
Y1细胞系(小鼠肾上腺皮质瘤细胞系)
- 来源:肾上腺皮质瘤
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Y1细胞系对肉瘤病毒的转化和白血病病毒的繁殖高度敏感,适合用于DNA转化及转染实验。
Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞系是从LAF1雄性小鼠的肾上腺皮质中分离,具有上皮形态。Y1细胞系在分泌鼠类甾类激素和肾上腺皮质激素方面表现出显著的能力,因此在内分泌系统研究中具有广泛应用。
Y1细胞系的模态数为41,范围在40到108之间,为超二倍体。核型在其茎线数范围内相对稳定,表现出39条具有末端着丝粒的染色体外加2条微小染色体。此外,一些细胞可能仅有1条微小染色体。第一染色体较大,而部分染色体较小,但未检测到特定的结构异常。
Y1细胞系特性特征
基因表达:类固醇激素
Y1细胞对小鼠痘病毒呈阴性、可用于检测LT毒素
Y1细胞能够分泌鼠类甾类激素和肾上腺皮质激素、在内分泌研究中具有重要应用价值
病毒易感性:单纯疱疹病毒;伪狂犬病病毒;痘苗病毒;水疱性口炎病毒;人脊髓灰质炎病毒
Y1细胞系参数表
细胞名称 | Y1细胞系(小鼠肾上腺皮质瘤细胞系) |
别称 | Y-1; Y1; CloneY-1; CloneY1; GM05384 |
细胞来源 | LAF1雄性小鼠肾上腺皮质 |
细胞形态 | 上皮细胞样,呈贴壁生长 |
污染检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 |
培养基 | F-12培养基或1640培养基 + 10% 胎牛血清 + 1% 双抗 |
培养条件 | 37℃,5% CO₂,空气95% |
培养基更换 | 每2-3天更换一次培养基,48小时后需更换 |
病毒易感性 | 单纯疱疹病毒、伪狂犬病病毒、痘苗病毒、水疱性口炎病毒、人脊髓灰质炎病毒1 |
基因表达 | 表达类固醇激素 |
功能特征 | 能够分泌鼠类甾类激素和肾上腺皮质激素 |
用途 | 内分泌研究、LT毒素检测、药物筛选、病毒学研究等 |
实验室注意事项 | 需在无菌条件下操作,避免交叉污染 |
保存条件 | -80℃冷冻保存,长期保存可使用液氮 |
培养教程
Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞系培养教程
Y1细胞复苏
迅速从液氮或-80℃冰箱中取出Y1细胞,立即放入37℃水浴锅中,并轻轻摇晃使其快速解冻,时间不宜超过1分钟。
将解冻后的Y1细胞转移至含有5ml预热的完全培养基的15ml离心管中。
以1000rpm离心5分钟,吸弃上清液,保留Y1细胞沉淀。
用2ml完全培养基轻柔地重悬Y1细胞,然后将其转移至T25培养瓶中,标记清楚。
将培养瓶放入37℃,5% CO₂培养箱中培养Y1细胞。
复苏后24小时,检查Y1细胞的贴壁情况。
如果Y1细胞贴壁良好,吸弃旧培养基,换上新鲜的预热完全培养基,继续培养。
Y1细胞传代
传代时机:当Y1细胞生长至80%-90%汇合度时,进行传代。
吸弃旧培养基,用1ml无菌PBS润洗Y1细胞一次,以去除残余的培养基和血清。
加入适量的0.25%胰酶,消化Y1细胞2-5分钟,直至Y1细胞变圆、开始脱落。
加入2-3ml完全培养基终止胰酶消化,并轻轻吹打Y1细胞使其悬浮。
以1000rpm离心5分钟,吸弃上清,使用适量完全培养基重悬Y1细胞。
按照1:2或1:3的比例将Y1细胞分配到新的培养瓶中,进行传代培养。
Y1细胞冻存
当Y1细胞生长至80%-90%汇合度时,准备进行冻存。
吸弃培养基后,用PBS清洗Y1细胞以去除残余培养基。
用适量胰酶消化Y1细胞,终止消化后,离心收集Y1细胞。
用冷冻保护液(10% DMSO + 90% 完全培养基)重悬Y1细胞。
将重悬后的Y1细胞分装到冻存管中,逐步降温:先在-80℃冰箱中过夜,随后转移至液氮中长期保存。
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