
小鼠视网膜微血管内皮细胞 (原代细胞)
- 来源:视网膜组织
- 细胞特征:贴壁, 内皮细胞样
- 培养基:原代内皮细胞专用培养基
- 其他:小鼠视网膜微血管内皮细胞采用密度梯度离心法制备
小鼠视网膜微血管内皮细胞(Mouse Retinal Microvascular Endothelial Cells)是从小鼠的视网膜组织中分离出的内皮细胞。小鼠视网膜微血管内皮细胞在密度梯度离心法下制备而来,具有较高的纯度(约90%以上)和特定标识物(如vWF、Factor VIII的阳性表达)。
视网膜微血管内皮细胞特性
视网膜是眼球壁内层的一层透明薄膜,含有丰富的血管和色素细胞。
视网膜血管分为大血管层、中血管层和毛细血管层,血管内皮细胞具有多种生理功能,包括血管调节、凝血、免疫等。
小鼠视网膜微血管内皮细胞采用密度梯度离心法制备,具有高纯度和特定标识物的阳性表达。
小鼠视网膜微血管内皮细胞来源于成年小鼠视网膜组织,具有调节血管张力、血压以及抗血栓形成等重要功能。
小鼠视网膜微血管内皮细胞参数表
细胞名称 | 原代细胞:小鼠视网膜微血管内皮细胞(Mouse Retinal Microvascular Endothelial Cells) |
组织来源 | 小鼠视网膜组织 |
分离方法 | 密度梯度离心法 |
免疫标识物 | vWF、Factor VIII、CD31(P-CAM) |
细胞纯度 | ≥90% |
不含有的病原体 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母、真菌 |
细胞特性 | 组成眼球壁内层的血管结构; 参与血管调节、凝血、纤溶、免疫、物质转运和生物活性物质释放等生理功能; 具有重要的病理生理学意义 |
用途 | 科研 |
细胞状态 | 冻存 |
表型特征 | 血管腔面单层扁平上皮样细胞 |
适用培养基 | 小鼠内皮细胞培养基(Endothelial Cell Medium for Mouse) |
培养基配方 | 包含生长因子和细胞增殖物质 |
培养条件 | 37°C,5% CO2 |
培养教程
小鼠视网膜微血管内皮细胞培养
取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4小时,以稳定细胞状态。
贴壁细胞消化
吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3分钟。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5mL完全培养基终止消化。
用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
细胞收货脱落
收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5分钟,保留沉淀。
添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3分钟(或4℃冰箱静置5-7分钟)。消化完向离心管内加入5mL完全培养基终止消化。
经1000rpm,离心5分钟,丢弃上清,用5mL完全培养基(补加1% FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内。
待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。
包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2),多聚赖氨酸PLL(0.1mg/mL),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。
悬浮/半悬浮细胞无需包被。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
- W—P小体与人视网膜微血管内皮细胞鉴定 《中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编》 2007年
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