
MPC5细胞(小鼠肾足细胞)
- 来源:肾
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:MPC-5具有高度分支的足突阵列,这对肾小球的过滤功能至关重要
MPC-5小鼠肾足细胞是一种通过温度敏感的SV40大T抗原(SV40LT)转基因永生化的细胞系,广泛用于研究足细胞的分化与形态形成过程。MPC5细胞在体外能够模拟体内足细胞的发育与成熟,增殖和分化阶段均表达WT-1蛋白。在分化过程中,肌动蛋白纤维和微管的有序排列展现了足细胞在体内的发育机制,有助于深入理解其成熟过程。MPC-5细胞系来自小鼠(Mus musculus)的肾小球足细胞,作为贴壁生长的上皮样细胞,通过SV40LT的转基因实现永生化,使其在体外具备长期增殖能力,适用于肾小球功能及相关疾病的深入研究。
MPC5细胞特性特征
永生化机制:MPC5细胞通过转染编码SV40大型T抗原(SV40LT)的温度敏感转基因实现永生化,使得细胞能够在体外长期增殖。
WT-1蛋白:在MPC5细胞增殖和分化过程中均有表达,参与调控足细胞的发育。
MPC5细胞表现出分化足细胞的特征性抗原标记物,包括nephrin、podocin、CD2AP和突触足蛋白(synaptopodin)。
在分化过程中,MPC-5细胞表现出肌动蛋白纤维和微管的有序排列,这对于理解祖细胞在体内的发育和成熟过程至关重要。
生理相关表型:MPC-5细胞能够提供类似于体内分化肾细胞的生理相关表型,便于相关研究。
稳定性与同质性:作为一种同质、稳定的细胞源,MPC-5细胞在实验中表现出一致性,有助于提高实验结果的可靠性
MPC5小鼠肾足细胞参数表
细胞名称 | MPC5细胞(小鼠肾足细胞) |
别称 | MPC5; Mouse Podocyte Clone-5 |
来源 | 肾足细胞;SV40转化;(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2Kb-tsA58)永生鼠 |
种属来源 | 小鼠(Mus musculus) |
组织来源 | 肾脏,特别是肾小球中的足细胞(podocytes) |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞类型 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
支原体检测 | 阴性 |
培养基 | 89% DMEM + 10% FBS + 1% PS |
培养条件 | 温度:37℃,气相:95%空气 + 5% CO₂ |
换液周期 | 每2-3天一次 |
培养基体积 | T25瓶:10-12 mL;10 cm皿:12-15 mL |
传代比例 | 1:2至1:4 |
传代频率 | 每周2-3次 |
冻存液配方 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO |
冻存条件 | 液氮储存 |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
生物安全等级 | 2 |
致瘤性 | 无 |
注意事项 | 消化时间需严格控制,避免过度消化;冻存后及时复苏以检查活性。 |
关键蛋白表达特征 | WT-1蛋白、Nephrin、足细胞素、CD2AP、突触足蛋白 |
培养教程
MPC5小鼠肾足细胞培养教程
MPC5细胞复苏
将冻存的MPC5细胞管在37℃水浴中迅速解冻,轻轻摇晃确保细胞完全解冻。
加入4 mL预先准备好的培养基,混合均匀。
在1000 RPM条件下离心4分钟,去除上清液。
补加1-2 mL新鲜培养基,轻轻吹打悬浮细胞。
将复苏的MPC5细胞加入培养瓶或10 cm培养皿中,加入约8 mL培养基。
培养过夜,第二天更换培养基,并检查细胞的生长状态。
MPC5细胞传代
当MPC5细胞密度达到80%-90%时,进行传代操作。
弃去培养上清液,使用无钙镁离子的PBS缓冲液洗涤细胞1-2次。
加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA),置于37℃培养箱中消化1-2分钟,观察MPC5细胞是否大部分变圆并开始脱落。
轻敲培养瓶,加入适量培养基终止消化过程。
补加6-8 mL新鲜培养基,轻轻吹打悬浮细胞,在1000 RPM条件下离心4分钟,去除上清液。
按1:2比例将MPC5细胞分到新的含有8 mL培养基的培养皿中。
MPC5细胞冻存
当MPC5细胞生长状态良好时,可进行冻存操作。
冻存液为90%完全培养基和10% DMSO。
弃去培养基后,加入少量胰蛋白酶消化细胞,使MPC5细胞变圆脱落。
加入1 mL含血清的培养基后,将细胞悬液转移至冻存管。
加入10% DMSO,确保MPC5细胞在冻存时免受损伤。随后,放入-80℃冻存,再转移至液氮中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Mouse STR 4-2 | 19.3,20.3 |
Mouse STR 5-5 | 14 |
Mouse STR 6-4 | 18 |
Mouse STR 6-7 | 12,17 |
Mouse STR 12-1 | 17 |
Mouse STR 15-3 | 22.3,26.3 |
Mouse STR 18-3 | 16 |
Mouse STR X-1 | 26,28 |
参考文献
- 高糖下调小鼠永生性MPC5肾小球足细胞α-Klotho水平 《细胞与分子免疫学杂志》 2017年06期
- 摘要:目的研究α-Klotho在小鼠永生性MPC5肾小球足细胞系中的表达及高糖刺激下α-Klot...
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