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货号：STM-CL-5391 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
HAEC细胞（人主动脉内皮细胞SV40永生化）
- 来源：主动脉
- 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样。
- 培养基：内皮细胞专用培养基
- 其他：SV40大T抗原转染的HAEC细胞不具备恶性转化的特性，适合用于基础研究和安全性评估。与思泰默原代人主动脉内皮细胞相比，HAEC永生化培养中有见漂浮颗粒物、漂浮细胞和部分形变细胞，来源于SV40转化和筛选过程，为正常现象，多见于永生化细胞。
HAEC-SV40细胞系是一种经SV40大T抗原基因转染的人类主动脉内皮细胞永生化细胞系。最初原代细胞来自于人类主动脉内皮，通过慢病毒转染技术引入SV40大T抗原基因，从而获得无限增殖的能力。HAEC-SV40细胞系因其稳定的增殖性和内皮细胞的特征，为血管生物学、药物筛选及疾病模型研究提供了重要的实验工具。HAEC-SV40细胞可以在适宜的条件下稳定传代20代以上，适合长时间的实验。
HAEC细胞特性特征
HAEC细胞经过SV40大T抗原转染后，增殖能力显著增强，能够在体外长期培养而不出现衰老现象
HAEC细胞凋亡率较低，显示出更强的存活能力
HAEC细胞不具备恶性转化的特性，适合用于基础研究和安全性评估
在1μM血管紧张素II存在下会收缩
SV40大T抗原阳性
基因表达与原代细胞相比基本不发生变化
通过免疫染色和qRT-PCR验证SV40大T抗原在永生化细胞中的表达
HAEC-SV40细胞合适条件下至少可以稳定传代20代以上
HAEC-SV40细胞生长迅速，可用于提取大量蛋白质进行生化分析、成本低廉，容易培养
HAEC细胞SV40永生化参数表
| 细胞名称 | HAEC-SV40 - 人主动脉内皮细胞永生化细胞系 |
| 细胞别称 | HAEC（SV40） |
| 来源 | 人类主动脉内皮细胞，通过慢病毒转染SV40大T抗原获得 |
| 细胞形态 | 内皮细胞样，多角形，贴壁生长 |
| 细胞类型 | 永生化细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 生物安全等级 | 2 |
| 致瘤性 | 无恶性转化，适合用于基础研究和安全性评估 |
| 细胞特性 | 1. 细胞骨架染色呈现丰富肌动蛋白 |
| 2. 1μM血管紧张素II存在下会收缩 | |
| 3. SV40大T抗原阳性 | |
| 4. 在软琼脂中能形成克隆 | |
| 生长曲线 | 26小时 - 细胞倍增时间 |
| 培养条件 | 内皮细胞培养体系 |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶：10-12ml；10cm皿：12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4 - 根据细胞生长速度及密度决定 |
| 冻存液配方 | 95% FBS +5% DMSO 或 95% 完全培养基 + 5% DMSO |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 注意事项 | 控制胰酶消化时间，避免气泡影响 |
培养教程
HAEC人主动脉内皮细胞SV40永生化培养教程
培养步骤
预热培养基、胰酶、PBS、离心管、培养瓶及无菌枪头至室温。
使用移液管吸弃HAEC细胞培养瓶中的原培养基。
加入3-5 mL常温PBS，轻轻润洗HAEC细胞10-20秒，随后吸走PBS。
加入约1 mL胰酶，轻轻晃动培养瓶以确保胰酶均匀覆盖HAEC细胞层。
将培养瓶放入37℃培养箱中消化，直至细胞间隙增大部分脱落。
当HAEC细胞间隙明显增大时，加入2-3 mL完全培养基以终止消化过程。
混匀细胞悬液后，进行900 rpm离心3-5分钟，弃去上清液。
加入新鲜的完全培养基，轻轻重悬HAEC细胞，并均匀分配到新的培养瓶中。
补充完全培养基后，将HAEC细胞培养瓶放回培养箱中培养。
注意事项
消化敏感性：HAEC细胞对消化过程极为敏感。消化时间和操作力度需严格控制，避免过度吹打以减少气泡产生。
细胞贴壁性：HAEC细胞的贴壁能力较弱，温度变化或运输可能导致细胞回缩。操作后需及时放回培养箱恢复。
培养基要求：必须使用专用的内皮细胞培养基，确保HAEC细胞健康和正常增殖。
冻存细胞步骤
消化并离心获得HAEC细胞沉淀后，加入含40% FBS和5% DMSO的冻存液，轻轻重悬细胞。
将细胞悬液迅速转移至标记好的冻存管中。
将冻存管放入程序冻存盒中，置于-80℃冰箱中过夜，然后转移至液氮中保存。
复苏细胞步骤
从液氮中取出冻存管，立即放入37℃水浴中快速复苏。
复苏后，将HAEC细胞悬液迅速转移至含有完全培养基的离心管中，900 rpm离心3-5分钟，弃去上清液。
用新鲜完全培养基重悬HAEC细胞，转移至培养瓶中，并将其放回培养箱中继续培养。
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