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货号：STM-CL-5126 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
COLO205细胞系（人结肠癌细胞）
- 来源：结直肠腺癌，腹水转移
- 细胞特征：半贴半悬 ，上皮细胞样
- 培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：COLO 205细胞源自与COLO 201相同患者的组织
COLO 205人结肠癌细胞由T·U·Sample等人于1957年从一名患有结肠癌的70岁白人男性的腹水中分离而建系。取样前，该患者已接受5-氟尿嘧啶治疗4-6周。
COLO205细胞系特性
COLO205细胞是上皮细胞类型，具有超三倍体染色体组，常见的标记染色体包括M1、M2、M4、M5、M6以及其他5条，多数为单体状态。
COLO 205细胞在裸鼠中具有致瘤性，以1×10^7个细胞皮下接种能在21天内形成肿瘤，频率为100% (5/5)。
基因表达包括癌胚抗原（CEA）1.5至4.1ng/10^6细胞/10天，角蛋白，白细胞介素10（IL-10），并且COLO205细胞对角蛋白免疫过氧化物酶染色呈阳性。
COLO 205细胞源自与COLO 201相同患者的组织，表达与GA733-2肿瘤相关抗原相关的36kD细胞表面糖蛋白。
COLO205细胞在CSAp（细胞表面抗原）方面呈阴性反应。
同工酶：ES-D，1-2；G6PD，B；PEP-D，1；PGD，A；PGM1, 1-2；PGM3，1-2
COLO 205细胞表达与GA733-2肿瘤相关抗原相关的36000道尔顿细胞表面糖蛋白。
COLO205细胞系参数表
| 细胞名称 | COLO 205 (人结肠癌细胞) |
| 别称 | Colo 205; CoLo 205; COLO-205; Colo-205; COLO.205; Colo205; COLO205; Co 205 |
| 组织来源 | 70岁男性人结直肠腺癌，腹水转移 |
| 疾病特征 | 结直肠腺癌 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特性 | 半贴壁半悬浮生长 |
| 倍增时间 | 约25-30小时 |
| 致瘤性 | 在裸鼠中具致瘤性（以1×10^7细胞接种，21天内100%裸鼠形成肿瘤） |
| 染色体数目 | 超三倍体，10-11条标记染色体（M1、M2、M4、M5、M6和其他5条） ，多为单体状态 |
| 基因表达 | 癌胚抗原（CEA）1.5至4.1ng/10^6细胞/10天；角蛋白；白细胞介素10（IL-10） ；角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性 |
| 同工酶 | ES-D，1-2；G6PD，B；PEP-D，1；PGD，A；PGM1，1-2；PGM3，1-2 |
| CSAp | 阴性 |
| 表面抗原 | 表达与GA733-2肿瘤相关抗原相关的36kD细胞表面糖蛋白 |
| 背景描述 | COLO 205细胞由T.U.Sample等人于1957年从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水分 离而建系的，该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4-6周；COLO 205细胞角蛋白 免疫过氧化物酶染色阳性 |
| 来源 | 与COLO 201来源于相同患者的组织 |
| 生物安全等级 | BSL-1 |
| 培养基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
| 培养条件 | 气相：95%空气+5% CO₂；温度：37℃ |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 传代周期 | 24-48小时 |
| 传代方法 | 1:2传代，悬浮部分离心收集(1000RPM, 5分钟)，贴壁部分消化2-3分钟 |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO；液氮储存 |
| 质量检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
| 适用研究 | 癌症和毒理学研究，3D细胞培养，高通量筛选，转染宿主 |
| 保藏机构 | ATCC: CCL-222; BCRC: 60054; ECACC: 87061208 |
培养教程
COLO205细胞系培养
传代方法
收集COLO 205细胞的悬浮细胞到离心管中，用不含钙、镁离子的PBS润洗1-2次。由于细胞贴壁不牢，PBS润洗后细胞会脱落，所以PBS也要回收到离心管中。
加入0.25% (w/v) 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中 (T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL)，37℃培养箱中消化1-2分钟。观察COLO 205细胞消化情况，细胞大部分变圆并脱落时加入3-4mL含10%FBS的培养基终止消化。
将悬浮细胞、PBS清洗液中的COLO 205细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpm离心5分钟，弃去上清。补加1-2mL培养液重悬混匀，按1:2的比例分到新T25瓶中，添加6-8mL完全培养基。
传代比例推荐1:2到1:5，每2-3天换液。
细胞冻存
冻存液: 55%基础培养基 + 40%FBS + 5%DMSO
将COLO 205细胞按上述配方制备冻存液，置于液氮中储存。
细胞复苏
解冻：在37°C水浴中轻柔摇动解冻COLO 205细胞，约2分钟。取出后用70%乙醇消毒。
移液：将COLO 205细胞移入含9mL完全培养基的离心管中，以约125 x g离心5-7分钟。
重悬：将COLO 205细胞重悬于推荐的完全培养基中，避免培养基碱化。建议在加入COLO 205细胞前将培养基在培养箱中放置至少15分钟以达到正常pH（7.0-7.6）。
培养：37°C培养箱中培养，推荐5% CO₂环境。
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STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 11,12 |
| D2S1338 | 17,18 |
| D3S1358 | 16 |
| D5S818 | 10,13 |
| D7S820 | 9,10 |
| D8S1179 | 9 (PubMed=19372543) |
| 9,14 (ATCC=CCL-222; CCRID; CLS=300380; PubMed=25877200) | |
| D13S317 | 10,12 |
| D16S539 | 12,13 |
| D18S51 | 18 |
| D19S433 | 13,14 |
| D21S11 | 30.2 (PubMed=19372543) |
| 30.2,33.2 (ATCC=CCL-222; CCRID; CLS=300380; PubMed=25877200; PubMed=25926053) | |
| FGA | 21,23 |
| Penta D | 9,11 |
| Penta E | 13,15 |
| TH01 | 8,9 |
| TPOX | 11 |
| vWA | 15 |