
NCI-H647人肺癌细胞
- 来源:肺腺癌,非小细胞肺癌;转移部位:胸腔积液
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
- 其他:NCI-H647细胞能够产生人绒毛膜促性腺激素(hCG)的β亚单位以及肿瘤相关抗原
NCI-H647细胞系是从一名56岁不吸烟的白人男性患者(患有3A期腺鳞癌,曾接受放射治疗)的肺癌组织中分离的。NCI-H647细胞来源于转移性胸腔积液。具备大细胞肺癌的特征,包括快速生长以及在免疫功能低下小鼠体内形成肿瘤的能力。
NCI-H647细胞模态数为89,范围在74至176之间,并表现出t(3p14;11p15)染色体易位。
NCI-H647人肺癌细胞特性
NCI-H647细胞系具备上皮样形态特征,贴壁生长,通常在3天内即可长满培养瓶。
NCI-H647细胞能够产生人绒毛膜促性腺激素(hCG)的β亚单位以及肿瘤相关抗原。
NCI-H647人肺癌细胞参数表
细胞名称 | NCI-H647人肺癌细胞 |
细胞别称 | NCI-H647人肺癌细胞、 H647、H-647、H647ell、NCIH647 |
细胞来源 | 肺;转移部位:胸腔积液;1983年10月建系 |
患者信息 | 人 / 男 / 56岁 |
疾病类型 | 3A期,腺鳞癌;非小细胞肺癌 |
生物安全等级 | BSL1 |
形态生长特性 | 上皮细胞样 / 贴壁生长 |
培养条件 | 95%空气,5%二氧化碳;37℃ |
倍增时间 | 约3天 |
培养基 | RPMI-1640+10% FBS+1%P/S |
传代换液频率 | 1:3-1:6 ;每周2次 |
保存条件 | 低温避光; 1×10^6 cells/T25培养瓶 |
保藏机构 | ATCC |
供应限制 | 仅供科研使用 |
特殊特征 | 细胞捐赠者不吸烟 |
产生物质 | 人绒毛膜促性腺激素(hCG)β亚单位、肿瘤相关抗原 |
初始检查 | 收到后检查是否漏液,如有请拍照反馈 |
初始培养 | 显微镜下确认生长状态,去封口膜,37℃培养2-3h |
培养液处理 | 弃去原培养液,换新鲜完全培养基 |
培养教程
NCI-H647人肺癌细胞培养教程
NCI-H647细胞接收与处理
收到NCI-H647细胞后,检查培养瓶是否有漏液情况,如有,拍照并联系供应商。
在显微镜下观察NCI-H647细胞生长状态。
去除培养瓶的封口膜,将T25瓶置于37°C培养箱中静置2-3小时,以稳定NCI-H647细胞状态。
换培养液:弃去运输中的原培养液,换上新鲜的完全培养基。
NCI-H647细胞传代
传代时机:当NCI-H647细胞密度达到80-90%时进行传代。
消化处理:使用胰蛋白酶消化液处理NCI-H647细胞3-5分钟,观察消化程度。
传代比例:通常为1:3到1:6。
换液频率
每周更换培养液2次,根据NCI-H647细胞生长状况进行调整。
观察与记录
显微镜观察:定期使用显微镜观察NCI-H647细胞形态和生长状况,拍照并记录。
记录状态:建议在NCI-H647细胞传代培养后定期拍照,记录细胞生长状态,便于后续研究。
冻存
冻存条件:当需要长期保存NCI-H647细胞时,以1×10^6 cells/ml的密度将细胞冻存在液氮中。
注意事项
无菌操作:在所有操作过程中保持无菌环境,避免NCI-H647细胞污染。
污染检查:定期检查NCI-H647细胞是否有细菌、真菌或支原体污染,使用经过过滤的培养基和试剂。
细胞状态监测:观察NCI-H647细胞形态是否正常,细胞边缘应清晰且透亮。
传代操作:确保适当浓度的胰蛋白酶使用,避免过度消化,传代比例合适。
常见问题及解决方法
细胞污染:严格无菌操作,定期检测支原体,使用经过过滤的培养基和试剂。
细胞生长缓慢或停滞:确保使用NCI-H647细胞专用培养基,定期更换新鲜培养基,检查培养箱的温度和CO2浓度。
细胞形态异常:确保消化时间适中,传代比例合适,避免NCI-H647细胞过度密集或稀疏。
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STR鉴定及相关
Markers: | |
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 17,25 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 9,11 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 12,15 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 28,32.2 |
FGA | 22,24 |
Penta D | 12,13 |
Penta E | 7 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 17 |
参考文献
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