NCI-H661人大细胞肺癌细胞

NCI-H661是1982年来自一名43岁白人男性大细胞肺癌患者的淋巴结中建立的人大细胞肺癌细胞系，可用于癌症研究。

NCI-H661细胞为超六倍体，具有模态数142，范围在130到153之间。每个细胞有70多条标记染色体，包括t(1p10q)、del(1)(q11/q12)、6q+、2q+、der(20)t(12;20)(q11;q13)，其中一些标记物在每个细胞中存在2到3个拷贝。大多数细胞也有5到10个微染色体（稳心样）。结构正常的N2、N4和N9染色体缺失，同时存在两个拷贝的X染色体和多个拷贝的Y染色体。

NCI-H661细胞具有以下特性和特征

NCI-H661细胞分子特征

• 角蛋白和波形蛋白纤维染色呈阳性

• 神经丝三联体蛋白染色呈阴性

• p53 mRNA表达水平明显高于正常肺细胞

• 缺乏产生粘液和鳞状分化的亚显微结构和生化证据

NCI-H661细胞其他特征

• NCI-H661细胞表达特征：角蛋白表达阳性、波形蛋白表达阳性、p53 mRNA高表达

• 基因特征：可能存在p53基因的点突变或小的变异，但没有出现总体性的结构DNA崎变

• NCI-H661细胞倍增时间约60小时，生长速度相对较慢
  

• NCI-H661细胞形态呈上皮细胞样，生长特性为贴壁生长

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，0；PGM1，1；PGM3，1

NCI-H661细胞参数表

NCI-H661人大细胞肺癌细胞培养教程

NCI-H661细胞复苏

• 从液氮中取出NCI-H661细胞冻存管，迅速置于37°C水浴中快速解冻。

• 将NCI-H661细胞悬液转移到含有预热完全培养基的离心管中。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜完全培养基重悬NCI-H661细胞，并转移到培养瓶中。

• NCI-H661细胞接种密度约为2-3 × 10^4 cells/cm²。

• 将NCI-H661细胞置于37°C、5% CO2培养箱中培养。

NCI-H661细胞日常培养

• 每2-3天更换一次NCI-H661细胞培养基。

• 观察并记录NCI-H661细胞生长状态，包括细胞形态和密度。

NCI-H661细胞传代

• 当NCI-H661细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 用PBS洗涤NCI-H661细胞层1-2次。

• 加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，在37°C消化2-3分钟。

• 加入完全培养基终止消化，轻轻吹打使NCI-H661细胞分散。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜完全培养基重悬NCI-H661细胞，并按1:2的比例进行传代。

NCI-H661细胞冻存

• 收集对数生长期的NCI-H661细胞。

• 制备冻存液：90%完全培养基 + 10% DMSO。

• 调整NCI-H661细胞密度至1-2 × 10^6 cells/mL。

• 将NCI-H661细胞悬液分装到冻存管中。

• 使用程序降温盒或梯度降温，最终转移到液氮中长期保存。

NCI-H661细胞培养注意事项

• 定期检查NCI-H661细胞是否有污染。

• 观察NCI-H661细胞形态，保持上皮细胞样特征。

• 控制传代次数，建议使用10代以内的NCI-H661细胞。

• 定期进行支原体检测。

• 严格遵守无菌操作规程。

特殊说明

• NCI-H661细胞的倍增时间约为60小时，相对生长较慢。

• 培养过程中注意观察NCI-H661细胞的贴壁状态。

常见问题解答

• 传代比例对NCI-H661细胞实验结果的影响：

• 传代比例为1:2有助于保持适当的NCI-H661细胞密度，确保细胞正常生长。

• 过高的传代比例可能导致NCI-H661细胞密度过低，生长缓慢，影响细胞活力。

• 过低的传代比例可能导致NCI-H661细胞过度密集，影响细胞形态和代谢特性。

  
  

• 确保NCI-H661细胞健康状态的方法：

• 定期观察NCI-H661细胞形态，保持上皮细胞样特征。

• 使用10代以内的NCI-H661细胞，避免长期传代。

• 定期进行支原体检测，确保无污染。

• 严格遵守无菌操作规程。

  
  

• 不同培养基对NCI-H661细胞生长特性的影响：

• 推荐使用RPMI 1640基础培养基，添加10% FBS和PS。

• 在这种标准培养条件下，NCI-H661细胞的倍增时间约为60小时。

  
  

• NCI-H661细胞对化疗药物的敏感性：

• 具体化疗药物的敏感性信息可能需要进一步实验验证。

• NCI-H661细胞可能对肺癌常用化疗药物表现出特定的反应模式。