Kasumi-1细胞（人急性原粒细胞白血病细胞）

Kasumi-1细胞系源自一名7岁男性急性原粒细胞白血病（AML）患者的外周血。在体外增殖试验中，Kasumi-1细胞对IL-3、IL-6、G-CSF（粒细胞集落刺激因子）和GM-CSF（粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子）有反应，但对IL-1和IL-5无反应。即使在培养过程中分别加入二甲亚砜、G-CSF或IL-5，细胞也未显示出粒细胞或嗜酸性粒细胞的成熟迹象。相反，加入佛波酯可以诱导细胞向巨噬细胞样细胞分化。此外，1,25S-（OH）2-16,23-二烯-26-F3-10-或D3可以抑制其增殖。
Kasumi-1细胞可用于3D细胞培养、免疫系统紊乱和免疫学相关的研究。由于AML1-ETO融合基因的存在，kasumi-1细胞系成为研究白血病发病机制及潜在治疗策略的重要工具。

Kasumi-1细胞特性特征

• 细胞形态：kasumi-1细胞呈原粒细胞形态，显示出髓性成熟的特征。

• 生长特性：Kasumi-1细胞为悬浮生长，适合在液体培养基中繁殖。

• 染色体特征：Kasumi-1细胞具有8号和21号染色体的易位，导致AML1基因与ETO（或MTG8）基因的融合，形成AML1-ETO融合基因（也称为AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1）。
  

• 融合蛋白：Kasumi-1细胞产生的嵌合AML1-ETO蛋白下调CEBPA mRNA和蛋白质的表达，抑制其DNA结合活性。这一过程对粒细胞的正常分化至关重要。

• 髓过氧化物酶（MPO）：Kasumi-1细胞对髓过氧化物酶呈阳性反应，表明其具有髓系细胞的特征。

Kasumi-1细胞参数表

Kasumi-1人急性原粒细胞白血病细胞培养教程

传代方法

• 传代频率：每2-3天对Kasumi1细胞进行一次传代。

• 传代比例：推荐使用1:3到1:5的比例进行Kasumi1细胞的传代。

• 轻轻吹打Kasumi1细胞悬液，确保Kasumi1细胞团块充分分散。

• 取适量的Kasumi1细胞悬液转移至新的培养瓶中。

• 加入适量新鲜培养基并充分混匀。

• 将Kasumi1细胞置于培养箱中继续培养。

冻存方法

• 细胞收集：在Kasumi1细胞处于对数生长期时收集。

• 冻存液配置：使用10% DMSO、20% FBS与RPMI 1640培养基混合配制Kasumi1细胞的冻存液。

• 以冻存液重悬Kasumi1细胞，将浓度调整至1×10^7细胞/ml。

• 将Kasumi1细胞悬液分装到冻存管中，初步置于-80°C冰箱降温24小时，然后转移至液氮罐长期保存。

复苏方法

• 快速解冻：将Kasumi1细胞冻存管从液氮罐中取出，立即置于37°C水浴中解冻，解冻时间控制在1分钟以内。

• 细胞收集：解冻后的Kasumi1细胞立即离心，弃去上清。

• 用预热的完全培养基重悬Kasumi1细胞。
  

• 将Kasumi1细胞悬液接种到新的培养瓶中。

• 置于培养箱中培养，24小时后更换培养基以去除解冻过程中的DMSO。

注意事项

• 血清含量：Kasumi1细胞培养基中FBS的含量应严格保持在20%，不建议降低，以防影响Kasumi1细胞生长。

• 生长速度：Kasumi1细胞生长较为缓慢，需要耐心。

• 操作建议：减少Kasumi1细胞悬液的吹打和振荡，以防细胞损伤。

• 环境稳定性：在Kasumi1细胞培养过程中尽量减少对培养瓶的移动和操作，以维持稳定的培养环境。