
NCIH226细胞(人肺鳞癌细胞)
- 来源:肺;源自转移部位:胸腔积液
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
NCI-H226细胞系是一种源自男性肺部鳞状细胞癌患者(转移来自:胸腔积液)的上皮形态细胞,于1980年首次分离并建立。
NCIH226细胞模态数=47;范围=32-88;del(p25),是由AF Gazdar和JD Minna保存和推广。
NCIH226细胞参数表
细胞名称 | NCIH226细胞(人肺鳞癌细胞) |
别名 | NCI.H226; NCI H226; H226; H-226; HUT-226; HUT 226; NCIH226 |
建立时间 / 性别 | 1980年 / 男性 |
组织来源 | 肺;源自转移部位:胸腔积液 |
细胞类型 / 形态 | 肿瘤细胞(肺鳞癌)/ 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | 1级 |
完全培养基配方 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37°C,95%空气 + 5%CO2,70%-80%湿度 |
传代比例 | 1:3 至 1:4 |
消化时间 | 2~3分钟 |
换液频次 | 2~3次/周 |
倍增时间 | ~60 hours |
冻存液配方 | 方案1:90%血清 + 10% DMSO |
方案2:55%基础培养基 + 40%FBS + 5%DMSO | |
储存温度 | 液氮 |
STR鉴定 | 已完成,结果正确 |
支原体检测 | 阴性 |
细胞活力 / 纯度 | ≥85% / ≥98% |
消化酶 / 离心条件 | 0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA)/ 1200rpm/min,3分钟 |
首次传代建议 | T25培养瓶1:2传代 |
运输方式 | 冻存细胞:干冰运输;活细胞:常温发货(T25瓶) |
保存方式 | 短期:-80°C冰箱(过夜);长期:液氮 |
水浴温度 / 离心条件 | 37°C / 1000RPM,3-5分钟 |
培养箱放置时间 | 2-3小时 |
观察密度和处理 | <60%:更换培养基;70%-80%以上:可传代 |
培养教程
NCIH226人肺鳞癌细胞培养教程
细胞复苏
将冻存管在37°C水浴中快速解冻。
将 NCI-H226 细胞悬液转移到含有4-6mL完全培养基的离心管中。
以1000RPM离心3-5分钟,弃去上清液。
用适量完全培养基重悬细胞并转移到培养瓶中。
日常培养
每2-3天更换一次培养基。
观察 NCI-H226 细胞生长状态和培养基颜色变化。
细胞传代
当 NCI-H226 细胞密度达到80-90%时进行传代。
推荐传代比例为1:3至1:5。
传代步骤
吸出原培养液。
用2mL PBS轻轻润洗细胞,吸出PBS。
加入1mL 0.25% 胰蛋白酶溶液(含EDTA),37°C孵育2-3分钟,观察细胞变圆有间隙。
加入3mL 含血清的培养基终止消化。
吹打细胞使其脱壁并形成单细胞悬浮液。
以1200rpm离心3分钟,弃去上清液。
加入新鲜培养基重悬细胞,并按传代比例接种到新培养瓶中。
细胞冻存
冻存液配方: 80% 完全培养基 + 10% FBS + 10% DMSO。
将 NCI-H226 细胞悬液分装到冻存管中。
使用程序降温盒或-80°C冰箱缓慢降温。
24小时后转移到液氮中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D2S441 | 14 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,12 |
D6S1043 | 13,18 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 14,15 |
D12S391 | 22 |
D13S317 | 13,14 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 16 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 20,23 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 12,15 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 8 (PubMed=19372543) |
8,11 (AddexBio=C0016011/4916; ATCC=CRL-5826; CCRID; Cosmic-CLP=905941; PubMed=25877200) | |
vWA | 17 |
