
MAEC细胞(小鼠主动脉内皮细胞) (暂不提供)
- 来源:主动脉
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:M199+5% FBS+1% P/S
- 其他:MAEC细胞经过特殊处理,使其具备自发永生化的能力。
MAEC小鼠主动脉内皮细胞(Mouse Aortic Endothelial Cells)是从雌性P53缺陷型小鼠的主动脉内皮细胞中分离,具有自发永生化特性。MAEC细胞系因其P53基因的缺陷,使得小鼠对肿瘤具有易感性。P53基因在细胞周期调控、DNA损伤修复和凋亡中发挥重要作用,缺陷导致细胞异常增殖。MAEC细胞具备典型的内皮样形态,呈贴壁生长。MAEC细胞因自发永生化而适合长期体外培养,广泛应用于血管生物学、肿瘤学和心血管疾病等研究。它为研究P53基因缺陷对内皮功能的影响提供了良好的模型,并可用于探索与血管功能障碍、心血管疾病和肿瘤发生相关的生物学机制,且在药物筛选和评估中具有重要价值。
MAEC细胞特性特征
自发永生化:MAEC细胞经过特殊处理,具备自发永生化能力,能够在体外长期培养而不失去增殖能力。
MAEC细胞的基因表达特征与内皮功能密切相关,通常表达多种内皮细胞标志物,如:E-cadherin、VEGF(血管内皮生长因子);
MAEC细胞在不同实验条件下可能表现出不同的蛋白质表达模式。例如:α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin);
MAEC细胞的功能调控涉及多条信号通路,包括:p53信号通路、NF-kB信号通路。
MAEC细胞参数表
细胞名称 | MAEC细胞(小鼠主动脉内皮细胞) |
英文名称 | Mouse Aortic Endothelial Cells (MAEC) |
种属 | 小鼠 |
来源 | 雌性P53缺陷型小鼠的主动脉内皮细胞 |
细胞形态 | 上皮样,呈贴壁生长 |
污染检测 | 支原体、细菌、酵母检测均为阴性 |
培养基 | M199基础培养基 + 5% FBS + 1% P/S |
温度 | 37℃ |
气相组成 | 95%空气,5%二氧化碳 |
湿度 | 70%-80% |
冻存液 | 70% ECM + 20% FBS + 10% DMSO(现用现配) |
冻存条件 | 液氮保存 |
分子特征 | E-cadherin ↓(上皮细胞标志物,维持上皮细胞表型和极性) |
α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)↑(反映新生血管情况,表达增高与肿瘤的侵润和转移有关) | |
波形蛋白(Vimentin)↑(间质细胞标志物,表达增高使细胞的迁移能力增加) | |
β-连环蛋白(β-catenin)↑(参与粘附连接,诱导EMT的发生) | |
纤粘连蛋白(Fibronectin)↑(EMT发生时增高,非特异性的) | |
操作要求 | 在二级生物安全台内操作,注意个人防护 |
培养教程
MAEC小鼠主动脉内皮细胞培养教程
MAEC细胞接种步骤
细胞状态检查:收到MAEC细胞后,首先使用显微镜检查其状态,确保细胞活性良好并能正常贴壁。
接种密度:根据实验需求,将MAEC细胞以每孔5×10⁴个细胞的密度接种于6孔板中,或根据实验规模接种于T25培养瓶中。
贴壁过程:MAEC细胞接种后需在培养箱内培养2-4小时,直至细胞贴壁稳定。
MAEC细胞传代方法
传代时机:当MAEC细胞铺满培养瓶或培养皿表面达到80%-90%汇合度时进行传代。
弃去MAEC细胞培养液后,用无钙、无镁的PBS(磷酸盐缓冲液)轻轻清洗1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,放入培养箱中消化1-2分钟,观察MAEC细胞形态是否变圆并开始脱落。
加入含10% FBS的培养基终止消化,轻轻吹打使MAEC细胞悬浮。
1000 RPM离心3-5分钟后,弃去上清液,用新鲜培养基重悬MAEC细胞。
以1:2至1:3的比例将MAEC细胞分配至新的培养瓶中,加入适量培养基继续培养。
MAEC细胞冻存步骤
收集并离心MAEC细胞后,弃去上清液,用冻存液重悬细胞。
每管分装约1 mL MAEC细胞悬液至冻存管中,按常规冻存程序逐步降温至-80℃或液氮保存。
MAEC细胞复苏步骤
将冻存的MAEC细胞快速置于37℃水浴中解冻,轻轻摇晃至完全解冻。
解冻后,将MAEC细胞加入4-6 mL完全培养基中,轻轻混合均匀。
1000 RPM离心3-5分钟,弃去上清液,用新鲜培养基重悬MAEC细胞。
转移MAEC细胞至新的T25培养瓶中,并添加6-8 mL培养基。
将复苏后的MAEC细胞放置于37℃培养箱中过夜,次日检查其生长状态,确保MAEC细胞恢复正常。
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