912,13
D13S3178,10
D16S53911
D18S5116,18
D19S43313,14
D21S1128,30.2
FGA20,23
Penta D9,13
Penta E7,10
TH017
TPOX8,11
vWA16,18

参考文献

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