NCI-H508细胞（人结肠直肠腺癌细胞） （暂不提供）

NCI-H508细胞系源自一名55岁的白人男性结直肠腺癌患者的盲肠腹壁转移组织，患者曾接受5-氟尿嘧啶治疗。
NCI-H508细胞胞具有以下特征：模态数为102，范围在71到131之间，大多数细胞患有糖尿病。

NCI-H508细胞具有以下分子特征、表达特征和基因特征

• 致瘤性：在裸小鼠中，接种107个细胞的裸鼠在21天内以100%的频率（5/5）出现肿瘤。

• 抗原表达：表达A型血和Rh+血型，CA19-9抗原。

• 基因表达：癌胚抗原（CEA）表达为1709 ng/mL/10^6细胞/10天。

• 同工酶：AK-1为1，ES-D为1，G6PD为B型，GLO-I为2，Me-2为1，PGM1为1，PGM3为1。

• 其他特征：NCI-H508细胞包含多巴脱羧酶和CEA，但不表达TAG-72抗原。

NCI-H508细胞参数表

NCI-H508人结肠直肠腺癌细胞培养教程

NCI-H508细胞复苏

• 从液氮中取出NCI-H508细胞冻存管，迅速置于37℃水浴中解冻。

• 将NCI-H508细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。

• 以1000 RPM离心4分钟，弃去上清。

• 用新鲜培养基重悬NCI-H508细胞，转移到培养瓶中。

日常培养

• 每2-3天更换一次培养基。

• 观察NCI-H508细胞生长状态，保持细胞密度在适当范围内。

NCI-H508细胞传代步骤

• 当NCI-H508细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗NCI-H508细胞1-2次。

• 加入2 ml 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液。

• 置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

• 显微镜下观察NCI-H508细胞，大部分变圆并脱落时，加入少量培养基终止消化。

• 补加培养基至6-8 ml，轻轻打匀。

• 以1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。

• 用1-2 ml新鲜培养基重悬NCI-H508细胞。

• 按1:2到1:4的比例将NCI-H508细胞分配到新的培养瓶中。

NCI-H508细胞冻存

• 用PBS清洗NCI-H508细胞后，加入1 ml胰酶消化。

• NCI-H508细胞脱落后，加入1 ml含血清的培养基终止消化。

• 以1000 RPM离心4分钟，弃去上清。

• 用1 ml血清重悬NCI-H508细胞，加入适量血清和DMSO（终浓度5%）。

• 调整NCI-H508细胞密度至少1x10^6/ml。

• 将NCI-H508细胞悬液分装到冻存管中，每管1 ml。

• 使用程序降温盒，将NCI-H508细胞冻存管置于-80℃冰箱至少2小时。

• 最后转移到液氮中长期保存。

注意事项

• 定期检查NCI-H508细胞形态和生长状态。

• 保持无菌操作，预防污染。

• NCI-H508细胞代数不宜过高，建议在10代以内使用。

• 定期进行支原体检测。

补充说明

• NCI-H508细胞在不同实验条件下的表现：

• 在标准培养条件下（37℃，5% CO2，RPMI-1640 + 10% FBS），NCI-H508细胞生长良好，倍增时间约为32小时。

• 对某些化疗药物（如5-氟尿嘧啶）可能表现出一定的耐药性。

• 在三维培养条件下可能形成类器官结构。

• 作为转移性癌细胞，在侵袭和迁移实验中可能表现出较强的能力。

  
  

• NCI-H508细胞冻存注意事项：

• 使用完全培养基加5% DMSO作为冻存介质。

• NCI-H508细胞密度不应低于1x10^6/ml。

• 冻存过程应缓慢进行，使用程序降温盒。

  
  

• NCI-H508细胞传代步骤所需时间：

• 消化时间：1-2分钟。

• 离心时间：4分钟。

• 其他操作（如PBS清洗、加培养基、分装等）：约10-15分钟。

• 整个NCI-H508细胞传代过程大约需要20-30分钟。