
NCI-H23细胞(人非小细胞肺癌细胞)
- 来源:肺
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:NCI-H23细胞系在患者接受治疗之前获得,保留了原发性肿瘤的特征
NCI-H23细胞系源自一名51岁的黑人男性非小细胞肺癌患者的肺部腺癌组织。NCI-H23细胞系在患者接受治疗之前获得,保留了原发性肿瘤的特征。
NCI-H23细胞特征、特性
NCI-H23细胞是一种人非小细胞肺癌细胞,具体为腺癌亚型。
NCI-H23细胞贴壁生长,形态呈上皮细胞样
基因表达涉及C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras和N-ras RNAs。
免疫组化特征包括角蛋白5、8、18的阳性表达,波形蛋白的阳性。
NCI-H23细胞携带K-ras基因的第12号密码子突变,p53基因在246位密码子处有突变(ATC→ATG)
蛋白表达:表达PDGF(血小板衍生生长因子)A链和B链的mRNA、表达TGFα(转化生长因子α)、TGFβ和EGFR(表皮生长因子受体)
NCI-H23细胞在软琼脂中形成克隆的效率约为9.7%
左旋多巴脱氢酶(L-dopa decarboxylase)呈阴性、神经丝蛋白呈阴性
NCI-H23细胞参数表
细胞名称 | NCI-H23细胞(人非小细胞肺癌细胞) |
细胞别名 | NCI-H23 / H23 / CRL-5800 |
细胞类型 | 人非小细胞肺癌细胞(腺癌) |
来源/组织 | 51岁黑人男性肺癌患者,肺部肿瘤组织(治疗前) |
ATCC编号 | CRL-5800 |
建立年份 | 约1980年代 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
培养基/血清/抗生素 | RPMI 1640 / 10% FBS / 1% 青霉素-链霉素 |
培养环境 | 37℃ / 5% CO2 / 饱和湿度 |
传代比例 | 1:2 至 1:3 |
传代频率 | 约每周3次 |
换液周期 | 3-4天 |
细胞密度 | 保持在70-80%汇合度 |
细胞消化 | 0.25% 胰蛋白酶-EDTA,37℃ 5分钟 |
物种 | 人(Homo sapiens) |
基因突变 | K-ras(第12密码子), p53(246位密码子,ATC→ATG) |
软琼脂克隆效率 | 9.70% |
群体倍增时间 | 约30-40小时(需验证) |
致瘤性 | 在免疫缺陷小鼠中可形成肿瘤 |
研究用途 | 药物筛选、信号通路研究、基因功能研究、肿瘤微环境研究 |
温度/冻存介质 | -80℃(短期)或液氮(长期)/ 90%完全培养基+10% DMSO |
生物安全等级 | BSL-1 |
培养教程
NCI-H23人非小细胞肺癌细胞培养教程
NCI-H23细胞复苏
将冻存细胞从液氮中快速取出,放置于37℃水浴中解冻。
解冻后立即将细胞悬液转移至含有15mL预热完全培养基的50mL离心管中。
以800rpm离心5分钟,弃去上清液。
加入5mL新鲜完全培养基重悬细胞。
将细胞悬液转移至25cm²培养瓶中,置于37℃、5% CO2培养箱中培养。
NCI-H23细胞日常培养
培养温度:37℃,CO2浓度:5%,湿度:饱和湿度。
每3-4天更换一次培养基,保持细胞密度在70-80%的汇合度。
NCI-H23细胞传代
当细胞密度达到80-90%时进行传代。
弃去旧培养基,用PBS轻轻清洗细胞1-2次。
加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃孵育5分钟。
在显微镜下观察细胞脱落情况。
加入等体积完全培养基终止消化,以800rpm离心5分钟。
弃去上清,用新鲜完全培养基重悬细胞。
按1:2或1:3的比例将细胞接种到新的培养瓶中。
NCI-H23细胞冻存
准备冻存液:90%完全培养基 + 10% DMSO。
收集对数生长期的细胞,以800rpm离心5分钟。
用预冷的冻存液重悬细胞,调整密度至1-2×10⁶/mL。
将细胞悬液分装到冻存管中,每管1mL。
将冻存管置于-80℃冰箱中,24小时后转移到液氮中长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 18,23 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 12 (PubMed=25877200) |
12,13 (AddexBio=C0016005/4861; ATCC=CRL-5800; Cosmic-CLP=905942; KCLB=90023; PubMed=19372543) | |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 15 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,11 (Cosmic-CLP=905942; PubMed=19372543; PubMed=25877200) |
11 (AddexBio=C0016005/4861; ATCC=CRL-5800) | |
D18S51 | 14,16 |
D19S433 | 12,14 |
D21S11 | 30 |
FGA | 24 |
Penta D | 8 |
Penta E | 7,17 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,17 |
