ncih522细胞（人非小细胞肺癌细胞）

NCI-H522细胞系是一种来自人类非小细胞肺癌（NSCLC）的细胞系，来源于一名58岁的白人男性肺腺癌患者，该患者有吸烟史（60包年），ncih522细胞系在其未接受治疗前从肺部分离。ncih522细胞系由A.F. Gazdar、H.K. Oie、J.D. Minna及其同事建立，是研究肺腺癌的重要工具，特别是在吸烟相关的肺癌研究。

NCI-H522是亚二倍体细胞系，模态染色体数为53，68%的细胞中存在模态染色体。该细胞系多倍体细胞占3.0%，具有11条标记染色体，其中2条成对。这些标记物包括der(6)(q13)、t(7p17q)、del(10)(p11.23)、成对的der(7)t(7;?17)(p22;?q21.1)和der(16)t(16;?)(q24;?)，以及其他六个标记。同时，缺失的染色体包括正常的Y、N13、N15和N16染色体，而X染色体大多成对。

ncih522细胞基因和蛋白表达特征

• 基因突变：携带TP53基因密码子191的突变

• 蛋白合成缺陷：不能合成肽神经调节蛋白B (NMB)、不能合成胃泌素释放肽 (GRP)

• 蛋白表达：角蛋白染色呈阳性、波形蛋白染色呈阳性、神经丝三联体蛋白染色呈阴性

ncih522细胞参数表

ncih522人非小细胞肺癌细胞培养教程

ncih522细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的ncih522细胞，在37℃水浴中快速解冻（约1-2分钟）。

• 将ncih522细胞悬液迅速转移至含有10 mL预热完全培养基的离心管中。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜完全培养基重悬ncih522细胞，确保混匀。

ncih522细胞接种

• 将重悬的ncih522细胞悬液转移至T25培养瓶中。

• 添加6-8 mL完全培养基，轻轻摇晃培养瓶，使ncih522细胞均匀分布。

• 静置培养2-4小时，让ncih522细胞稳定附着。

ncih522细胞传代

• 当ncih522细胞密度达到80-90%时进行传代。

• 用PBS轻轻洗涤ncih522细胞1-2次以去除残余培养基。

• 加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃孵育2-3分钟。

• 轻轻拍打培养瓶，观察ncih522细胞是否脱落。

• 加入等量完全培养基终止胰酶消化。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜完全培养基重悬ncih522细胞。

• 按1:2比例将ncih522细胞分装到新的培养瓶中。

ncih522细胞冻存

• 准备细胞冻存液（10% DMSO + 90% FBS）。

• 收集对数生长期的ncih522细胞。

• 将ncih522细胞悬浮在冻存液中，每毫升含约1-2×10^6个细胞。

• 将ncih522细胞悬液分装到冻存管中。

• 使用程序降温盒，将ncih522细胞缓慢降温至-80℃。

• 24小时后转移至液氮中长期保存。

注意事项

• 无菌操作：所有操作需在生物安全柜中进行，保持无菌环境。

• ncih522细胞状态监测：定期检查ncih522细胞形态和密度，避免过度生长。

• 污染防控：注意细菌、真菌或支原体污染，必要时使用抗生素处理。

• 传代管理：避免传代次数过多，以保持ncih522细胞特性。

常见问题及解决方案

• ncih522细胞生长缓慢：

• 检查培养基成分，确保合适。

• 增加接种密度。

• 使用低代次ncih522细胞。

  
  

• ncih522细胞污染：

• 严格执行无菌操作。

• 定期检查ncih522细胞状态，及时处理污染。

  
  

• ncih522细胞贴壁不良：

• 控制胰酶消化时间和力度。

• 确保ncih522细胞完整性，避免过度消化。

  
  

• ncih522细胞形态改变：

• 定期更换低代次ncih522细胞，观察形态变化。

  
  

• 冻存和复苏问题：

• 使用合适的冻存液和程序降温方法，确保ncih522细胞存活率。