
小鼠视网膜色素上皮细胞
- 来源:视网膜组织
- 细胞特征:贴壁 , 上皮细胞样
- 培养基:原代上皮细胞专用培养基
- 其他:视网膜色素上皮细胞无再生能力,但邻近细胞会滑动填补空间
小鼠视网膜色素上皮细胞(RPE)分离自视网膜组织,细胞呈矮六角棱柱状,高8~10μm,宽12~18μm,顶部有5~7μm的突起。视网膜色素上皮细胞在胚胎发育时,上皮基部与脉络膜紧密连接,但顶部与视细胞连接较松,容易发生视网膜剥离。
视网膜色素上皮细胞无再生能力,但邻近细胞会滑动填补空间。
小鼠视网膜色素上皮细胞参数表
细胞名称 | 小鼠视网膜色素上皮细胞(原代细胞) |
组织来源 | 视网膜组织 |
种属来源 | 小鼠 |
产品规格 | 5×10^5 cells/T25细胞培养瓶 |
细胞形态 | 上皮细胞样,矮六角棱柱状,顶部有突起 |
细胞形态尺寸 | 高8~10μm,宽12~18μm,突起长5~7μm |
细胞连接 | 紧密连接、中间连接和缝隙连接 |
细胞功能 | 色素颗粒产生和转运,脂滴储存维生素A,吞噬脱落的视杆细胞外节膜盘,分泌蛋白多糖 |
细胞纯度 | 纯度高于90%,通过细胞角蛋白-8(CK-8)免疫荧光染色鉴定 |
无污染 | 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
培养基 | 原代细胞专用培养基 |
包被条件 | 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
传代特性 | 不建议传代 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
培养温度 | 37摄氏度 |
冻存条件 | 5%DMSO+95%FBS |
完全冻存液 | 原代细胞冻存液 |
培养基添加剂 | M199、FBS、上皮细胞生长添加剂、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等 |
培养教程
小鼠视网膜色素上皮细胞培养
培养条件
培养基: 使用原代细胞专用培养基,并添加适量的胎牛血清(FBS)、青霉素和链霉素。
包被条件: 在培养容器内使用鼠尾胶原Ⅰ进行包被(2-5μg/cm2)。
培养环境: 在37摄氏度、95%空气和5%二氧化碳的湿润培养箱中培养。
培养步骤
解冻细胞: 将冻存管快速放入37摄氏度的水浴中除冰,然后迅速将细胞转移到15ml离心管中,加入预先温热的培养基,轻轻搅拌。
细胞传代: 细胞不建议传代,建议在初代培养中使用。
细胞传输: 将细胞悬浮液分装到预先包被的培养容器中,每个T25细胞培养瓶约加入5×10^5个细胞。
培养液更换: 每2-3天更换一次培养液。
细胞观察和检测: 使用细胞角蛋白-8(CK-8)免疫荧光染色鉴定细胞的纯度,确保纯度高于90%。
培养注意事项
避免细胞过度增殖,以免影响细胞形态和功能。
细胞在贴壁培养时,培养基液面不要过高,以免细胞窒息。
培养过程中应保持无菌操作,避免细胞受到外源性污染。
注意细胞的形态和生长状态,及时观察并记录培养情况。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
- 视网膜色素上皮细胞中HGF的表达对HUVEC增殖、迁移和体外血管生成能力的影响 《武汉大学》 2017年
- 摘要:第一部分目的:探索缺氧条件下不同时间段RPE细胞中HGF和VEGF的表达及外源性HGF蛋白...
- GCaMP基因工程化C17.2神经干细胞生物学特性的初步研究 《第三军医大学》 2015年
- 摘要: 研究背景:视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)是一...
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