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小鼠肾小球内皮细胞(原代细胞)货号:STM-CE-2105 规格:5×10⁵cells/T25细胞培养瓶

小鼠肾小球内皮细胞(原代细胞)

  • 来源:小鼠肾组织
  • 细胞特征:内皮细胞样;圆形、多角形;单层贴壁生长;
  • 培养基:原代内皮细胞专用培养基
  • 其他:作为肾小球滤过膜的第一道屏障;具有抗凝、抗血栓的作用
价格:¥ 3,300.00

原代小鼠肾小球内皮细胞是从小鼠肾组织中分离得到的。
肾小球是肾脏的功能单位,起着过滤血液、生成原尿的关键作用。内皮细胞作为肾小球滤过膜的一部分,位于肾小球毛细血管壁腔侧,与血流直接接触,具有重要的保护作用,可阻止大分子物质通过,并具有抗凝、抗血栓的功能。

小鼠肾小球内皮细胞相关特性

  • 肾小球是肾脏的功能单位,用于过滤血液生成原尿。其过滤膜包括内层、中层和外层,内层为内皮细胞层。

  • 小鼠肾小球内皮细胞是特殊微血管类型的细胞,位于肾小球毛细血管壁腔侧,是肾小球滤过膜的第一道屏障,具有抗凝、抗血栓作用。

  • 肾小球系膜是肾小球毛细血管袢之间的特殊间充质,由系膜细胞和系膜基质组成。系膜细胞具有活跃的功能,包括分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质等。

小鼠肾小球内皮细胞参数表

细胞类型小鼠肾小球内皮细胞
分离来源肾组织
形态特征圆形、多角形;单层贴壁生长;细胞质丰富,细胞核为圆形或卵圆形
位置肾小球毛细血管壁腔侧
功能

作为肾小球滤过膜的第一道屏

具有抗凝、抗血栓的作用

研究价值在免疫学和病理生理学领域具有重要的研究价值
包被条件PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
生长特性贴壁
细胞形态内皮细胞样;梭形、多角形
传代特性可传1-2代;可传2-3代
消化液0.25%胰蛋白酶
培养条件气相:空气,95%;CO2,5%
细胞鉴定

Ⅷ因子相关抗原(Factor Ⅷ)免疫荧光染色为阳性

经鉴定细胞纯度高于90%

不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

培养教程

小鼠肾小球内皮细胞培养操作步骤

细胞培养环境准备

  • 使用75%酒精消毒T25细胞培养瓶外表面,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4小时,稳定细胞状态。

壁细胞消化

  • 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。

  • 添加1mL 0.25%胰蛋白酶消化液至T25培养瓶中,轻轻转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3分钟。

  • 倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5mL完全培养基终止消化。

  • 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

  • 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

细胞收货脱落

  • 收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5分钟,保留沉淀。

  • 添加0.5mL 0.25%胰蛋白酶消化液至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3分钟。

  • 消化完毕后向离心管内加入5mL完全培养基终止消化。

  • 经1000rpm,离心5分钟,丢弃上清,用5mL完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。

  • 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。

细胞实验

  • 若将贴壁的原代细胞转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等),需要对实验器皿进行包被以增强细胞贴壁性。包被条件可选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)、PLL(0.1mg/ml)、明胶(0.1%)。

注意事项

  • 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

  • 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

  • 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

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