
原代小鼠肝动脉平滑肌细胞
- 来源:肝动脉组织
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:原代平滑肌细胞专用培养基
- 其他:在低密度时,细胞交织成网状;在高密度时,排列为旋涡状或栅栏状
相关培养基&试剂
原代小鼠肝动脉平滑肌细胞(Mouse Primary Hepatic Arterial Smooth Muscle Cells, SMCs)是血管生理学和病理学研究中的重要工具,广泛应用于探索血管疾病机制和心血管系统功能。
小鼠肝动脉平滑肌细胞来源于实验室小鼠(如C57BL/6或BALB/c)的肝动脉组织,通过酶消化技术分离获取。肝动脉的解剖结构具有显著变异性,胚胎期供血来源于胃左动脉、腹腔动脉及肠系膜上动脉,出生后通常保留腹腔动脉为主供血动脉,但在个别情况下可见副肝动脉或替代肝动脉。原代肝动脉平滑肌细胞在培养初期即可贴壁伸展,呈现梭形、不规则形或扇形等多种形态;培养至两周后,细胞增殖汇合,形态多为长梭形,具分枝状突起,呈平行单层或局部多层排列,高密度时则形成栅栏状或旋涡状。传代后细胞保持良好的增殖能力和形态特征,4-6天即可汇合。这些细胞是血管壁的重要结构成分,在血流动力学调节和血管重塑中起关键作用,能够表达ICAM-1和VCAM-1等黏附分子,促进血管壁炎症反应,与血管疾病的发生、发展及稳定性密切相关。
小鼠肝动脉平滑肌细胞特性特征
生物标志物表达:α-SMA(平滑肌肌动蛋白)、ICAM-1和VCAM-1;
基因表达:平滑肌细胞能表达多种与收缩功能和细胞迁移相关的基因,这些基因在血管重塑和病理状态下可能发生调控
小鼠肝动脉平滑肌细胞参数表
细胞名称 | 原代小鼠肝动脉平滑肌细胞 |
英文名称 | Mouse Hepatic Artery Smooth Muscle Cells |
产品介绍 | 分离自小鼠肝动脉组织,参与血管壁的炎症反应,与血管疾病的进展和稳定有关。 |
来源组织 | 肝动脉组织 |
形态学特征 | 梭形或纺锤形 |
生长方式 | 贴壁生长 |
传代特性 | 可传3-5代 |
培养基类型 | 原代细胞专用培养基 |
消化液 | 0.25% 胰蛋白酶 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
培养条件 | 37°C,95%空气,5% CO₂ |
细胞密度 | 接种密度:1×10^6 cells/ml |
质量检测 | 经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上;不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
储存温度 | 活细胞:37°C培养箱;冻存管:液氮罐 |
发货规格 | 活细胞:T25培养瓶或冻存管(约5 x 10^5 cells/vial) |
发货形式 | 活细胞:常温运输;冻存管:干冰运输 |
产地 | 中国 |
供应限制 | 仅供科研使用 |
细胞形态特征 | 细胞呈梭形,有少量突起,核位于中央,胞浆丰富致密。 |
生长特点 | 细胞密集时呈“峰-谷”状生长,低密度时交织成网状。 |
分子标志物表达 | 表达α-SMA、ICAM-1、VCAM-1等,与血管炎症反应相关。 |
冻存条件 | 冻存液:50% DMEM + 40% FBS + 10% DMSO |
注意事项 | 建议用多聚赖氨酸 PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%)对接种培养皿包被处理 |
培养教程
原代小鼠肝动脉平滑肌细胞培养教程
细胞复苏
从液氮罐中取出装有肝动脉平滑肌细胞的冻存管,佩戴防护手套,注意避免冻伤。
准备37°C水浴锅。
将冻存管的下半部分置于37°C水浴中,快速振动冻存管,直到仅剩一小块冰芯(约需1分钟)。
用消毒液擦拭冻存管外表面,保持无菌操作环境。
缓慢将解冻后的肝动脉平滑肌细胞悬液加入盛有5ml预热完全培养基的离心管中,混匀。
室温下以800转/分离心5分钟,弃去上清液。
加入10ml完全培养基轻轻重悬肝动脉平滑肌细胞沉淀,吹打成单细胞悬液。
将细胞悬液转移至10cm培养皿,放入37°C、5% CO₂培养箱中培养。
4小时后观察细胞贴壁情况,约95%以上肝动脉平滑肌细胞应呈贴壁状态,形态饱满、生长状态良好。
细胞传代
当肝动脉平滑肌细胞达到80%-90%汇合时进行传代。
用PBS清洗培养皿,去除残余培养基和代谢废物。
加入1ml 0.25%胰蛋白酶消化液,轻轻摇匀覆盖细胞单层。
置于37°C培养箱中孵育约2-5分钟,待细胞开始脱落时轻敲培养皿加速脱附。
加入等量完全培养基(含20% FBS和1%双抗)终止胰酶活性。
吸取细胞悬液轻轻吹打,确保肝动脉平滑肌细胞成单细胞状态。
以800转/分离心5分钟,弃去上清液。
加入新鲜完全培养基重悬细胞,调整细胞浓度至1×10⁶/ml。
按比例将肝动脉平滑肌细胞悬液分装至新的T-25培养瓶或10cm培养皿中,置于培养箱继续培养。
细胞冻存
按传代步骤处理肝动脉平滑肌细胞,使用预冷的冻存液将细胞重悬至0.5×10⁶/ml浓度。
将细胞悬液转移至冻存管,确保每管装量不超过1ml。
冻存管置于-80°C冻存盒中,降温16-18小时后转移至液氮罐中长期保存。
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