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货号：STM-CL-6621 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
PT67细胞（小鼠逆转录病毒包装株）
- 来源：雄性胚胎
- 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基：DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他：PT-67细胞能够产生复制缺陷的逆转录病毒载体颗粒，这些颗粒能结合靶细胞上的长臂猿白血病病毒受体Glvr-1（Pit-1）或双嗜性逆转录病毒受体Ram-1
PT-67小鼠逆转录病毒包装株是从TK-NIH/3T3细胞中衍生出的细胞系，专门用于产生复制缺陷的逆转录病毒载体。PT-67细胞系的起源可追溯至NIH 3T3细胞系。NIH 3T3细胞由George Todaro和Howard Green于1962年从NIH瑞士小鼠（NIH Swiss mice）的胚胎成纤维细胞中。PT67细胞通过原代培养，经每三天传代一次、接种约3×10^5个细胞，逐渐获得了能够持续增殖的永生化特性，最终形成了NIH 3T3这一经典的成纤维细胞系。
NIH 3T3细胞的生物学特征包括贴壁生长和接触抑制，形态上呈现纺锤形态。由于其在基因转染和细胞转化实验中的高效能，NIH 3T3被广泛用于生物医学研究领域。而PT-67则是在此基础上通过基因改造专门设计用于生产逆转录病毒颗粒，广泛应用于基因治疗、疫苗开发等方面。
PT67细胞特性特征
病毒颗粒生产：PT67细胞能够产生复制缺陷的逆转录病毒载体颗粒，这些颗粒能够结合靶细胞上的长臂猿白血病病毒受体Glvr-1（Pit-1）或双嗜性逆转录病毒受体Ram-1（Pit-2）进行有效的基因转导。
基因表达：PT67细胞系经过基因改造，具备高效的外源基因包装能力，适用于基因治疗和疫苗研发。
PT-67小鼠逆转录病毒包装株广泛应用于基因传递、疫苗开发及其他生物医学研究领域。由于其能够高效产生逆转录病毒载体，成为研究病毒学和基因工程的重要工具
PT67小鼠逆转录病毒包装株参数表
| 细胞名称 | PT67细胞（小鼠逆转录病毒包装株） |
| 细胞别称 | RetroPack PT67; PT-67 |
| 种属来源 | 小鼠 |
| 组织来源 | 成纤维细胞 |
| 疾病特征 | 正常 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 细胞代数 | 10代以内 |
| 含量 | >1×10^6细胞 |
| 安全等级 | 2 |
| 培养基 | 90% DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
| 培养条件 | 气相：95%空气 + 5%二氧化碳；温度：37℃ |
| 湿度 | 70%-80% |
| 换液频率 | 每2-3天换液1次 |
| 倍增时间 | 24-48小时（视细胞状态而定） |
| 传代方法 | 1:2至1:6，每周2次 |
| 传代密度 | 当细胞密度达80%-90%时进行传代 |
| 冻存液配方 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO |
| 冻存条件 | 液氮储存 |
| 收货处理 | 检查细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，37℃培养箱稳定2-4小时 |
| 收货方式 | T25瓶或冻存管 |
| 支原体检测 | 阴性 |
| 使用限制 | 科研使用，不得用于动物或人类疾病的治疗产品 |
| 特别说明 | 收到的培养基不能再用于细胞培养，请使用新配制的完全培养基 |
培养教程
PT67小鼠逆转录病毒包装株培养教程
PT67细胞复苏
迅速将含有PT67细胞的冻存管置于37℃水浴中解冻，约1-2分钟，直至细胞悬液完全解冻。
将解冻的PT67细胞转移至含有4-6 mL完全培养基的离心管中，轻轻混匀以减少细胞损伤。
在1000 RPM下离心3-5分钟，弃去上清液。
加入适量的完全培养基（约1-2 mL）重悬PT67细胞。
将重悬后的PT67细胞移入T25培养瓶中，加入6-8 mL完全培养基。
将培养瓶置于37℃的培养箱中过夜培养，并在次日显微镜下检查PT67细胞的贴壁情况及生长状态。
PT67细胞传代
当PT67细胞的密度达到80%-90%时，可进行传代。细胞过密可能会导致生长抑制，因此应在适当密度下进行传代。
弃去培养瓶中的旧培养基，用预温的无钙镁PBS轻轻冲洗PT67细胞1-2次。
加入1 mL的胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%胰蛋白酶，0.53 mM EDTA），在37℃培养箱中消化1-2分钟。
观察PT67细胞的形态，当大部分细胞变圆且松散时，轻轻敲击培养瓶底部以促进细胞脱落。加入含有10% FBS的培养基终止消化。
将消化后的PT67细胞悬液转移至离心管中，1000 RPM离心3-5分钟，弃去上清液。
重新加入适量的完全培养基重悬PT67细胞，并按1:2比例进行传代，移入新的T25培养瓶，继续培养。
PT67细胞冻存
当PT67细胞生长状态良好且密度适中时，可进行冻存。冻存液的配方为90%完全培养基和10% DMSO。
将传代后的PT67细胞离心收集，弃去上清液，并用冻存液重悬细胞。
将PT67细胞悬液分装到冻存管中，每管约1 mL细胞悬液。
将冻存管置于-80℃冰箱中过夜预冻，次日转移至液氮罐中长期保存。
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