RAW264.7细胞【小鼠单核巨噬细胞白血病细胞】

RAW264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞是用Abelson鼠白血病病毒诱导的雄性小鼠肿瘤的巨噬细胞系。

RAW264.7细胞以其巨噬细胞的特征而著称，表达H-2d抗原和溶菌酶，并具有吞噬抗原、释放趋化因子以及参与免疫反应的能力。RAW264.7细胞易于培养和传代，对RNA干扰敏感、DNA转染效率高。

RAW264.7细胞表达同向性和多向性MuLV，且对病毒复制呈阳性反应。RAW264.7细胞系能够吞噬乳胶颗粒和酵母聚糖，以及以抗体依赖性方式分解绵羊红血球和肿瘤靶细胞。虽然LPS或PPD处理可诱导其分解红血球，但对肿瘤靶细胞无影响。且RAW264.7细胞系对表面免疫球蛋白（sIg-）、Ia（Ia-）和Thy-1.2（Thy-1.2）呈阴性

RAW264.7细胞株具有易分化、不宜用胰酶消化的特点。

RAW264.7细胞特征如下

• RAW264.7是从用Abelson鼠白血病病毒诱导的雄性小鼠的肿瘤中建立的巨噬细胞系。

• 抗原表达：H-2d

• 基因表达：溶菌酶；H-2d；天花病毒（鼠痘）阴性

• 表达式标记：补体（C3）

• RAW264.7细胞易于繁殖，DNA转染效率高，对RNA干扰敏感，并支持小鼠诺如病毒的复制。

• RAW264.7细胞系对表面免疫球蛋白（sIg-）、Ia（Ia-）和Thy-1.2（Thy-1.2）呈阴性。

• 在建立RAW264.7细胞系时，不分泌可检测到的病毒颗粒，XC菌斑形成试验呈阴性。

• 根据研究，RAW264.7细胞系表达同向性和多向性MuLV，并使用XC菌斑分析法对病毒复制呈阳性。

• RAW264.7细胞可以吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖，并且可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。

• LPS或PPD处理2天可诱导RAW264.7细胞分解红血球，但对肿瘤靶细胞无作用。

• RAW264.7细胞株来源于Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤，具有相似的特性。

RAW264.7细胞参数表

RAW264.7细胞培养条件

• 培养基：DMEM-HD + 10% FBS

• CO2浓度：5%

• 温度：37.0°C

• 培养器皿：推荐使用培养皿或培养瓶

RAW264.7细胞传代技巧

• 弃去培养液上清：在传代过程中，首先将培养皿或培养瓶中的培养液弃去，并用PBS（磷酸盐缓冲盐水）润洗细胞，以保持培养环境的洁净。

• 加入胰酶消化液：为了将细胞从培养器皿中剥离，需要加入含有胰酶的消化液，然后将培养器皿置于37°C培养箱中进行1-2分钟的消化。

• 加入含有10%血清的完全培养基：在消化结束后，加入含有10%血清的完全培养基终止消化，防止胰酶继续对细胞产生影响，并为细胞提供足够的营养。

• 吹打细胞并重悬：用吸管轻轻吹打培养皿或培养瓶，以将细胞彻底分散，然后将细胞收集并重悬，以确保细胞的均匀分布。

• 控制传代比例和时间：在传代过程中，需要控制好传代比例和时间，避免过度传代导致细胞的异常增殖和功能失调。

RAW264.7细胞常见问题及解决方案

• 细胞形态发生变异：改善培养环境，使用高质量的培养基和培养器皿，有助于减少细胞形态的变异。

• 细胞生长速度缓慢：定期传代，控制传代比例和时间，及时检测支原体污染，以促进细胞的正常生长。

• 存在少量分化细胞：采用刮取的方式进行传代，控制细胞的汇合程度，避免分化细胞的扩散和影响。

• 对胰酶敏感：不建议使用胰酶进行传代，推荐使用刮取的方法，以避免细胞受到胰酶的刺激和分化。