
MUTZ1细胞(人骨髓增生异常综合征细胞)
- 来源:骨髓
- 细胞特征:悬浮生长,圆形细胞
- 培养基:RPMI-1640 + FBS 10% + P/S 1%
- 其他:基因特征:MUTZ-1细胞具有高度重排和不稳定的核型,显示出高频率的自发染色体断裂和交换
MUTZ-1细胞系最初被认为来源于一名5岁患有骨髓增生异常综合征(MDS)的土耳其女孩,具体诊断为难治性贫血伴大量原始细胞(refractory anemia with excess of blasts)。该女孩还患有Fanconi贫血,这是一种遗传性疾病,影响骨髓的造血功能。MUTZ-1细胞系于1994年从外周血样本中分离建立,并被广泛用于MDS病理机制的研究、药物筛选以及探索骨髓微环境与疾病的相互作用。
有研究表明,MUTZ-1细胞系与Namalwa细胞系之间存在污染(PubMed=19344951),STR鉴定结果显示MUTZ-1细胞系与国家细胞资源库中的Namalwa细胞系完全匹配,这引发了对其来源的质疑。
尽管如此,MUTZ-1细胞系仍被广泛用于MDS的研究,尤其是在儿童MDS模型的构建中。MUTZ-1细胞系也是研究造血系统疾病的一个经典模型,助力更深入了解儿童与成人MDS的病理差异和治疗策略。
MUTZ1细胞特性特征
免疫表型:MUTZ1细胞表达多种髓系标志物,包括CD10、CD19和细胞质IgM,显示出前B细胞表面标志的特征。这些标志物的表达支持了其作为髓系前体细胞的身份。
染色体异常:MUTZ1细胞系具有高度重排和不稳定的核型,表现出高频率的自发染色体断裂和重排。具体异常包括:5号染色体缺失(del(5q))、其他涉及5号染色体的重排(如der(15)t(5;15))
基因重排:MUTZ1细胞表现出显著的基因重排现象。
致病机制:MDS的转化事件可能发生在未成熟的多能祖细胞中,这为理解MDS的发展提供了重要线索
MUTZ1细胞(人骨髓增生异常综合征细胞)参数表
细胞名称 | MUTZ1细胞(人骨髓增生异常综合征细胞) |
细胞别称 | Mutz-1; MUTZ1 |
组织来源 | 人骨髓 |
患者信息 | 来源于一名5岁土耳其女孩,诊断为骨髓增生异常综合征(MDS)和Fanconi贫血 |
细胞形态 | 单核细胞,通常以单个或小团块形式悬浮生长 |
细胞特性 | 悬浮生长,具有高度重排和不稳定的核型,表现出高频率的自发染色体断裂和重排 |
细胞活力 | 95%(通过台盼蓝排除法检测) |
无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性 |
运输方式 | 复苏发货或干冰冷冻发货 |
安全性级别 | 生物安全级别1,所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作 |
培养基 | RPMI-1640 + 10%胎牛血清 + P/S 1% |
培养温度 | 37℃ |
气相条件 | 95%空气,5%二氧化碳 |
传代方法 | 建议1:2至1:3,两天换液一次 |
培养基pH值 | 7.2 - 7.4 |
冻存条件 | 冻存液:55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度:液氮 |
基因特征 | 表现出显著的基因重排现象,包括5号染色体缺失(del(5q))及其他重排 |
免疫表型特征 | 表达CD10、CD19和细胞质IgM等髓系标志物 |
应用价值 | MDS发病机制研究、药物筛选、微环境相互作用研究 |
主要文献支持 | PubMed文献(PubMed=19344951),确认其来源及特性 |
培养教程
MUTZ1人骨髓增生异常综合征细胞培养教程
细胞复苏
所有操作应在无菌环境下进行,使用生物安全柜确保无菌操作。
预先准备完全培养基:RPMI-1640培养基,加入10%胎牛血清(根据需求调整血清浓度,通常不超过20%)。
从液氮罐中取出冻存的MUTZ1细胞,将冻存管迅速放入37℃水浴中,轻轻摇动,约1-2分钟使细胞完全解冻。
将解冻的细胞悬液转移至10ml完全培养基的离心管中,轻轻混匀。
以1000 rpm离心5分钟,去除含有二甲基亚砜(DMSO)的上清液。
小心去除上清液,用新鲜的完全培养基重悬MUTZ1细胞,并将细胞转移至培养瓶中开始培养。
日常培养
每2至3天需更换一次培养基,保持MUTZ1细胞的生长环境新鲜。
定期检查MUTZ1细胞的形态和生长状态,确保其处于良好生长状态。
若培养基pH值显著下降至7.2以下,建议及时更换培养基。
传代操作
MUTZ1细胞属于悬浮生长细胞,传代时无需胰酶消化
将培养瓶中的MUTZ1细胞悬液轻轻混匀后,取出部分悬液用于传代。
在新的培养瓶中加入适量完全培养基,按1:2至1:3的比例稀释MUTZ1细胞悬液。
轻轻混匀细胞悬液,并置于培养箱中继续培养。
通常,当MUTZ1细胞密度达到适当浓度(约为2-5×10⁵ cells/mL)时应进行传代。传代比例可根据MUTZ1细胞生长情况调整,建议1:2至1:3的传代比例。
细胞冻存
当MUTZ1细胞生长至80%密度时,可进行细胞冻存,以备后续实验使用。
将MUTZ1细胞悬液收集到离心管中,以1000 rpm离心5分钟,去除培养基。
使用含有10% DMSO的冷冻保存液重悬MUTZ1细胞。
将重悬的MUTZ1细胞分装至冻存管中,每管加入适量细胞悬液。
逐步降温至−80℃,然后将冻存管转移至液氮罐中长期保存。
注意事项
所有培养操作必须在无菌条件下进行,避免MUTZ1细胞受到污染。
定期监控MUTZ1细胞的生长状态,特别注意pH值和细胞密度。
若MUTZ1细胞生长缓慢或状态异常,可适当调整血清浓度或优化培养条件。
在冻存和复苏过程中,MUTZ1细胞对DMSO较为敏感,因此操作应快速规范,以减少DMSO对MUTZ1细胞的毒性影响。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 11 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 9 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 6,11 |
vWA | 14 |