
SW48细胞系(人结肠腺癌细胞系)
- 来源:结肠
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S,空气,100%, 温度:37℃
- 其他:SW48细胞通过免疫过氧化物酶染色,角蛋白呈阳性。
SW48细胞系是一种来源于人类结肠腺癌的细胞,最初从一名82天大的白人女性四级Dukes C结直肠癌患者的大肠组织中分离。SW48细胞系适合作为转染宿主。
SW48细胞系特性特征
致瘤性:SW48细胞在裸小鼠身上具有致瘤性,皮下接种10^7个细胞的裸鼠在21天内以100%的频率(5/5)出现肿瘤。
抗原表达:HLA-A32、A33、B27、B35;AB型血;Rh+
癌胚抗原(CEA):0.6 ng/10^6个细胞/10天。
角蛋白:SW48细胞通过免疫过氧化物酶染色,角蛋白呈阳性。
同工酶:ES-D,1;G6PD,B;PEP-D,1;PGD,A;PGM1,1;PGM3,1-2
SW48细胞CSAp阴性(CSAp-)。
KRAS突变:SW48细胞具有KRAS基因突变
SW48细胞系参数表
细胞名称 | SW48细胞系(人结肠腺癌细胞系) |
来源 | 82天大白人女性四级Dukes C结直肠癌患者的大肠组织 |
细胞类型 | 人结肠腺癌细胞系 |
形态 | 多边形或长条形,15-30微米,胞质丰富,核大而圆,核仁明显 |
生长特性 | 贴壁生长,生长迅速,传代周期约为24-48小时 |
侵袭转移特性 | 具有较强的侵袭和转移能力,可通过Transwell小室实验等方法检测其侵袭和转移能力 |
基础培养基 | Leibovitz's L-15培养基(首选)或DMEM |
血清要求 | 10%胎牛血清(FBS) |
培养条件 | 37°C,无需CO2(L-15培养基);37°C,5% CO2(DMEM培养基) |
传代周期 | 24-48小时,传代比例1:2至1:4 |
换液频率 | 每2-3天 |
冻存条件 | 60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO,液氮储存 |
致瘤性 | 在裸小鼠中致瘤(21天内100%频率) |
抗原表达 | HLA-A32、A33、B27、B35;AB型血;Rh+ |
基因表达 | 癌胚抗原(CEA)0.6ng/10^6个细胞/10天;角蛋白阳性 |
同工酶 | ES-D,1; G6PD,B; PEP-D,1; PGD,A; PGM1,1; PGM3,1-2 |
特殊标记 | CSAp阴性(CSAp-) |
基因特征 | KRAS突变 |
应用 | 结肠癌研究,药物筛选,治疗策略开发,基因表达研究 |
运输方式 | 活细胞:常温运输;冻存管:干冰运输 |
储存温度 | 活细胞:培养箱;冻存管:液氮罐 |
生物安全等级 | 1 |
供应限制 | 仅供科研使用 |
培养教程
SW48人结肠腺癌细胞系培养教程
SW48细胞复苏步骤
在37℃水浴中迅速解冻含1 mL SW48细胞悬液的冻存管,轻轻摇晃。
解冻后立即加入4 mL培养基,混合均匀。
在1000 rpm条件下离心3分钟,弃去上清液。
加入1-2 mL培养基,轻轻吹打混匀。
将所有SW48细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶或10 cm培养皿中,过夜培养。
第二天换液并检查SW48细胞密度。
SW48细胞传代步骤
当SW48细胞密度达到80%-90%时,即可进行传代。
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗SW48细胞1-2次。
加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液,覆盖所有SW48细胞,弃去多余溶液,置于37℃培养箱中消化1分钟。
在显微镜下观察SW48细胞消化情况,SW48细胞变圆并脱落时,立即停止消化,加入少量培养基终止反应。
按每瓶6-8 mL补加培养基,混匀后装入无菌离心管,1000 rpm离心4分钟,弃去上清液,补加1-2 mL培养基吹匀。
按1:2比例将SW48细胞悬液分到新皿或瓶中,加入8 mL培养基,置于培养箱中培养。
SW48细胞冻存步骤
在SW48细胞生长良好时进行冻存。
收集SW48细胞及培养液,装入无菌离心管,1000 rpm离心4分钟,弃去上清液。
加入适量冻存液于SW48细胞沉淀中,轻轻吹打混匀。
将SW48细胞悬液分装到冻存管中,每管1 mL。
逐步降温至-80℃,然后转移至液氮罐中长期保存。
污染防控注意事项
SW48细胞培养过程中可能出现黑色颗粒或小黑点,应密切关注。
如果小黑点有增殖趋势,可能是污染,需要及时处理。
如果小黑点没有增殖趋势,且不影响SW48细胞生长和实验,可能是SW48细胞碎片或血清中的沉淀物。
培养基选择:
推荐使用Leibovitz's L-15培养基,不可通入二氧化碳,否则会产生细胞毒性。
如无无二氧化碳培养箱,可使用DMEM培养基,此时需通入5%二氧化碳。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,10 |
D2S1338 | 19,26,27 |
D3S1358 | 13,14,15 |
D5S818 | 10,14 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 13,14 (ATCC=CCL-231) |
13,14,15 (PubMed=25877200) | |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 28,31 |
FGA | 20 |
Penta D | 10 |
Penta E | 12,13 (PubMed=25877200) |
12,13,14 (ATCC=CCL-231) | |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 18,19,20,21 (ATCC=CCL-231) |
18,20 (Cosmic-CLP=909751; ECACC=89012702; PubMed=25877200; PubMed=25926053) | |
18,20,21 (AddexBio=C0009014/373) | |
参考文献
- 短链脂肪酸盐丁酸钠抑制人结肠癌细胞SW620增殖及其机制的实验研究 《苏州大学》 2010年
- 摘要:...的:研究短链脂肪酸盐丁酸钠对体外培养的人结肠癌细胞SW620增殖抑制的影响,并探讨其...
- 吉西他滨耐药的胰腺癌SW1990细胞株的建立及相关特性检测 《安徽医科大学学报》 2015年04期
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- Tetraspanin-8慢病毒载体及氯硝柳胺对结肠癌SW480细胞的影响 《武汉大学》 2015年
- 摘要:第一部分Tetraspanin-8慢病毒载体对SW480细胞生物学功能影响的研究目的:探讨...
- 结肠癌不同转移潜能细胞株SW620及SW480的代谢组学研究 《温州医科大学学报》 2019年04期
- 摘要:...关系。方法:利用~1H NMR技术,采用PLS-DA模型分析高转移潜能SW620和低...
- microRNA-622调控DYRK2在结肠癌中表达并促进结肠癌细胞SW1116侵袭转移 《重庆医学》 2018年17期
- 摘要:目的探讨微小RNA622(microRNA-622,miR-622)及双重特异性酪氨酸调节...
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