Plat-e细胞系（人逆转录病毒包装细胞系）

Plat-E细胞系是一种由HEK-293T细胞改良而来的高效人源逆转录病毒包装细胞，广泛应用于基因治疗和病毒载体的生产。Plat-E细胞系具备高度稳定性和瞬时转染的高效性，能够产生10^6至10^7感染单位/毫升的逆转录病毒，并且在药物选择的条件下可持续生产病毒长达4个月。

Plat-E细胞源自人胚肾细胞（HEK，Human Embryonic Kidney），具体为293T细胞的改造版本，293T细胞具有优良的生长特性和转染效率，因而被广泛用于生物医学研究。Plat-E细胞系优化的包装载体确保了病毒结构蛋白的高效表达，使其成为基因治疗和相关研究中的理想选择。

Plat-e细胞系特性特征

• 平均滴度：可达到106-107感染单位/毫升。
  

• 稳定性：Plat-E细胞在药物选择存在下，能够持续产生亲生态逆转录病毒，最长可达4个月。

• 病毒结构蛋白：Plat-E细胞系通过表达MMLV（Moloney Murine Leukemia Virus）Gag和Pol蛋白，确保病毒颗粒的有效包装。
  

• 包膜蛋白：Plat-E细胞系产生的病毒只能感染小鼠或大鼠细胞，因其表达单嗜性的包膜蛋白。

• 基因表达：Plat-E细胞系中插入了gag、pol和env基因，这些基因通过内部核糖体进入位点（IRES）序列连接，以提高表达效率。
  

• 兼容性：Plat-E细胞与多种基于MMLV的表达载体（如pBABE和pMX）兼容，适合多种实验设计。

• Plat-E细胞系广泛应用于：逆转录病毒的快速生成和稳定生产、基因功能研究和基因治疗相关实验

Plat-e细胞系参数表

Plat-e人逆转录病毒包装细胞系培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的Plate细胞，将冻存管迅速放入37℃水浴中，保持冻存管上部不接触水面，轻轻摇晃，约1-2分钟解冻。解冻后迅速转移到无菌环境下，加入4 mL预热至37℃的完全培养基（DMEM + 10% FBS + 1% P/S），轻轻混匀。

• 将Plate细胞悬液转移至离心管中，以1000 rpm离心3分钟，弃去上清液。

• 加入1-2 mL新鲜培养基轻轻吹打悬浮Plate细胞。随后，将细胞悬液转移至含有预热培养基的培养瓶中，并置于37℃、5% CO₂培养箱中过夜培养。

• Plate细胞贴壁后，第二天观察细胞状态，及时更换新鲜培养基。

细胞传代

• 准备传代：当Plate细胞达到80%-90%汇合度时，弃去培养上清液，并用无钙镁离子的PBS冲洗细胞1-2次。

• 加入1 mL胰酶消化液（0.25%胰蛋白酶 + 0.53 mM EDTA），覆盖细胞表面，随后迅速弃去多余消化液。将培养瓶放入37℃培养箱中消化1分钟。

• 通过显微镜观察Plate细胞形态，当细胞大部分变圆并开始脱落时，轻轻敲击培养瓶帮助细胞脱离瓶壁。加入少量预热的完全培养基终止消化。

• 将Plate细胞悬液转移至离心管中，1000 rpm离心4分钟，弃去上清液。加入1-2 mL新鲜培养基轻轻混匀。

• 将Plate细胞悬液按照1:2的比例分到新的培养瓶或培养皿中，加入8 mL新鲜培养基，继续培养。

细胞冻存

• 选择健康生长的Plate细胞，弃去培养基，使用PBS冲洗一次。将Plate细胞收集后，1000 rpm离心4分钟，弃去上清液。

• 用无血清冻存液将Plate细胞重悬，并调整细胞密度至5×10^6至1×10^7/mL。轻轻混匀细胞悬液，每支冻存管中加入1 mL细胞悬液，标记清楚。

• 将装有Plate细胞的冻存管放入程序降温盒中，置于-80℃冷冻24小时后，转入液氮中长期保存。

注意事项

• 收到Plate细胞后，首先检查细胞瓶是否完好，培养基是否出现漏液或混浊现象，若发现问题，请及时联系供应商。

• 在转移Plate细胞至无菌环境前，使用75%酒精消毒细胞瓶表面，并在显微镜下检查细胞状态。若有异常情况，请做好记录并与技术支持联系。

• 收到的Plate细胞运输培养基仅用于运输，不适合细胞长期培养。请用新鲜配制的完全培养基进行培养。

• 传代时应根据Plate细胞的密度及瓶皿大小选择合适的比例。例如，1:2的传代是将一个T25培养瓶的细胞传至两个T25瓶或两个6 cm皿中。

• Plate细胞仅限于科研用途，禁止用于临床诊断或治疗。