
NCIH1993细胞(人非小细胞肺癌腺癌细胞)
- 来源:肺
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:NCI-H1993细胞系通常携带与肺腺癌相关的基因突变,如EGFR突变
NCI-H1993细胞系源自一名47岁白人女性患者,被诊断为3A期非小细胞肺癌(腺癌)。这些细胞是从患者的肺组织中提取并培养的,具有典型的上皮形态特征。患者有显著的吸烟历史,具体为30包年,并伴有淋巴结转移。这些特征使NCI-H1993细胞系在癌症研究中,特别是在非小细胞肺癌领域,成为一个重要的实验模型。
NCIH1993细胞系由美国国家癌症研究所(NCI)的AF Gazdar和JD Minna团队从患者的肺组织中提取,形成了一种稳定的细胞株。在体外培养条件下,这些细胞表现出良好的生长能力,特征为贴壁生长,并保持上皮样的形态。
NCIH1993细胞还携带与肺腺癌相关的基因突变,例如EGFR突变,使其成为研究靶向治疗的理想模型。NCI-H1993细胞系对多种化疗药物和靶向药物具有一定的敏感性,因而在新药的疗效评估方面具有重要的应用潜力。
NCIH1993细胞参数表
细胞名称 | NCIH1993细胞(人非小细胞肺癌腺癌细胞) |
别称 | H1993; H-1993; NCIH1993 |
种属来源 | 人 |
年龄性别 | 47岁,女性 |
组织来源 | 肺 |
疾病特征 | 非小细胞肺癌(腺癌),3A期 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景简介 | 来源于吸烟者,具有淋巴结转移 |
生物安全等级 | 1 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管包装 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | DMEM或1640培养基 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 温度:37°C;气相:95%空气 + 5%二氧化碳 |
传代方法 | 1:2至1:6,每周传代2次 |
倍增时间 | ~24-30小时 |
冻存条件 | 冻存液:55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;温度:液氮 |
分子特征 | 常见EGFR突变 |
应用领域 | 药物开发、基础研究、生物标志物筛选 |
注意事项 | 在传代过程中,使用不含Ca++/Mg++的PBS或胰蛋白酶-EDTA溶液短暂冲洗细胞层,以去除血清痕迹。 |
解冻后的细胞应立即转移至含有完全生长培养基的离心管中,并适当重悬后分装至新的培养瓶中。 |
培养教程
NCIH1993人非小细胞肺癌腺癌细胞培养教程
细胞复苏
确保所有操作在无菌环境中进行,以防止污染。
配制完全培养基,推荐使用DMEM或1640培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素(P/S)。
将冻存管中的1 mL NCI-H1993细胞悬液置于37°C水浴中快速解冻,约2-3分钟,期间轻轻摇晃以确保均匀解冻。
解冻后立即用70%乙醇消毒冻存管外部。
将解冻的NCI-H1993细胞转移至含9 mL完全培养基的离心管,125 x g离心5-7分钟。
弃去上清液,加入1-2 mL完全培养基,轻轻重悬细胞沉淀。
将NCI-H1993细胞悬液转移至T25或T75培养瓶中,放入37°C、5% CO₂培养箱中培养过夜。
细胞培养
培养基:使用DMEM或1640培养基,添加10% FBS和1% P/S。
培养条件:37°C,气相95%空气和5%二氧化碳。
换液频率:每2-3天更换一次培养基,以维持NCI-H1993细胞的最佳生长环境。
细胞传代
使用显微镜观察细胞的生长状态,通常在细胞密度达到80%-90%时进行传代。
吸出原培养瓶中的培养基,使用不含Ca²⁺/Mg²⁺的PBS缓冲液冲洗NCI-H1993细胞两次。
加入2-3 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,轻轻摇晃以确保均匀分布,观察细胞边缘收缩且开始松动(通常需要5-15分钟)。
添加6-8 mL完全培养基以终止消化反应,并轻轻吹打使细胞层分散。
将部分NCI-H1993细胞悬液转移至新的培养瓶,加入适量的完全培养基并均匀混合。
根据实验需求选择传代比例,通常为1:2至1:6。
细胞冻存
配制冻存液,使用55%基础培养基、40% FBS和5%二甲基亚砜(DMSO)
收集并重悬适量的NCI-H1993细胞(通常约1×10^6 cells/mL)在冻存液中。
将细胞悬液分装至1 mL冻存管中。
在-80°C冰箱中冷冻24小时后,将其转移至液氮气相中以进行长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X (ATCC=CRL-5909; Cosmic-CLP=908476; PubMed=25877200) |
X,Y (PubMed=20679594) | |
CSF1PO | 10,13 |
D2S1338 | 17,23 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 12,14 (ATCC=CRL-5909) |
14 (PubMed=25877200) | |
D13S317 | 13 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 13,18 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 29 |
FGA | 22,23 |
Penta D | 10 |
Penta E | 12 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 9 |
vWA | 17 |