
LX-2细胞 (人肝星形细胞)
- 来源:肝星形细胞;SV40转化
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:LX-2细胞表达多种与肝纤维化相关的标志物,如α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和I型胶原
LX-2人肝星形细胞是通过用SV40大T抗原转染永生化原代人肝星状细胞,并在低血清培养基条件下选择性培养早期传代细胞而产生。
LX-2细胞的建立克服了原代肝星状细胞培养变异性问题,并提供稳定和无限的均质人肝星状细胞来源。LX-2细胞已广泛表征,保留了重要的细胞因子信号传导、神经元基因表达、视黄醇代谢和纤维化形成的关键特征。其特性包括表达α-SMA、GFAP和I型胶原等与肝纤维化相关的标志物。
LX-2细胞特性
细胞来源:原代人肝星状细胞,通过SV40大T抗原转染永生化。
细胞特性:星状细胞形态,贴壁生长。
生长特性:在低血清条件(如1% FBS)下也能生长。
稳定性:维持原始星形细胞表型稳定。
功能特性:表达多种与肝纤维化相关的标志物,如α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和I型胶原。
应用领域:广泛用于研究肝脏疾病,特别是纤维化的发病机制和抗纤维化药物的评估。
LX-2细胞参数表
细胞名称 | LX-2细胞 (人肝星形细胞) |
细胞别称 | Lieming Xu-2;人肝星形细胞;lx2 |
种属来源 | 人 |
组织来源 | 肝 |
细胞形态 | 星状细胞样 |
细胞代数 | 10代以内 |
背景介绍 | 由Xu等人通过SV40大T抗原转染永生化原代人肝星状细胞建立 |
STR鉴定 | 鉴定正确 |
支原体检测 | 无 |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
表达特征 | α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、I型胶原等 |
生长特性 | 贴壁生长 |
倍增时间 | 约48-96小时 |
培养基 | DMEM + 10% FBS + PS |
生长条件 | 气相:95%空气 + 5%二氧化碳;温度:37°C |
培养技术 | 传代方法:1:2至1:6,每周2次 |
冻存液 | 90%完全培养基 + 10% DMSO,液氮储存 |
用途 | 仅供科研使用 |
研究领域 | 肝脏病理生理过程,特别是肝纤维化的发病机制和抗纤维化药物评估 |
特性 | 维持肝星形细胞信号传导、神经元基因表达、类视黄醇代谢和纤维化形成的关键特性 |
稳定性 | 提供稳定和无限的均质人肝星状细胞来源 |
适用范围 | 细胞因子信号传导,纤维形成等 |
培养教程
LX-2人肝星形细胞贴壁培养教程
细胞传代
弃去培养上清,用不含钙和镁离子的PBS润洗LX2细胞1-2次。
添加2ml 0.25%胰蛋白酶消化液,37°C培养箱中消化1-2分钟,观察细胞情况。
当大部分LX2细胞变为圆形并脱落时,立即停止消化,轻轻敲击培养瓶底几次,加入足量培养基以停止消化。
离心(1000rpm,4分钟),弃去上清液,加入适量培养基,充分悬浮。
按照1:2到1:5的比例将LX2细胞悬液分装入含有8ml培养基的新培养瓶中。
细胞冻存
LX2细胞生长至培养瓶80%覆盖率时,弃去培养液,用PBS清洗LX2细胞一次。
加入1ml 0.25%胰蛋白酶消化液,37°C培养箱中消化1-2分钟,观察LX2细胞变圆后加入5ml完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落。
离心(1000rpm,5分钟),弃去上清液,沉淀LX2细胞用1ml雅吉生物无血清冻存液重悬。
将冻存LX2细胞直接放入-80°C冰箱保存。
细胞复苏
从液氮中取出LX2细胞冻存管,快速置于37°C水浴中解冻。
解冻后用5ml完全培养基重悬,按照1:2的比例接种至新培养瓶中,放入37°C,5% CO2的培养箱中培养。
第二天更换新鲜完全培养基,继续培养。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D1S1656 | 12 |
D2S441 | 11,14 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 13,15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 13 |
D10S1248 | 13 |
D12S391 | 15,17 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 13 |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 13,15.2 |
D21S11 | 28,31 |
D22S1045 | 16 |
DYS391 | 10 |
FGA | 21,26 |
Penta D | 12,13,15 |
Penta E | 5,21 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 17 |
参考文献
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