
mv411细胞 (人髓性单核细胞白血病细胞)
- 来源:双表型B粒单核细胞白血病患者;外周血
- 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
- 培养基:生长培养基:IMDM+10% FBS+1% P/S
- 其他:G-CSF与GM-CSF协同促进细胞增殖,单独使用G-CSF会引起瞬时刺激。
mv411细胞系由Rovera课题组建立,来源于一名10岁男性患者的外周血(患者被诊断为双表型B粒单核细胞白血病),这是一种罕见的白血病类型。细胞最初由Wistar研究所分离并建立细胞系。
mv411细胞的核型为48,XY,t(4;11)(q21;q23),+8,+19。mv411细胞呈淋巴细胞状,悬浮生长,主要用于癌症和免疫学研究。
mv411细胞特性
mv411细胞来源于一名10岁男孩的外周血,患有双表型B型骨髓单核细胞白血病。
mv411细胞用于癌症和免疫学研究。
mv411细胞生长必须有生长因子,特别是GM-CSF。
IL-3可独立支持细胞长期生长,但在GM-CSF存在时会抑制细胞增殖。
G-CSF与GM-CSF协同促进细胞增殖,单独使用G-CSF会引起瞬时刺激。
mv411细胞可在不添加生长因子的10%FBS培养基中生长。
抗原表达:CD4(40-96%),CD10(4-11%),CD15(96-99%)。
基因表达:CD4(40-96%),CD10(4-11%),CD15(96-99%)。
mv411细胞形态呈淋巴细胞状,悬浮生长。
mv411细胞参数表
细胞名称 | mv411细胞 (人髓性单核细胞白血病细胞) |
细胞别称 | MV-4-11; MV-4:11; MV4:11; MV4; 11; MV4; 11; MV411; MV(4; 11); MV4II |
种属来源 | 人 |
年龄性别 | 10岁男性 |
组织来源 | 外周血 |
细胞类型 | 双表型B粒单核细胞白血病 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
细胞代数 | 10代以内 |
染色体数目 | 48,近二倍体 |
遗传学特征 | 基因突变:MLL-AF4融合基因; 染色体异常:t(4;11)(q21;q23) |
表面标记 | CD抗原:CD4+, CD10+, CD13+, CD15+, CD19+, CD33+, CD38+, HLA-DR+; 其他标记:TdT+, cyCD79a+ |
推荐培养基 | IMDM + 10% FBS + 1% PS+10% 胎牛血清+1% 庆大霉素-两性霉素B混合溶液 |
培养环境 | 37°C,5% CO2,95%空气 |
传代 | 密度80%-90%,比例1:2至1:3,频率每周约3次 |
冻存条件 | 基础培养基 + 5% DMSO + 20% FBS |
细胞密度 | 维持在0.5-1.5 x 10^6 cells/mL |
细胞倍增时间 | 约50-60小时 |
生长因子响应 | IL-3, G-CSF, GM-CSF对生长有促进作用 |
流式检测 | 可提供流式染色检测报告 |
支原体检测 | 阴性 |
生物安全等级 | 1级 |
保藏机构 | ATCC (CRL-9591); DSMZ (ACC-102) |
应用领域 | 癌症研究,白血病研究,免疫学研究,药物筛选 |
特殊用途 | MLL重排白血病模型,抗白血病药物研究 |
注意事项 |
|
背景简介 | 由Rovera课题组建立,来源于双表型B粒单核细胞白血病患者 |
相关文献 | Lange B, et al. Blood. 1987;70(1):192-199. |
培养教程
mv411人髓性单核细胞白血病细胞培养教程
MV-411细胞复苏步骤
解冻细胞: 从液氮中取出冻存的MV-411细胞,迅速置于37°C水浴中解冻。
离心: 解冻后立即将MV-411细胞悬液转移到含15mL预热培养基的50mL离心管中,800g离心5分钟,弃上清。
重悬: 用5mL新鲜培养基重悬MV-411细胞。
培养: 将细胞悬液转移到25cm²培养瓶中,置于37°C、5% CO2培养箱中培养。
MV-411细胞日常培养管理
观察细胞状态: 每2-3天观察MV-411细胞状态,计数细胞密度。
维持细胞密度: 保持MV-411细胞密度在0.5-1.5 x 10^6 cells/mL之间。
传代: 当MV-411细胞密度达到1.5 x 10^6 cells/mL时进行传代。
MV-411细胞传代步骤
均匀分散: 轻轻摇晃培养瓶,使MV-411细胞均匀分散。
稀释: 取适量MV-411细胞悬液,用新鲜培养基稀释至0.5 x 10^6 cells/mL。
转移: 将稀释后的MV-411细胞悬液转移到新的培养瓶中。
MV-411细胞换液步骤
离心: 每3-4天更换一次培养基,800g离心5分钟,弃上清。
重悬: 用等体积新鲜预热培养基重悬MV-411细胞。
MV-411细胞冻存步骤
准备冻存液: 90% FBS + 10% DMSO。
收集细胞: 收集对数生长期的MV-411细胞,计数。
离心: 800g离心5分钟,弃上清。
重悬: 用冷的冻存液重悬MV-411细胞,调整密度至5-10 x 10^6 cells/mL。
分装: 将MV-411细胞悬液分装到冻存管中,每管1mL。
降温: 使用程序降温盒,以-1°C/分钟的速率降至-80°C。
长期保存: 24小时后转移到液氮中长期保存。
MV-411细胞培养注意事项
所有操作均需在无菌条件下进行。
MV-411细胞对IL-3敏感,低浓度可能抑制生长,使用时需注意。
定期检测MV-411细胞是否有支原体污染。
建议每3-4个月进行一次STR鉴定,确保MV-411细胞系纯度。
常见问题及MV-411细胞培养解决方案
MV-411细胞生长缓慢或停滞
原因:培养基不适合或营养不足、细胞密度过低或过高、培养环境不适宜(温度、CO2浓度等)。
解决方法:检查并更换新鲜培养基,调整MV-411细胞密度至适宜范围,确保培养箱温度和CO2浓度正确。
MV-411细胞污染
原因:操作不当导致细菌或真菌污染、试剂或器材未经充分消毒。
解决方法:严格遵守无菌操作规程,定期检查并更换抗生素,对可疑试剂或器材进行消毒或更换。
MV-411细胞形态异常
原因:细胞老化或过度传代、培养基成分不适合。
解决方法:使用低代次MV-411细胞重新培养,尝试更换或优化培养基配方。
MV-411细胞贴壁不良(贴壁细胞)
原因:培养瓶表面处理不当、MV-411细胞活性降低。
解决方法:使用经过适当处理的培养瓶,提高接种密度或添加细胞外基质蛋白。
MV-411细胞死亡率高
原因:MV-411细胞解冻或传代操作不当、培养环境应激(如pH值异常、渗透压不适)。
解决方法:优化MV-411细胞解冻和传代流程,调整培养基pH值,确保渗透压适宜。
MV-411细胞分化或表型改变
原因:培养条件不适合维持MV-411细胞特性、细胞代次过高。
解决方法:优化培养条件,添加必要的生长因子,使用低代次MV-411细胞重新培养,定期进行细胞特性鉴定。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 24,25 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,9 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 11,17 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 32 (DSMZ=ACC-102) |
32,32.2 (ATCC=CRL-9591; CLS=300295; COG; PubMed=25877200) | |
32.2 (PubMed=20922763) | |
FGA | 19,21 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 7,18 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 14,15 |