
EL-4-B5细胞(小鼠胸腺淋巴瘤细胞)
- 来源:胸腺
- 细胞特征:半贴半悬 ,淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:特殊性质:EL-4-B5是溴脱氧尿嘧啶(bromo-deoxyuridine)抗性突变体
EL-4-B5小鼠胸腺淋巴瘤细胞是EL4小鼠胸腺瘤的亚克隆,EL4B5细胞系是一种溴脱氧尿苷的抗性突变体,可作为B细胞的饲养层,用于人单克隆抗体的产生。
EL-4-B5细胞是通过甲烷磺酸乙酯处理产生IL-2的EL-4小鼠胸腺瘤细胞后,突变筛选获得。突变后发现了一种胸苷激酶缺陷且对瓦巴因有抗性的克隆EL-4 BurOUr 6.1,这些细胞能通过细胞接触激活小鼠和人类的B细胞,经过亚克隆获得了EL-4-B5细胞系,它能够有效地激活B细胞,促进其增殖、分化并诱导抗体分泌。
EL-4-B5细胞特性特征
增殖能力:EL4B5细胞具有较高的增殖率,可以承受较大比例的传代(如1:10)
突变特性:溴脱氧尿嘧啶(bromo-deoxyuridine)抗性突变体、胸苷激酶缺陷(thymidine kinase-deficient)、乌阿巴因抗性(ouabaine-resistant)
饲养层功能:EL4B5细胞 可作为饲养层细胞(feeder cell)用于B细胞培养
EL4B5细胞可用于产生人源单克隆抗体
基因特征:IL-2产生: 原始EL-4细胞系能产生IL-2,但EL-4-B5的IL-2产生能力需进一步确认
基因突变: 经过乙基甲烷磺酸酯(ethyl-methane-sulfonate)诱导突变
EL4B5细胞具备半贴壁半悬浮生长的特点,其中悬浮状态的细胞表现出更健康的生长
EL-4-B5细胞系提供了一种从用荧光VLP选择的单个抗原特异性B细胞克隆产生重组人mAb的方法,并且可以用于产生许多其他病毒的人mAb,这些病毒的蛋白质可以自组装成VLP。
EL-4-B5细胞参数表
细胞名称 | EL-4-B5细胞(小鼠胸腺淋巴瘤细胞) |
同义词 | EL-4 B5; EL4-B5; EL4B5 |
物种组织来源 | 小鼠 (Mus musculus) 胸腺 |
细胞类型 | 淋巴细胞 |
形态 | 淋巴母细胞样,半贴壁半悬浮培养 |
疾病来源 | 小鼠胸腺淋巴瘤 |
原始细胞系 | EL-4小鼠胸腺瘤细胞系 |
突变特性 | 溴脱氧尿嘧啶(bromo-deoxyuridine)抗性突变体,胸苷激酶缺陷, 乌阿巴因抗性 |
生物安全等级 | 2 |
培养基 | RPMI-1640 / 10% 胎牛血清 (FBS) |
添加剂 | 1% 青霉素-链霉素,2mM 谷氨酰胺,10mM HEPES,0.056mM β-巯基乙醇 |
培养条件 | 37°C, 5% CO2, 95% 空气,湿度70%-80% |
传代方式 | 无需酶处理,直接收集细胞 |
推荐传代比例 | 1:2 (首次传代) |
冻存液 | 90% 血清, 10% DMSO |
细胞数量 | >1x10^6 细胞/瓶 |
包装规格 | T25瓶或1mL冻存管 |
应用 | 仅供科研使用,适用于免疫学研究、肿瘤生物学、药物筛选和抗体生产 |
支原体测试 | 已测试 |
IL-2 产生 | 原始EL-4细胞系能产生IL-2,但EL-4-B5的IL-2产生能力需进一步确认 |
其他特性 | 可作为饲养层细胞用于B细胞培养,强烈激活B细胞,诱导B细胞增殖、分化 和抗体分泌 |
培养教程
EL4B5小鼠胸腺淋巴瘤细胞培养教程
细胞复苏
在37°C水浴中快速解冻冻存的EL4B5细胞冻存管。
将EL4B5细胞悬液转移到含4-6mL完全培养基的离心管中。
1000RPM离心3-5分钟,弃去上清液。
用完全培养基重悬EL4B5细胞。
将细胞悬液转移到含6-8mL完全培养基的培养瓶中,37°C培养过夜。
细胞传代
EL4B5细胞为半贴壁半悬浮培养。
不需要酶处理,直接收集培养基中的悬浮细胞。
轻拍培养瓶收集贴壁EL4B5细胞。
首次传代建议比例为1:2。
保持EL4B5细胞密度低于10^6细胞/mL。
培养注意事项
悬浮状态的EL4B5细胞通常更健康。
当EL4B5细胞密度低于60%时,需收集悬浮细胞离心后重悬,再回加到原培养瓶中。
EL4B5细胞生长至70%-90%时进行传代。
传代时需收集培养基中的悬浮细胞。
冻存
冻存液:90% FBS + 10% DMSO
细胞密度:>1x10^6细胞/mL
缓慢降温后转入液氮保存EL4B5细胞。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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