Kasumi-6细胞（人急性髓细胞白血病细胞） （暂不提供）

Kasumi-6细胞系是于1999年从一名64岁亚洲男性复发性急性髓系白血病（M2亚型）患者的外周血中分离建立。Kasumi-6细胞系作为非t(8;21)型急性髓系白血病的研究模型，尤其用于探索突变型CCAAT/增强子结合蛋白α (C/EBPα)在白血病发生过程中的作用。

Kasumi-6细胞特性特征

• 基因特征：Kasumi-6细胞系存在8号和21号染色体的转位，导致AML1基因与ETO基因的融合，形成AML1-ETO融合基因。这一融合基因在急性髓系白血病的发展中起着关键作用。

• 原始白血病细胞和Kasumi-6细胞均存在C/EBPα基因的半合子点突变。

• 抗原表达：Kasumi-6细胞表达CD33、CD13、CD11b、HLA-DR等标志物，且CD3、CD14、CD19、CD41和CD34阴性。这些抗原的表达特征表明其髓系来源。

• 蛋白质表达：Kasumi-6细胞系表达C/EBPα蛋白，但缺乏C/EBPα结合活性，影响其正常的分化功能。

• 基因表达：髓过氧化物酶阴性；
  

• 生长因子反应：对多种生长因子（如IL-3、IL-6、G-CSF和GM-CSF）有响应，但对IL-1和IL-5没有反应。

• TPA诱导：使用12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯（TPA）可以诱导Kasumi-6细胞分化为贴壁的单核细胞样细胞。

• 细胞核型：核型为45, XY, -9，加（12）（p11），加（13）（p111），显示出其染色体异常特征

Kasumi-6细胞参数表

Kasumi-6人急性髓细胞白血病细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的Kasumi-6细胞管，立即放入37℃水浴中轻轻摇晃，快速解冻（约1-2分钟）。
  

• 取出后用75%酒精消毒管壁，确保无菌操作。

• 将解冻的Kasumi-6细胞悬液移至离心管，加入5 mL预温的完全培养基。
  

• 在1000 RPM下离心5分钟，弃去上清液。

• 用4-6 mL完全培养基轻轻重悬Kasumi-6细胞。
  

• 将细胞悬液转移至培养瓶，置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养过夜。

细胞传代

• 每天检查Kasumi-6细胞的密度，当细胞密度达到80%-90%时，需要进行传代。
  

• 悬浮细胞传代：

1. 将Kasumi-6细胞悬液收集到离心管中，以1000 RPM离心8-10分钟，弃去上清。

2. 加入1-2 mL新鲜培养基，轻轻吹打使细胞均匀重悬。

3. 按1:2至1:5的比例将Kasumi-6细胞悬液分配至新培养瓶中，补充至8 mL完全培养基。

• 贴壁细胞传代（如存在少量贴壁）：

1. 弃去培养基，使用无钙镁PBS洗涤Kasumi-6细胞1-2次。

2. 加入1-2 mL胰蛋白酶-EDTA消化液，置于37℃培养箱消化1-2分钟。

3. 当Kasumi-6细胞大部分变圆脱落时，立即加入5 mL含血清的完全培养基终止消化。

4. 轻轻吹打细胞使其完全脱落，离心并重悬后传代。

• 每2-3天进行一次培养基更换，定期观察Kasumi-6细胞的状态。
  

细胞冻存

• 当Kasumi-6细胞生长至80%-90%密度时，弃去培养基并用PBS洗涤一次。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶消化液约1 mL至培养瓶中，当Kasumi-6细胞开始变圆时，立即加入完全培养基终止消化。
  

• 将细胞悬液转移至离心管，1000 RPM离心5分钟，弃去上清。

• 用含10% DMSO的完全培养基重悬Kasumi-6细胞，确保均匀。
  

• 将重悬的Kasumi-6细胞分装入冻存管中，置于-80℃冰箱中进行初步冷冻，随后转移至液氮中长期保存。