PED细胞（猪内皮细胞系）

PED细胞（Porcine Endothelial Cells，猪内皮细胞）是从健康猪的血管内皮组织中分离获得的正常内皮细胞，常用于血管生物学研究、药物筛选及疾病模型的建立。PED细胞主要来源于成年或幼年猪的血管内皮，通常从动脉、静脉等大血管或微小血管内皮层中分离而来。

PED细胞表现出典型的上皮细胞样形态，具有贴壁生长特性。PED细胞在模拟人类内皮细胞功能及研究心血管疾病方面具有重要的应用价值。

PED细胞特性特征

• 代谢活性：PED细胞在适宜的培养条件下维持高水平的代谢活性，适合用于药物筛选和生物学研究。

• 基因表达：PED细胞表达多种与内皮功能相关的基因，如VEGF（血管内皮生长因子）、eNOS（内皮型一氧化氮合酶）、CD31（内皮细胞标志物）等。

• 蛋白质表达：PED细胞表面表达多种膜蛋白，包括整合素和选择素，这些蛋白在细胞粘附、迁移及信号传导中发挥关键作用。

• 基因组：PED细胞的基因组与其他哺乳动物内皮细胞相似，包含调节血管生成、炎症反应和细胞增殖的相关基因。

• 转录因子：PED细胞中活跃的转录因子包括NF-κB和HIF-1α，这些因子在应对缺氧和炎症反应中起着重要作用

PED细胞参数表

PED猪内皮细胞系培养教程

细胞复苏

• 将冻存管中含有1 mL PED细胞悬液的样品，快速放入37℃水浴中，轻轻摇晃直至细胞完全解冻。
  

• 向解冻后的PED细胞悬液中加入4 mL的完全培养基（DMEM + 10% FBS + 1% P/S），轻轻混匀。
  

• 将PED细胞悬液转移至离心管中，使用1000 RPM的转速离心4分钟，去除上清液。
  

• 加入1-2 mL新鲜的完全培养基，轻轻吹打混匀，确保细胞均匀分散。
  

• 将重悬后的PED细胞悬液转移至T25培养瓶或10 cm培养皿中，加入约8 mL完全培养基，培养过夜。
  

• 第二天检查PED细胞的生长情况，确认是否有污染，并观察PED细胞是否已成功贴壁。
  

PED细胞传代

• 当PED细胞的密度达到80%-90%时，准备进行传代。
  

• 弃去原培养基，使用不含钙、镁离子的PBS缓冲液洗涤PED细胞1-2次，以去除残留的培养基。
  

• 向PED细胞上加入约1 mL的0.25%胰蛋白酶（含EDTA），轻轻摇动培养瓶，使胰酶均匀覆盖细胞。
  

• 将培养瓶放入37℃培养箱中，观察PED细胞是否开始变圆并脱落，通常消化时间为2-3分钟。

• 一旦大部分PED细胞脱落，立即加入3-4 mL完全培养基以终止胰酶的消化作用。
  

• 离心PED细胞悬液，使用1200 RPM的转速离心3分钟，去除上清液。
  

• 加入新鲜的完全培养基，轻轻重悬PED细胞，确保细胞均匀分散。

• 按照1:2至1:4的比例将PED细胞悬液接种到新的培养瓶中，补充适量的培养基，并使用透气瓶盖培养。
  

PED细胞冻存

• 配制冻存液：使用92% FBS和8% DMSO，或使用92%完全培养基和8% DMSO，混匀。
  

• 传代时，收获生长良好的PED细胞，使用胰酶消化后离心，得到细胞沉淀。
  

• 向PED细胞沉淀中加入预先配制好的冻存液，轻轻重悬PED细胞，确保细胞均匀分散。
  

• 将PED细胞悬液迅速转移至标记好的冻存管中，确保冻存管中的细胞量适中。
  

• 将冻存管放入程序冻存盒中，置于-80℃冰箱过夜，第二天转入液氮保存。
  

• 如果没有程序冻存盒，也可以将冻存管放置于泡沫盒中，在4℃静置5-10分钟，然后转入-20℃静置2小时，再移入-80℃过夜，最后转入液氮。