
GT1-1细胞株(小鼠垂体瘤细胞株)
- 来源:垂体瘤;SV40转化
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM/F12+5% HS+5% FBS+1%P/S
- 其他:神经内分泌特性,能够合成和分泌GnRH;表达多种神经递质受体,如GABA受体、谷氨酸受体等
GT1-1细胞是GT1细胞系的一个亚克隆,GT1来源于稳定表达SV40大T抗原的转基因小鼠产生的可以分泌促性腺激素释放激素LHRH的肿瘤。GT1-1细胞保留了GnRH神经元的许多特性,能够合成pro-LHRHmRNA,并向培养基中分泌LHRH免疫反应物质。
GT1-1细胞株特性特征
GT1-1细胞能够表达pro-LHRH mRNA.
GT1-1细胞可以向培养基中分泌具有LHRH(也称为GnRH)免疫反应性的物质.
携带SV40大T抗原基因,导致了下丘脑GnRH神经元的不受控制生长,保留了原代GnRH神经元的许多基因特征.
GT1-1细胞能够合成和分泌促性腺激素释放激素(LHRH/GnRH).
GT1-1细胞保留了原代GnRH神经元的许多功能特征
GT1-1细胞株参数表
细胞名称 | GT1-1细胞株(小鼠垂体瘤细胞株) |
细胞别称 | GT1-1细胞;GT11; 小鼠垂体瘤细胞 |
种属来源 | 小鼠 |
组织来源 | 垂体 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生物安全等级 | 1 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | DMEM/F12+8%胎牛血清+2%马血清(两种血清均需灭活,灭活方法:42度,30分钟) |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
分子特征 | 表达pro-LHRH mRNA,分泌LHRH样免疫反应性物质 |
基因特征 | 携带SV40大T抗原基因 |
功能特性 | 能够合成和分泌促性腺激素释放激素(LHRH/GnRH) |
培养教程
GT1-1小鼠垂体瘤细胞株培养教程
细胞复苏
解冻步骤: 将含1mL GT1-1细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速解冻。
重悬: 加入4mL预热的完全培养基,轻轻混合均匀。
离心: 以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。
重悬: 用1-2mL新鲜培养基重悬GT1-1细胞。
培养: 将细胞悬液转移至培养瓶中,添加适量培养基,并放置于37°C、5% CO2的培养箱中培养过夜。
换液: 次日更换培养基并检查GT1-1细胞的密度。
细胞传代
传代时机: 当GT1-1细胞密度达到80-90%时进行传代,通常每周2次。
操作步骤: 吸除旧培养基,用不含钙、镁的PBS轻轻冲洗细胞1-2次。
消化: 加入1mL 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液,37°C孵育1-2分钟,观察GT1-1细胞是否脱落。
终止消化: 轻敲培养瓶,加入少量培养基终止消化。
重悬: 补加6-8mL新鲜培养基,轻轻吹打混匀。
分装: 按1:2至1:6的比例将GT1-1细胞悬液分装至新的培养瓶中,补加新鲜培养基至适当体积。
细胞冻存
冻存液: 使用无血清冻存液。
分装: 将GT1-1细胞悬液分装至冻存管中。
降温: 缓慢降温至-80°C,然后转移至液氮中长期保存。
注意事项
观察: 定期检查GT1-1细胞的形态和生长状况。
无菌操作: 确保操作过程无菌,以避免污染。
支原体检测: 定期进行支原体检测。
传代次数: 控制GT1-1细胞的传代次数,以维持细胞特性。
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