
HKb20细胞(人肾上皮细胞)
- 来源:肾脏
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+800μg/ml G418+1% P/S
- 其他:HKb20细胞表达BtR175b(Cry 1Aa receptor)
HKb20人肾上皮细胞系由日本科学家杉本健司于2002年从正常人类肾脏上皮组织中提取并转化而成。hkb20细胞经过转化处理,具备了稳定的生长特性,适合在实验室中进行长期培养。
HKb20细胞呈现典型的上皮细胞形态,具有贴壁生长的特征,能够较好地模拟肾小管上皮细胞的生理功能。hkb20细胞系广泛应用于生物医学研究,特别是在药物筛选和肾脏疾病模型的构建中,因其可以有效反映肾脏上皮细胞的生理状态,成为研究肾脏疾病的理想工具。
HKb20细胞参数表
细胞名称 | HKb20细胞(人肾上皮细胞) |
别称 | 人肾上皮细胞 |
种属来源 | 人类 |
组织来源 | 肾脏 |
细胞类型 | 转化细胞系 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
背景描述 | HEK293细胞的亚型,表达BtR175b(Cry 1Aa receptor) |
支原体检测 | 阴性 |
细胞规格 | 1x10^6 cells/T25或1mL冻存管 |
培养基 | DMEM (89%) + FBS (10%) + PS + G-418 (800 μg/ml) |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气 + 5% CO₂ |
换液频次 | 每2-3天更换一次 |
传代比例 | 初次传代建议1:2,通常为1:3至1:4 |
冻存液 | 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO |
冻存条件 | 液氮储存 |
冻存细胞密度 | 5x10^6至1x10^7 cells/mL |
收货处理 | 收到后用75%酒精消毒瓶壁,静置2-4小时以稳定状态 |
生物安全等级 | BSL-2 |
使用限制 | 仅限于科学研究,不可用于医疗产品 |
培养教程
HKb20人肾上皮细胞培养教程
细胞复苏步骤
从液氮中取出HKb20细胞冻存管后,立即放入37℃水浴中解冻,解冻过程应在1至2分钟内完成。解冻后,将HKb20细胞悬液转移至含有5mL新鲜培养基的离心管中,轻轻混匀。
以1000 RPM的速度离心5分钟,弃去上清液。然后加入1-2mL新鲜培养基,轻轻吹打均匀,之后将HKb20细胞悬液接种于6cm培养皿或T25培养瓶中,并加入约6mL培养基,放入培养箱中过夜培养。
细胞传代步骤
当HKb20细胞覆盖培养瓶80%-90%时,进行传代操作。通常HKb20细胞的传代比例为1:3至1:4,初次传代时建议按1:2的比例进行。
先弃去旧培养基,用无钙镁的PBS轻轻冲洗HKb20细胞1-2次,然后加入0.25%胰蛋白酶(含EDTA)消化细胞,消化时间约为2-3分钟。当大部分细胞变圆并脱落时,迅速加入完全培养基终止消化。
胰酶消化后的HKb20细胞悬液以1000 RPM离心5分钟,弃去上清液,补加新鲜培养基后按比例接种到新的培养瓶中。
细胞冻存步骤
HKb20细胞在生长状态良好时可以进行冻存操作。通常在细胞达到适合的密度或传代状态时,收集用于冻存。
用少量胰酶消化HKb20细胞,轻轻吹打使其脱落。随后,将细胞悬液离心(1000 RPM,5分钟),弃去上清液后用冻存液(90% FBS + 10% DMSO)重悬HKb20细胞。按照5x10^6至1x10^7 cells/mL的密度,将细胞分装入冻存管中,逐步降温至液氮温度进行长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D5S818 | 8,9 |
D7S820 | 11 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,13 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,19 |
参考文献
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