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货号：STM-CL-6013 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
AtT-20细胞（小鼠垂体瘤细胞）
- 来源：垂体；瘤
- 细胞特征：悬浮细胞，聚团生长，圆形（成串）
- 培养基：Ham's F-12K＋15% HS＋2.5% FBS＋1% P/S
- 其他：ATT20细胞能够分泌促肾上腺皮质激素(ACTH)
ATT20细胞系是1966年从患有肿瘤的小鼠垂体中分离出，具有小而圆的细胞形态。
ATT20细胞系特征特性
ATT20细胞能够分泌促肾上腺皮质激素(ACTH)。
ATT20细胞表达促肾上腺皮质激素(ACTH)基因。
ATT20细胞具有抗脊髓灰质炎病毒的能力。
ATT20细胞被检测为鼠痘病毒阴性
ATT20细胞系参数表
| 细胞名称 | AtT-20细胞（小鼠垂体瘤细胞） |
| 细胞别称 | AtT20; AtT 20; ATT-20；小鼠垂体瘤细胞 |
| 种属来源 | 小鼠 |
| 组织来源 | 垂体；瘤 |
| 生长特性 | 半贴半悬 |
| 细胞形态 | 圆形（成串） |
| 细胞代数 | 10代以内 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 染色体数目 | 64-66 |
| 培养基 | F12K+2.5%FBS+15%HS+1%PS |
| 培养条件 | 气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ |
| 传代密度 | 细胞密度达80%-90% |
| 传代比例 | 首次传代建议1:2 |
| 冻存条件 | 无血清冻存液，液氮储存 |
| 细胞规格 | 1x10^6 cells/T25或1mL冻存管 |
| 支原体检测 | 无 |
| 污染检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 |
| 保藏机构 | ATCC; CCL-89 BCRC; 60244 ECACC; 87021902 |
| 基因表达情况 | 促肾上腺皮质激素 (ACTH) |
| 抗病毒特性 | 能抗脊髓灰质炎病毒；鼠痘病毒阴性 |
培养教程
AtT-20小鼠垂体瘤细胞培养教程
细胞复苏
将水浴锅预热至37℃。
用75%酒精擦拭超净工作台，确保无菌环境。
从液氮中取出AtT-20细胞，并迅速放入37℃水浴中快速解冻（约1-2分钟）。
将解冻后的AtT-20细胞悬液缓慢加入到含有预热培养基的培养瓶中，并轻轻摇晃，使AtT-20细胞均匀分散。
AtT-20细胞的快速复苏是保持其活力的重要步骤。
日常培养
每2-3天更换一次培养基或添加新鲜培养基。
观察AtT-20细胞的生长状态，注意细胞团的形成。
定期观察AtT-20细胞的生长状态，以确保其在最佳条件下生长。
传代
当AtT-20细胞密度达到约1×10^6 cells/mL时进行传代。
轻轻摇晃培养瓶，使AtT-20细胞均匀悬浮。
取适量细胞悬液，用细胞计数板计数。
按1:3或1:4的比例稀释AtT-20细胞悬液到新的培养瓶中。
添加新鲜预热的培养基至适当体积。
细胞冻存
收集对数生长期的AtT-20细胞。
低速离心（约800-1000 rpm）5分钟，弃去上清。
用无血清冻存液重悬AtT-20细胞，调整密度至1×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
将AtT-20细胞悬液分装到冻存管中。
使用程序降温盒或细胞冻存容器，将AtT-20细胞缓慢降温至-80℃。
24小时后转移到液氮中长期保存。
注意事项
AtT-20细胞在培养时形成悬浮的细胞团，应避免过度吹打，以免破坏AtT-20细胞团结构。
定期检查AtT-20细胞是否有污染，包括支原体、细菌、酵母和真菌。
建议在10代以内使用AtT-20细胞，避免细胞老化和特性改变。
严格遵守无菌操作规程，避免交叉污染。
更换培养基时需小心，以避免将AtT-20细胞误倒。可采用离心法或自然沉降法进行。
培养基更换方法
离心法：将AtT-20细胞悬液转移到离心管中，低速离心（800-1000 rpm）5分钟，小心吸出上清，添加新鲜培养基重悬AtT-20细胞。
自然沉降法：将培养瓶静置15-30分钟，让AtT-20细胞自然沉降，小心吸出上层培养基，添加新鲜培养基。
生长观察
接种初期（0-24小时）
AtT-20细胞呈单个悬浮状态或小的细胞团
AtT-20细胞呈圆形，数量相对较少
对数生长期（24-72小时）
AtT-20细胞开始形成更大的细胞团
细胞团数量增加，单个AtT-20细胞数量减少
细胞团大小不一
稳定生长期（72-120小时）
AtT-20细胞团进一步增大，数量达到稳定
培养基中可能出现一些代谢产物
高密度期（120小时以上）
大量AtT-20细胞团悬浮在培养基中
AtT-20细胞团可能会相互聚集形成更大的团块
培养基颜色可能发生变化，表明pH值改变
相关资料
STR鉴定及相关
| Mouse STR 1-1 | 11,15 |
| Mouse STR 1-2 | 13,17 |
| Mouse STR 2-1 | 15,16 |
| Mouse STR 3-2 | 10,14 |
| Mouse STR 4-2 | 18.3 |
| Mouse STR 5-5 | 16,18 |
| Mouse STR 6-4 | 18 |
| Mouse STR 6-7 | 13,15 |
| Mouse STR 7-1 | 25.2 |
| Mouse STR 8-1 | 15 |
| Mouse STR 11-2 | 15,16 |
| Mouse STR 12-1 | 16,17 |
| Mouse STR 13-1 | 17.2,18.2 |
| Mouse STR 15-3 | 17,22.3 |
| Mouse STR 17-2 | 14 |
| Mouse STR 18-3 | 17,18 |
| Mouse STR 19-2 | 11,12 |
| Mouse STR X-1 | 25 |
参考文献
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