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货号：STM-CL-6066 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
TtT/GF细胞（小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞）
- 来源：垂体瘤；C57BL/6N x C3H/2N
- 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基：DMEM/F12＋10% HS＋2.5% FBS＋2ng/mL bFGF＋1% P/S
- 其他：FGF依赖性。GFAP阳性。S-100阳性。
TtT/GF细胞（小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞）是由井上健司教授团队于1996年从C57BL/6N和C3H/2N小鼠杂交产生的垂体瘤（具有促甲状腺激素分泌功能）中成功分离。TtT/GF细胞系作为一种永生化的细胞模型，来源于小鼠垂体，并表现出滤泡星状细胞的典型形态特征。
TtT/GF细胞特性
依赖性：TtT/GF细胞系是FGF（成纤维细胞生长因子）依赖性细胞系，增殖和存活高度依赖于外源性FGF的供应.
GFAP阳性：细胞表达胶质纤维酸性蛋白（GFAP），这是一种神经胶质细胞的标志性分子.
S-100阳性：细胞也表达S-100蛋白，具有神经胶质细胞的某些特性.
细胞因子分泌：TtT/GF细胞能够分泌白细胞介素-6（IL-6）.
TtT/GF细胞参数表
| 细胞名称 | TtT/GF细胞（小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞） |
| 种属 | 小鼠 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 组织来源 | 垂体瘤（C57BL/6N x C3H/2N） |
| 培养基 | DMEM/F12 + 10%马血清（HS）+ 2.5%胎牛血清（FBS）+ 2ng/mL FGF + 1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 推荐传代比例 | 1:2-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代方法 | 详见注意事项，需轻柔操作，避免过多气泡 |
| 冻存条件 | 冻存液：92%FBS+8%DMSO或92%完全培养基+8%DMSO；温度：液氮 |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 消化并离心获得细胞沉淀后，加冻存液重悬，程序冻存后转入液氮 |
| 特异性标记物 | GFAP阳性，S-100阳性 |
| 细胞因子分泌 | 能够分泌白细胞介素-6（IL-6） |
| 注意事项 | 贴壁松散，操作轻柔；换液时需预热培养基；收货时大块脱落细胞团为正常现象 |
培养教程
TtT/GF小鼠垂体促甲状腺滤泡星状细胞培养教程
细胞复苏
从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中，轻轻晃动直至冰晶完全融化。
将融化的细胞悬液转移至含有10mL预温的完全培养基的离心管中。
1000 rpm离心5分钟，弃上清，轻轻吹打重悬细胞。
将细胞悬液转移至培养瓶中，置于培养箱中培养。
细胞传代
当TtT/GF细胞生长达到70-80% confluency时进行传代。
吸弃旧培养基，加入适量胰酶消化，直至细胞变圆浮起。
加入新鲜培养基终止消化，轻轻吹打制成细胞悬液。
将细胞悬液按一定比例分至新的培养瓶中。
细胞冻存
收集对数生长期的TtT/GF细胞，离心后弃上清。
加入冻存液（如含80% FBS和20% DMSO的冻存液），轻轻混匀。
将细胞悬液分装到冻存管中，置于-80℃冰箱过夜，然后转移至液氮中长期保存。
注意事项
FGF的重要性： FGF是维持TtT/GF细胞生长的关键因子，必须加入培养基中。
细胞贴壁性： TtT/GF细胞贴壁相对较弱，操作时应轻柔，避免过度吹打。
无菌操作： 所有操作均应在无菌条件下进行，防止污染。
冻存液配制： 冻存液的配制应严格按照标准操作，避免细胞损伤。
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