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货号：STM-CL-6012 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
ANA-1细胞（小鼠巨噬细胞）
- 来源：骨髓巨噬细胞
- 细胞特征：半贴半悬 , 巨噬细胞样
- 培养基：RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他：表达FcyR（Ly-17）、Mac-1、Ly-5、热稳定抗原（HSA）、Ly5.1和Ly6B；持续表达溶菌酶；
ANA-1细胞系是一种通过J2重组逆转录病毒感染并永生化处理的C57BL/6（H-2b）小鼠骨髓细胞衍生的细胞系。ANA-1细胞系具有双重生长模式，即既能在贴壁状态下生长，也能以悬浮形式存在。ANA-1细胞在形态上类似于巨噬细胞，常表现出显著的空泡形成和偏心的细胞核。
ANA-1小鼠巨噬细胞特性特征
分子特征：表达FcyR（Ly-17）、Mac-1、Ly-5、热稳定抗原（HSA）、Ly5.1和Ly6B、持续表达溶菌酶
功能特征：表现出非常高的吞噬活性、在脂多糖（LPS）处理时具有肿瘤活性、属于骨髓单核细胞谱系
基因特征：由C57BL/6（H-2b）小鼠骨髓细胞经J2重组逆转录病毒感染后永生化而来
免疫学特征：表达多种巨噬细胞相关的表面标志物，如FcyR、Mac-1等、可能参与免疫反应和炎症过程
ANA-1细胞参数表
| 细胞名称 | ANA-1细胞（小鼠巨噬细胞） |
| 别称 | Ana-1; ANA1 |
| 种属 | 小鼠 |
| 组织来源 | 骨髓 |
| 细胞形态 | 巨噬细胞样，具有大量空泡和偏心核 |
| 生长特性 | 贴壁/悬浮混合生长 |
| 细胞代数 | 10代以内 |
| 生物安全 | 1级 |
| 保藏机构 | KCB; KCB 200784YJ |
| 培养基 | 90% RPMI-1640 或 DMEM + 10% FBS + 1% 双抗（青霉素-链霉素） |
| 培养条件 | 37℃，5% CO2，95%空气 |
| 传代比例 | 1:2 - 1:3 |
| 传代密度 | 80%-90%汇合度 |
| 冻存液 | 无血清冻存液;液氮 |
| 表面标志 | FcyR（Ly-17）, Mac-1, Ly-5, HSA, Ly5.1, Ly6B 阳性 |
| 免疫染色 | CD68和MAC387免疫荧光染色阳性 |
| 细胞纯度 | >90% |
| 溶菌酶 | 持续表达 |
| 吞噬活性 | 非常高 |
| LPS反应 | 具有肿瘤活性 |
| 无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
| STR鉴定 | 已通过验证 |
| 应用限制 | 仅限科研使用，不可用于临床 |
| 复苏方法 | 37℃水浴快速解冻，1000rpm离心4分钟，弃上清，加培养基重悬 |
| 传代方法 | 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化，1000rpm离心4分钟 |
| 首次传代 | 建议1:2比例 |
| 换液频率 | 每2-3天更换培养基 |
培养教程
ANA-1小鼠巨噬细胞培养教程
ANA-1细胞复苏
快速解冻：将含有1mL ANA-1细胞悬液的冻存管置于37℃水浴中快速解冻，时间为1-2分钟。
转移：将解冻后的ANA-1细胞悬液转移到一个含有4-9mL培养基的15mL离心管中。
离心：以1000rpm离心4-5分钟，弃去上清液。
重悬细胞：用1-2mL新鲜培养基重悬ANA-1细胞。
初步培养：将ANA-1细胞悬液转移到一个含有5-6mL培养基的T25培养瓶中。
将培养瓶置于37℃、5% CO2的培养箱中培养过夜。
ANA-1细胞培养
培养基：90% RPMI-1640或DMEM，补充10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素-链霉素）。
培养条件：37℃，5% CO2，95%空气。
换液频率：每2-3天更换ANA-1细胞培养基。
ANA-1细胞传代
传代条件：当ANA-1细胞密度达到80%-90%时进行传代。
清洗细胞：弃去ANA-1细胞培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
细胞消化：吸取细胞上清中的悬浮细胞，并添加新鲜培养基轻吹拍打培养瓶以促进细胞脱落。
离心和重悬：将ANA-1细胞悬液转移到无菌离心管中，1000rpm离心4分钟，弃去上清。
用新鲜培养基重悬ANA-1细胞。
接种和培养：按1:2-1:3的比例将ANA-1细胞接种到新的培养瓶中。
将培养瓶放入37℃、5% CO2培养箱中继续培养ANA-1细胞。
ANA-1细胞培养注意事项
传代比例：首次传代建议使用1:2的比例，即一个T25瓶传至两个T25瓶或两个6cm培养皿。
培养基和换液：使用90% RPMI-1640或DMEM，加入10% FBS和1%双抗；每2-3天换液ANA-1细胞培养基。
细胞状态：定期观察ANA-1细胞健康状态，确保其保持巨噬细胞样形态，并注意其贴壁和悬浮的混合生长特性。
无菌操作：确保所有步骤在无菌条件下进行，避免ANA-1细胞污染。
ANA-1细胞冻存
细胞收集：收集生长状态良好的ANA-1细胞。
准备冻存液：冻存液由50% RPMI-1640、45% FBS和5% DMSO组成。
冻存步骤：将ANA-1细胞悬浮在冻存液中，快速分装到冻存管中。
置于-80℃冰箱中保存24小时后，转入液氮中进行长期保存。
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