
A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞
- 来源:A7r5细胞的组织来源是大鼠的胸大动脉平滑肌组织。
- 细胞特征:A7r5细胞呈现出成纤维细胞样的形态特征,其生长特性为贴壁生长,即在培养基表面附着生长。
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表达:肌激酶;肌酸激酶(肌肉同工酶);肌球蛋白
A7r5大鼠胸大动脉平滑肌细胞是从胚胎大鼠主动脉胸平滑肌中分离的成纤维细胞样细胞,由W Carlisle 保藏,应用于心血管疾病研究。
在A7r5细胞培养到稳定期后,表现出增强的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性。当A7r5细胞停止分裂后,会合成骨肉型肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性(CPK)的特性。
A7r5细胞系是研究心血管疾病发展和治疗的有效工具。
基因表达:肌激酶;肌酸激酶(肌肉同工酶);肌球蛋白
A7r5细胞系参数表
名称 | A7r5(大鼠胸大动脉平滑肌细胞) |
别称 | A7R5 |
种属 | 大鼠(Rattus norvegicus) |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO |
冻存温度 | 液氮 |
生长培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃ |
年龄(性别) | 胚胎 |
组织来源 | 胸大动脉平滑肌 |
细胞类型 | 自发永生化细胞 |
生物安全等级 | BSL-1 |
基因表达情况 | myokinase; creatine phosphokinase (muscle isoenzyme); myosin |
传代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
保藏机构 | ATCC; CRL-1444 ECACC; 86050803 |
细胞污染 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性 |
培养教程
培养容器准备:
建议平躺着培养该细胞,以增大空气交换面积,液体高度最好不要超过3mm。
对于T25培养瓶,加6-8ml培养基;对于T75培养瓶,加15ml左右培养基。
培养基配制:
培养基尽量现配,配好的培养基最好两周内用完,因为叶酸不稳定易分解。
换液频率:
一般情况下,细胞2-3天换液一次,即使培养基没有变黄。换液时轻轻侧过培养瓶/皿,不要使细胞飘起来。
平常换液建议半换,传代可直接补加足够新鲜的培养基后直接分瓶。
细胞状态监测:
细胞团长至肉眼可见,且T25瓶子有几十上百个小团时,细胞数量已经比较多,此时应该2天换液一次。
当一个20倍视野有4-5个大细胞团时应该进行传代。
传代方法:
传代时加入两倍体积的新鲜培养基后,轻轻吹打细胞团,将大的细胞团打散成小团,但不要剧烈吹打成单细胞悬液。
或者将细胞悬液转移至离心管中,1000rpm离心5min后,弃去上清,加入三倍体积的新鲜培养基轻轻重悬后转移至三个新的培养瓶中。
冻存液准备:
冻存液用50%血清 + 40%完全培养基 + 10%DMSO。细胞数量应在0.5-1.0×10^6/ml为宜。
复苏时可适当加大胎牛血清的含量,以使细胞尽快长起来。复苏后细胞需要重新聚团及较长的潜伏期,故复苏时间较长,期间应多加观察,并注意更换培养基,频率为3天一换(半换)。
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