
m-07e细胞 (人巨细胞白血病细胞)
- 来源:外周血
- 细胞特征:悬浮细胞 , 淋巴母细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+8ng/mL GM-CSF+1% P/S
- 其他:M-07e细胞提供外显子组和RNA序列数据。
m-07e细胞从1987年诊断为患有急性巨核细胞白血病(AML M7)的6个月大女孩的外周血中建立,是生长因子非依赖性细胞系M-07的亚系。
m-07e细胞特性
M-07e细胞对以下细胞因子有增殖反应:GM-CSF、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-15、NGF、SCF、TNF-α、TPO。
M-07e细胞系可在3-4周内迅速变得不依赖细胞因子,可能由于独立细胞的生长。
M-07e细胞提供外显子组和RNA序列数据。
m-07e细胞参数表
中文名称 | m-07e细胞 (人巨细胞白血病细胞) |
细胞别称 | M-07E; M-O7e; M07e; Mo7e; MO7e; M07E; MO7E |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
培养环境 | 气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37°C |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 8ng/mL GM-CSF + 1% P/S |
传代比例(密度) | 5×10^5-1×10^6 cells/mL |
换液频次 | 2~3次/周 |
细胞建立 | 建立于1987年,来源于一名6个月大女婴的外周血,患有急性巨核细胞白血病(AML M7)。 |
细胞背景 | 是生长因子非依赖性细胞系M-07的一个亚系,对多种细胞因子如GM-CSF、IFN和IL家族成员有增生反应。 |
生长特性 | 可能在短时间内(3-4周内)独立于细胞因子而生长,提供外显子和RNA序列数据。 |
倍增时间 | ~40小时 |
供体年龄 | 女性,6个月 |
组织来源 | 外周血 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 白血病细胞 |
生物安全等级 | 1 |
抗原表达 | CD3-、CD13+、CD14-、CD19-、CD33+、HLA-DR - |
细胞保藏中心 | DSMZ; ACC-104 |
培养教程
m-07e人巨细胞白血病细胞培养教程
维持M-07e细胞生长
悬浮状态下生长的M-07e细胞可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持生长状态。
一般情况下,M-07e细胞密度维持在1×10^5~1×10^6个/mL,以维持M-07e细胞的正常生长。
M-07e细胞传代操作
方法一
收集M-07e细胞悬液到无菌离心管中,1000 rpm离心10分钟。
弃去上清,加入6-8 mL新鲜培养基,重悬M-07e细胞,温柔吹打。
将M-07e细胞悬液转移到新T25瓶中,按1:2~1:5的比例进行传代。
方法二:
可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余M-07e细胞悬液重悬。
将M-07e细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8mL培养基的皿中或瓶中。
M-07e细胞冻存步骤
将培养瓶内的M-07e细胞悬液用吸管完全吸出,转移到无菌离心管中。
进行M-07e细胞计数,1000 rpm离心10分钟,弃去上清。
加适量M-07e细胞冻存液重悬细胞。
将M-07e细胞悬液分装到1mL冻存管中,4℃预冷30分钟。
将冻存管转入程序降温盒中,在-80℃过夜。
之后将冻存管快速转移到液氮中保存。
M-07e细胞复苏步骤
将含有1mL M-07e细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。
在1000 rpm条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。
将所有M-07e细胞悬液加入培养瓶中培养过夜,或将M-07e细胞悬液加入10cm皿中,加入约8mL培养基,培养过夜。
第二天换液并检查M-07e细胞密度。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,10 |
D2S1338 | 19,25 |
D3S1358 | 16,19 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 13 (DSMZ=ACC-104) |
13,16 (CCRID=1101HUM-PUMC000112) | |
D13S317 | 10,11 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 15,20 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 30,32.2 |
FGA | 18,22 |
Penta D | 9 |
Penta E | 12,14 |
TH01 | 6,8 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,18 |
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