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货号：STM-CL-5127 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
COLO 320DM直肠癌细胞（人结直肠腺癌细胞）
- 来源：腺癌；结直肠
- 细胞特征：半贴半悬， 上皮细胞样
- 培养基：生长培养基：1640+10% FBS+1% P/S
- 其他：抗原特性: CEA、CSAp、结肠抗原3呈阴性；角蛋白和波形蛋白呈弱阳性
COLO 320DM人结直肠腺癌细胞是从一名患有结直肠腺癌的55岁白人女性患者的结肠中分离出的圆形折射细胞系。
COLO 320DM细胞为超二倍体，模态数为24，范围在49到61之间，常见9到11条标记染色体（包括M1、M2、M3、M5、M10、M11、M12、M13、M14、7p-和10q+）。在24%的检查中期中观察到两分钟染色体。
该细胞具有致瘤性。
COLO 320DM细胞表达血清素、去甲肾上腺素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素（ACTH）和甲状旁腺激素。同工酶分析显示为ES-D 1型、G6PD B型、PEP-D 1型、PGD A型、PGM1 1型和PGM3 2型。
抗原检测结果表明，COLO 320DM细胞对CEA、CSAp和结肠抗原3呈阴性。而角蛋白和波形蛋白则呈弱阳性。COLO 320DM细胞具有双微染色体（DM chromosomes）。
COLO 320DM细胞特性
COLO 320DM细胞形态: 圆形折射细胞
染色体数目: 超二倍体，常见9-11条标记染色体，包括7p-和10q+，模态数=24，范围=49到61
COLO 320DM细胞具备致瘤性
基因表达: 血清素、去甲肾上腺素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素、甲状旁腺激素
同工酶: ES-D、G6PD、PEP-D、PGD、PGM1、PGM3
抗原特性: CEA、CSAp、结肠抗原3呈阴性；角蛋白和波形蛋白呈弱阳性
COLO 320DM细胞参数表
| 细胞名称 | COLO 320DM |
| 别称 | COLO-320DM; COLO_320DM; COLO-320-DM; COLO320/DM; COLO320-DM; COLO320DM; Colo320DM; COLO320 DM; COLO 320 DM |
| 细胞来源 | 人 |
| 组织来源 | 结肠 |
| 疾病特征 | 结直肠腺癌（Dukes氏C型） |
| 细胞形态 | 圆形，折射细胞 |
| 生长特性 | 半贴壁半悬浮生长 |
| 染色体数目 | 超二倍体，常见9-11条标记染色体（M1、M2、M3、M5、M10、M11、M12、M13、M14、7p-和10q+）； 模态数=24；范围=49到61 |
| 基因表达 | 血清素；去甲肾上腺素；肾上腺素；促肾上腺皮质激素（ACTH）；甲状旁腺素 |
| 同工酶 | ES-D，1；G6PD，B；PEP-D，1；PGD，A；PGM1, 1；PGM3，2 |
| 抗原特性 | CEA、CSAp和结肠抗原3呈阴性；角蛋白和波形蛋白呈弱阳性 |
| 致瘤性 | 有，在裸鼠中 |
| 支原体检测 | 阴性 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 细胞来源患者 | 55岁白人女性 |
| 应用 | 仅供科研使用 |
| 培养基 | RPMI-1640（GIBCO, 货号31800022），90%；FBS，10% |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃ |
| 传代方法 | 1:2至1:6，每周2次 |
| 传代比例 | 1:2传代，悬浮部分离心收集（1000RPM，5分钟），贴壁部分消化1-2分钟 |
| 冻存条件 | 90%完全培养基+10%DMSO，液氮储存 |
| 细胞代数 | 10代以内 |
| 倍增时间 | 每周2至3次 |
| 推荐换液 | 2~3次/周 |
| 染色体数目 | 49~52 |
| 保藏机构 | ATCC; CCL-220; BCRC; 60108; ECACC; 87061205；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心 |
培养教程
COLO 320DM细胞培养
传代方法
收集悬浮的COLO 320DM细胞：将培养瓶中的悬浮COLO 320DM细胞收集到离心管中。
润洗COLO 320DM细胞：用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于COLO 320DM细胞贴壁不牢，PBS润洗后细胞会脱落，PBS也要回收到离心管中。
加入0.25%（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟。
在显微镜下观察细胞消化情况，若COLO 320DM细胞大部分变圆并脱落，迅速取出培养瓶，轻敲几下后加入3-4ml含10%FBS的培养基终止消化。
将收集到的悬浮COLO 320DM细胞、PBS清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpm离心5分钟。
弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀。
将细胞悬液按1:2的比例分到新的T25瓶中，添加6-8ml新的完全培养基以保持细胞的生长活力。
后续传代根据实际情况按1:2至1:5的比例进行。
冻存步骤
收集COLO 320DM细胞：按照细胞传代的过程收集消化好的COLO 320DM细胞到离心管中。
计数COLO 320DM细胞：使用血球计数板计数，决定细胞的冻存密度。推荐冻存密度为1×10^6~1×10^7个活细胞/ml。
离心：1000rpm离心3-5分钟，去掉上清。
重悬COLO 320DM细胞：用配制好的细胞冻存液重悬细胞。按每1ml冻存液含1×10^6~1×10^7个活细胞/ml分配到冻存管中。
标记：标注好名称、代数、日期等信息。
降温：将冻存管置于程序降温盒中，在-80℃冰箱中过夜。之后转入液氮容器中储存，并记录好冻存管在液氮容器中的位置。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 11 (ATCC=CCL-220; CCRID; CLS=300153; JCRB=JCRB0225; KCLB=10220; PubMed=25877200; PubMed=25926053) |
| 11,12 (ECACC=87061205) | |
| D2S1338 | 18,25 |
| D3S1358 | 17 |
| D5S818 | 12 |
| D7S820 | 9,12 |
| D8S1179 | 13 |
| D13S317 | 11 |
| D16S539 | 11,12 |
| D18S51 | 15 |
| D19S433 | 15,16.2 (ATCC=CCL-220) |
| 16.2 (CCRID) | |
| D21S11 | 31,33.2 (ATCC=CCL-220; PubMed=25926053) |
| 33.2 (CCRID; CLS=300153; PubMed=25877200) | |
| FGA | 20 |
| Penta D | 9,12 |
| Penta E | 11 (CLS=300153; PubMed=25877200) |
| 11,13 (ATCC=CCL-220) | |
| TH01 | 8,9 (ECACC=87061205) |
| 9 (ATCC=CCL-220; CCRID; CLS=300153; JCRB=JCRB0225; KCLB=10220; PubMed=25877200; PubMed=25926053) | |
| TPOX | 8,9 |
| vWA | 15,18 |
参考文献
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