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货号：STM-CL-6046 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
L6565细胞（小鼠白血病克隆细胞系）
- 来源：白血病
- 细胞特征：悬浮细胞， 淋巴母细胞样
- 培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：L6565细胞系中c-myc和c-fos基因过量表达；含有丰富的A类和C类病毒颗粒
L6565细胞系源自L6565白血病小鼠的脾细胞，通过胰蛋白酶处理悬浮得到。L6565细胞是悬浮方式生长的细胞系，形态特征类似于淋巴母细胞。
L6565细胞特性特征
核结构：电镜观察显示，L6565细胞核边界清晰。
细胞质：L6565细胞质中含有丰富的细胞器和A类、C类病毒颗粒。
染色体数目：染色体数目从38到144不等，显示出较大的遗传变异性。
基因表达：c-myc和c-fos基因在L6565细胞中过量表达。
病毒含量：L6565细胞克隆是一株含有RNA病毒的淋巴细胞白血病干细胞
L6565细胞参数表
| 细胞名称 | L6565细胞（小鼠白血病克隆细胞系） |
| 种属/组织来源 | 小鼠/脾脏 |
| 疾病特征 | 白血病 |
| 细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
| 生长特性 | 悬浮生长 |
| 培养基 | RPMI-1640/10% FBS/1% 双抗 |
| 培养环境 | 95% 空气, 5% CO2；37°C |
| 传代比例/频率 | 1:2 至 1:6/每周 2 次 |
| 染色体数 | 38-144 |
| 基因表达 | c-myc 和 c-fos 过量表达 |
| 细胞核特征 | 边界清晰 |
| 细胞质特征 | 含丰富的细胞器和病毒颗粒 |
| 病毒含量 | A类和C类病毒颗粒 |
| 细胞类型 | 含有RNA病毒的淋巴细胞白血病干细胞 |
| 生物安全等级 | 1级 |
| 支原体检测 | 阴性 |
| 冻存条件 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO，液氮储存 |
| 供应限制 | 仅供科研使用 |
| 发货规格 | 活细胞：T25培养瓶1瓶 或 1ml 冻存管1支（约5 x 10^5 cells/vial） |
| 发货形式 | 活细胞：常温运输；冻存管：干冰运输 |
培养教程
L6565小鼠白血病克隆细胞系培养教程
L6565细胞复苏
将含有1 mL L6565细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速解冻，并不断轻摇。
加入4 mL预热的完全培养基（RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 双抗），混合均匀。
在1000 RPM条件下离心4分钟，弃去上清液。
补加1-2 mL完全培养基，轻轻吹打混匀L6565细胞。
将L6565细胞悬液转移到培养瓶中，加入适量培养基，置于37℃、5% CO2培养箱中过夜培养。
次日换液并检查L6565细胞密度。
L6565细胞传代
当L6565细胞密度达到80%-90%时进行传代。
L6565细胞为悬浮细胞，传代比例为1:2至1:6，每周传代2次。
收集L6565细胞悬液，1000 RPM离心4分钟。
弃去上清液，用预热的完全培养基重悬L6565细胞。
按所需比例将L6565细胞分装到新的培养瓶中，补加新鲜完全培养基。
L6565细胞冻存
收集对数生长期的L6565细胞。
制备冻存液：90%完全培养基 + 10% DMSO。
调整L6565细胞浓度至约5 x 10^5 cells/mL。
将L6565细胞悬液分装到冻存管中，每管1 mL。
使用程序降温盒或梯度降温，最终置于液氮中长期保存。
快速检测L6565细胞是否被污染
1. 显微镜观察
将L6565细胞悬液滴在载玻片上，盖上盖玻片。
在显微镜下观察L6565细胞形态和培养基的透明度。
检查是否有异常颗粒、细胞碎片或细菌、真菌等污染物。
2. 培养基颜色变化
观察培养基颜色是否发生变化，如变黄或变浑浊。
颜色变化可能是细菌或真菌污染的迹象。
3. 支原体检测
使用支原体检测试剂盒进行检测。
取少量L6565细胞培养上清液，按照试剂盒说明进行操作。
通过PCR或荧光染色法检测支原体污染。
4. 细菌和真菌培养
取少量L6565细胞培养上清液，接种在LB琼脂平板（细菌）和SDA琼脂平板（真菌）上。
在37℃培养24-48小时，观察是否有菌落生长。
5. 比较对照
与未污染的L6565细胞对照，比较细胞生长状态和形态。
如果发现L6565细胞污染，如何处理
1. 立即隔离
将污染的L6565细胞培养瓶立即从培养箱中取出，避免交叉污染其他细胞。
2. 处理污染L6565细胞
将污染的L6565细胞培养瓶和培养基进行高压灭菌处理。
使用含有消毒剂的溶液（如70%乙醇）清洁工作台和相关设备。
3. 重新培养L6565细胞
如果有备用的未污染L6565细胞冻存管，按照细胞复苏步骤重新培养。
如果没有备用L6565细胞，联系供应商获取新的细胞株。
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