
U-CH1细胞(人骶骨脊索瘤细胞) (暂不提供)
- 来源:脊索瘤患者的骶骨
- 细胞特征:可变液泡(长梭形 不规则形状)贴壁生长,间充质样
- 培养基:IMDM + RPMI-1640 (4:1) + FBS 10% + 1 % L-谷氨酰胺 + P/S 1%
- 其他:U-Ch1细胞过度表达转录因子T(Brachyury)
U-Ch1细胞系是由一名56岁白人男性脊索瘤患者的骶骨组织于1998年分离,患者在初次手术后4年接受放疗,并出现了局部复发。U-Ch1细胞系代表了脊索瘤的生物学特性,展现出典型的间充质样形态和异质性特征,细胞通常呈长梭形或不规则形状,并以贴壁方式生长,具有可变的液泡。脊索瘤是一种罕见且生长缓慢的肿瘤,U-Ch1细胞系的建立为研究其生物学特性及潜在治疗方法提供了重要的实验平台。
U-CH1细胞特性特征
转录因子表达:U-Ch1细胞过度表达转录因子T(Brachyury),这是脊索瘤最特异的分子标志物。Brachyury在脊索瘤的发生和发展中起着重要作用。
U-CH1具有由浆细胞和粘液性细胞间质组成的异质形态
基因特征:U-Ch1细胞系的基因组可能包含与脊索瘤相关的特定突变或表达模式
U-CH1细胞参数表
细胞名称 | U-CH1细胞(人骶骨脊索瘤细胞) |
别称 | UCH-1; UCH1 |
来源 | 56岁白人男性脊索瘤患者的骶骨 |
细胞类型 | 间充质样细胞 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管 |
细胞代数 | 10代以内 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | IMDM与RPMI-1640(4:1) + 10% FBS + 1% L-谷氨酰胺 + 1% P/S |
培养环境 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
培养频率 | 每周2-3次 |
倍增时间 | 超过一周 |
传代比例 | 1:2至1:3 |
细胞形态 | 长梭形或不规则形状,具有可变液泡 |
生长方式 | 贴壁生长 |
特异性标志物 | 转录因子T(Brachyury) |
DNA含量 | 接近四倍体(约75-100个染色体) |
p53状态 | 存在突变,C > G替换 |
冻存条件 | 90%胎牛血清 + 10%DMSO |
冻存液准备 | 使用新鲜配制的冻存液进行细胞冻存 |
培养箱湿度 | 70%-80% |
培养教程
U-CH1人骶骨脊索瘤细胞培养教程
收货处理
检查状态:收到U-CH1细胞后,首先检查培养瓶是否完整,确认无破损、漏液或浑浊现象。如有异常情况,请及时联系供应商。
消毒:使用75%酒精对U-CH1细胞的培养瓶外壁进行消毒,并将其放置在37℃的培养箱中静置4小时,以确保安全。
观察生长状态:在显微镜下观察U-CH1细胞的生长状态,必要时拍照记录,便于后续分析。
初次培养
换液:当U-CH1细胞密度低于80%时,应更换培养基,并保持细胞瓶透气(请勿重复使用旧培养基)。
培养条件:将U-CH1细胞置于37℃、5% CO₂的培养箱中,保持适宜的生长环境。
传代步骤
传代时机:当U-CH1细胞密度达到80%-90%时,进行传代操作。
洗涤:弃去培养上清,用无钙、镁的PBS洗涤U-CH1细胞1-2次,以去除残余培养基。
加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA),确保所有U-CH1细胞均被浸润。
将培养瓶放入37℃的培养箱中消化约1-3分钟,观察细胞是否大部分变圆并脱落。
终止消化:加入适量的新鲜完全培养基以终止消化,并轻轻吹打使U-CH1细胞从瓶壁上脱落。
将U-CH1细胞悬液转移至离心管中,以1000 rpm离心4分钟,弃去上清液。
补加1-2 mL新鲜培养基,轻轻吹匀细胞悬液。
分配到新瓶:将U-CH1细胞悬液以1:2的比例分配到新培养皿或瓶中,添加8 mL培养基,继续置于培养箱中培养。
冻存与复苏
冻存步骤:使用无血清冻存液,将U-CH1细胞悬液分装至冻存管中,迅速放入液氮中储存。
复苏步骤:
将冻存管置于37℃的水浴中来回晃动,迅速解冻(确保冻存管口在水面之上)。
解冻后立即加入完全培养基以中和冻存液。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D1S1656 | 16,16.3 |
D2S441 | 12,14 |
D2S1338 | 17,18 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9,12 |
D8S1179 | 10,15 |
D10S1248 | 15 |
D12S391 | 17,22 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 28,29 |
D22S1045 | 16 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 11 |
Penta E | 7,10 |
TH01 | 7 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17 |
参考文献
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