NCI-H82细胞（人小细胞肺癌细胞）

NCI-H82人小细胞肺癌细胞系是一种上皮样细胞系，于1978年由A.F. Gazdar及其同事从一名40岁白人男性肺癌患者的胸腔积液中分离；来源于转移部位、胸腔积液。NCI-H82细胞系常用于癌症研究，特别是小细胞肺癌。

NCI-H82细胞系具有接近三倍体的染色体数目，模式染色体数目为58，发生率为44%，多倍体为3%。在核型分析中，可以识别出两个不同的亚群，其中常见的标记染色体有der（1）t（1；709p13；p11）、t（13q；HSR；15q）和der（190t（19；？）（q13.4；？）。一个亚群具有der（3）t（3；20）（p11；p11？）、t（3q19p）、i（7q）和一个来源不明的微小染色体；另一个亚群则有t（1q17p）、del（1）（q21）、der（3）t（3；7）（p12；q11）加上另外两个标记。每个细胞都有两个正常的X染色体拷贝，但未检测到Y染色体。

NCI-H82细胞具备以下特性特征

分子特征

• 表达神经元特异性烯醇酶和肌酸激酶的脑同工酶

• 产生大小异常的p53 mRNA (3.7 kb)

• C-myc DNA序列扩增约25倍，c-myc RNA比正常细胞增加24倍

• 表达功能性ANP受体，但用ANP治疗不会改变它们的生长模式。

• 神经丝和波形蛋白染色呈阳性

表达特征

• 表达v-fes, v-fms, Ha-ras, Ki-ras, N-ras和c-raf 1 mRNA

• 表达胰岛素样生长因子II (IGF-II)和心钠素

• L-DOPA脱羧酶或蛙皮素的表达量未达到可检测水平

其他特征

• 来源：40岁白人男性肺癌患者的胸腔积液（转移灶）

• 形态学：原始肿瘤的形态不符合典型小细胞肺癌特征

• 生化和形态学上是SCLC的变种

• 致瘤性：在裸小鼠身上可致瘤

• 转移性：来源于胸腔积液，表明具有转移能力

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1；Me-2，1；PGM1，1-2；PGM3，1-2
  

NCI-H82细胞参数表

NCI-H82人小细胞肺癌细胞培养教程

NCI-H82细胞解冻步骤

• 将冻存的NCI-H82细胞从液氮中取出，迅速放入37°C水浴中解冻。

• 解冻后，将NCI-H82细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜培养基重悬NCI-H82细胞，转移到培养瓶中。

NCI-H82细胞传代步骤

• 当NCI-H82细胞密度达到80-90%时进行传代。

• 用PBS轻轻洗涤NCI-H82细胞。

• 加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-3分钟。

• 加入等量含血清的培养基终止消化。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜培养基重悬NCI-H82细胞，按1:2或1:3的比例进行传代。

NCI-H82细胞培养注意事项

• 操作时保持无菌环境，避免污染。

• 培养基含有血清和抗生素，通常无需额外添加。

• 避免将培养基长时间放置于室温或高温环境。

• 培养基解冻后可能出现少量絮状物，不影响使用。

• 所有操作应在有效期内完成。

NCI-H82细胞储存条件

• 培养基：2℃-8℃避光储存。

• NCI-H82细胞：液氮中长期保存。

NCI-H82细胞关键培养参数

• 培养基：使用NCI-H82细胞专用培养基，成分为RPMI 1640 + 10% FBS + 青霉素/链霉素 + 1%谷氨酰胺 + 1%丙酮酸钠。

• pH值：需要维持在7.2-7.4之间。

• 温度：37°C。

• CO2浓度：5%。

• NCI-H82细胞密度：保持在约2x10^6 cells/mL。

• 无菌环境：需要严格控制以避免污染。

NCI-H82细胞生长速度和传代频率

• 传代频率：当NCI-H82细胞密度达到80-90%时进行传代，通常需要2-3天。

• 换液频率：每2-3天更换一次培养基，反映了NCI-H82细胞的生长速度。

• 生长特性：NCI-H82细胞为贴壁和悬浮混合生长。

• 细胞代数：商业购买的NCI-H82细胞通常在三代内，说明这些细胞可以稳定传代。