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货号：STM-CL-6774 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
J774A.1小鼠单核巨噬细胞
- 来源：巨噬细胞
- 细胞特征：贴壁细胞，不用胰酶消化，单核细胞、巨噬细胞样
- 培养基：生长培养基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：表达标记：补体（C3）、Fc受体（IgG，高亲和力I，Fcgr1）
J774A.1小鼠单核巨噬细胞是从1968年从患有网状细胞肉瘤的成年雌性BALB/cN小鼠的腹水中分离出的。
J774A.1细胞表现出抗体依赖的吞噬作用，并受到葡聚糖硫酸盐、PPD和LPS的抑制。
J774A.1细胞合成大量的溶菌酶和白细胞介素1β（IL-1β）。J774A.1细胞因其在抗体依赖性吞噬作用方面的活性被广泛应用。
J774A.1细胞特性
J774A.1细胞表达白介素-1（白介素1、白介素1和LAF）和溶菌酶。
表达标记：补体（C3）和Fc受体，IgG，高亲和力I（Fcgr1）。
J774A.1细胞在抗体依赖性吞噬作用中具有活性，生长受到葡聚糖硫酸盐、PPD和LPS的抑制。
J774A.1细胞合成大量的溶菌酶，表现出轻微的细胞溶解作用，但主要是通过抗体依赖性吞噬作用发挥功能。
白细胞介素1β（Il1b）是通过J774A.1细胞系连续合成的。
J774A.1细胞参数表
| 细胞名称 | J774A.1（小鼠单核巨噬细胞） |
| 别称 | J-774A.1; J774.A1; J774 A1; J 774A.1; J774 A.1; j774a1 |
| 种属 | 小鼠 |
| 细胞来源 | 成年雌性小鼠腹水（患有网细胞肉瘤） |
| 细胞形态 | 单核细胞、巨噬细胞样 |
| 组织来源 | 腹水 |
| 肿瘤类型 | 肉瘤细胞 |
| 生物安全等级 | BSL-1 |
| 生长特性 | 贴壁细胞，不用胰酶消化 |
| 基因表达 | 白介素-1（白介素1、白介素1和LAF）、溶菌酶 |
| 表达标记 | 补体（C3）、Fc受体（IgG，高亲和力I，Fcgr1） |
| 抗体依赖性吞噬作用 | 有活性 |
| 生长受抑制因素 | 葡聚糖硫酸盐、PPD、LPS |
| 溶菌酶合成 | 是，大量 |
| 细胞溶解作用 | 轻微的细胞溶解作用，主要是抗体依赖性吞噬作用 |
| 连续合成的细胞因子 | 白细胞介素1β（Il1b） |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO；温度：液氮 |
| 培养基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃ |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
| 倍增时间 | ~17 hours |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 注意事项 | 1. J774A.1细胞不建议使用胰酶消化，胰酶会刺激分化； |
| 2. 超过3天不传代细胞容易分化； | |
| 3. 培养时，存在少量分化细胞，属于正常现象。 | |
| 保藏机构 | ATCC; TIB-67 DSMZ; ACC-170 ECACC; 91051511 |
培养教程
J774A.1小鼠单核巨噬细胞培养教程
复苏
将含有1mL J774A.1细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。
在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。
将J774A.1细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
传代：
若J774A.1细胞密度达70%-90%，可进行传代培养。
使用细胞刮铲刮入含有漂浮细胞的培养基中，通过离心收集细胞，将细胞沉淀重悬于新鲜培养基中并分配到新的培养瓶中来对细胞进行传代。
建议第一次传代密度为1:2进行，后续传代根据实际情况按1:2~1:4的比例进行。
冻存
收集J774A.1细胞到离心管中，根据细胞密度配制细胞冻存液。
将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
将要冻存的J774A.1细胞置于程序降温盒中，过夜后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
相关资料
STR鉴定及相关
STR点位信息
| 18-3 | 18 |
| 6-7 | 12,13 |
| 5-5 | 14 |
| X-1 | 25 |
| 1-2 | 17,18 |
| 7-1 | 24.2,25.2 |
| 8-1 | 13,14 |
| 1-1 | 16,17 |
| 19-2 | 14,15 |
| 15-3 | 22.3 |
| 12-1 | 16 |
| 6-4 | 18 |
| 4-2 | 21.3 |
| 3-2 | 14 |
| 2-1 | 16,17 |
| 13-1 | 15.2,16.2 |
| 11-2 | 16,17 |
| 17-2 | 15,16,17 |
参考文献
- 巨噬细胞J774A.1外泌体促进结直肠癌细胞系MC38和CT26的增殖和迁移 《基础医学与临床》 2021年06期
- 摘要：目的探讨巨噬细胞J774A.1分泌的外泌体对小鼠结直肠癌细胞系MC38和CT26增殖和迁移...
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