
人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y细胞系
- 来源:SH-SY5Y细胞是神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH的三次克隆亚系,该细胞系于1970年从一名4岁女性癌症患者的转移性骨肿瘤建立
- 细胞特征:上皮细胞样;半贴壁(贴壁和悬浮同时存在)生长;请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。
- 培养基:43%MEM+43%F12+10%FBS+1% MEM NEAA+1%丙酮酸钠+1% GlutaMAX-1+1%P/S
- 其他:SH-SY5Y细胞抗原表达:血型A;Rh+
SH-SY5Y细胞系源于1970年,由纪念斯隆-凯特琳癌症中心的June L Biedler等科学家从一名4岁女童的神经母细胞瘤的骨髓穿刺样本建立。最初,此样本细胞被命名为SK-N-SH细胞系。后来,通过经历三次克隆(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y),SH-SY5Y亚系最终形成。
SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性,主要用于研究神经科学和神经系统疾病。其形态呈现上皮细胞样,具有多个短而细的细胞突起,有时会聚集成细胞团块。
SH-SY5Y细胞抗原表达:血型A;Rh+
SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞参数表
细胞名称 | SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞) |
细胞别称 | SHSY5Y; SHSY-5Y; SH-Sy5y; SK-SH-SY5Y; SY5Y |
种属来源 | 人 |
组织来源 | 脑神经母细胞瘤,转移部位骨髓 |
疾病特征 | 脑神经母细胞瘤 |
细胞形态 | 上皮样 |
生长特性 | 半贴壁(贴壁和悬浮同时存在) |
培养基 | 43%MEM+43%F12+10%FBS+1% MEM NEAA+1%丙酮酸钠+1% GlutaMAX-1+1%P/S |
传代比例 | 1:2-1:4 |
换液周期 | 48-72 小时 |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5% CO2,温度:37℃ |
冻存条件 | 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮储存 |
质量检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
细胞特性 | 1970年由神经母细胞瘤患者的转移骨瘤灶细胞SK-N-SH经三次克隆得到 中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性 表达多巴胺-β-羟基酶等神经元特有酶 |
应用 | 科研使用,广泛用于神经科学研究 - PD(帕金森病)发病机制研究 药物筛选、毒性测试、免疫组化染色、转染宿主等 |
特征 | 细胞呈上皮细胞样态,形成神经母细胞簇 - 细胞聚集成细胞丛 |
SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞应用
神经科学研究: SH-SY5Y细胞作为神经细胞模型,用于研究神经发育、神经细胞生长和分化、突触传递等。
神经系统疾病研究: 由于其在多巴胺-β-羟基酶活性上的表现,SH-SY5Y细胞被广泛应用于研究帕金森病等神经系统疾病。
药物筛选和毒性研究: SH-SY5Y细胞常被用于评估药物的毒性和疗效,及进行新药筛选。
3D细胞培养: SH-SY5Y细胞用于构建三维细胞培养模型。
人神经母细胞瘤细胞SHSY5Y潜在问题
根据最新研究,部分SH-SY5Y细胞可能存在被小鼠细胞污染的问题,这可能会对实验结果产生影响。因此,在使用SH-SY5Y细胞时,需要进行相关的质量控制和检测,以确保实验结果的可靠性和准确性。
培养教程
人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y培养方案
1. 培养基选择和配制
建议使用MEM/F12或DMEM/F12培养基,含有NEAA、丙酮酸钠、GlutaMAX-1。
培养基需添加稳定性的胎牛血清(FBS),浓度通常为10-20%。
加入抗生素/抗菌素(如青霉素/链霉素)来预防细菌污染,浓度为50-100单位/毫克/升。
2. 细胞接收与处理
细胞收到后,立即将培养瓶放置于37°C的培养箱中,避免温度变化和震荡。
若细胞出现皱缩或脱落,可将培养瓶静置2-4小时,以稳定细胞状态。
3. 细胞传代频率与接种密度
建议每5-7天传代一次细胞,以维持细胞活性和稳定生长。
启动接种时,推荐密度为8.0×10^4 至 1.5×10^5 活细胞/cm^2。
继代培养时,密度应控制在4.0 × 10^4 至 1.0×10^5 活细胞/cm^2。
4. 形态调节与成团处理
对于形态不理想的细胞,可尝试调整培养基组分或添加生长因子(如神经营养因子)。
若细胞成团严重,可采取低密度接种、使用多聚赖氨酸包被的培养器皿、更换优质血清等方法。
5. 常见问题解决
若细胞出现皱缩或脱落,可通过常温静置和离心处理。
细胞生长缓慢时,应注意控制密度和培养基选择。
成团严重时,可尝试不同的培养条件或调整培养基成分。
6. 注意事项
传代过程中避免连续消化细胞,传代时消化时间不宜过长,通常1-3分钟即可。
传代时应轻柔处理细胞,避免对细胞造成机械刺激。
培养过程中要注意细胞密度控制,密度过高或过低都会影响细胞生长状态。
7. 培养环境与条件
培养箱内温度应保持在37°C,CO2浓度为5%。
定期检查培养箱内的湿度和CO2浓度,确保细胞处于适宜的环境中。
培养器皿应在无菌条件下操作,定期更换培养基以避免细菌或真菌污染。
8. 培养实验操作安全
在培养操作中,应遵守实验室安全操作规程,穿戴实验室服、手套和护目镜。
废弃的培养废液和耗材应按照生物危险废物处理。
注意事项:该细胞为半贴壁半悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。
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STR点位信息
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D1S1656 | 12 |
D2S441 | 11,11.3 |
D2S1338 | 17,19 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12 |
D6S1043 | 12,18 |
D7S820 | 7,10 |
D8S1179 | 15 |
D10S1248 | 14 |
D12S391 | 18,22 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 8,13 |
D18S51 | 13,16 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 31,31.2 |
D22S1045 | 16,17 |
FGA | 23.2,24 |
Penta D | 10,12 |
Penta E | 7,11 |
TH01 | 7,10 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,18 |
参考文献
- 知母皂苷元对H2O2损伤SH-SY5Y细胞中脑源性神经营养因子的调控及机制研究 上海交通大学学报(医学版) > 2019年6期
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