
小鼠肺泡ii型上皮细胞(原代细胞)
- 来源:肺组织
- 细胞特征:贴壁 , 上皮细胞样
- 培养基:原代上皮细胞专用培养基
- 其他:Ⅱ型肺泡细胞具有一些特征性结构,如细胞表面的微绒毛和MPA凝集素的存在
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞分离自肺组织。Ⅱ型肺泡细胞,又称为颗粒肺泡细胞,位于肺泡结构中的重要位置,处于Ⅰ型肺泡细胞之间及其相邻的肺泡间隔结合处。Ⅱ型肺泡上皮细胞呈立方形,体积相对较小,但在肺泡腔中却略微突出。其细胞核大而圆,胞质染色较浅,常见空泡。相比于Ⅰ型肺泡细胞,Ⅱ型肺泡细胞数量较多,占肺泡上皮细胞总数的14%到16%,然而,它们仅覆盖了5%的肺泡表面。
Ⅱ型肺泡细胞具有一些特征性结构,如细胞表面的微绒毛和MPA凝集素的存在,以及细胞内丰富的线粒体、粗面内质网、多泡体、溶酶体和板层体。
Ⅱ型肺泡细胞
位置:位于Ⅰ型肺泡细胞之间及其相邻的肺泡间隔结合处。
形态:体积较小,呈立方形,表面稍突向肺泡腔,核大而圆,胞质染色较浅淡,常见空泡。
分布比例:约占肺泡上皮细胞总数的14%到16%,但仅覆盖5%的肺泡表面。
功能:具有多样功能,包括增殖、分化、合成和分泌表面活性物质、肺水转运以及免疫功能。
Ⅱ型肺泡细胞特征
表面微绒毛和 MPA凝集素的存在。
细胞内含有线粒体、粗面内质网、多泡体、溶酶体和板层体。
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞参数表
类型 | 小鼠Ⅱ型肺泡细胞(ATⅡ)(原代细胞) |
细胞来源 | 小鼠正常肺组织 |
细胞形态 | 立方形,表面稍突向肺泡腔,细胞核大而圆,胞质染色较浅淡,胞质中常见空泡 |
细胞分布比例 | 占肺泡上皮细胞总数的14%到16%,但仅覆盖5%的肺泡表面 |
尺寸 | 体积约为900um³,比ATⅠ小很多 |
表面特征 | 有较多的短微绒毛,表面有 MPA凝集素,对α-半乳糖残基有特异性反应 |
细胞连接 | 相邻细胞以紧密连接或中间连接相连 |
细胞纯度 | 高于90% |
鉴定 | 肺表面活性蛋白 A(SP-A)或肺表面活性蛋白 C(SP-C)免疫荧光染色为阳性 |
无菌检测 | 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
生长方式 | 上皮样,多角形细胞,贴壁培养 |
pH | 7.2-7.4 |
细胞生长实验 | 细胞生长良好,形态正常 |
内毒素含量 | ≤10 EU/mL |
培养基 | 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞专用培养基 |
培养教程
小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞培养
细胞复苏
取出细胞培养瓶,用75%酒精消毒,拆下封口膜。
将培养瓶放入37℃、5% CO2细胞培养箱中静置3-4小时,以稳定细胞状态。
细胞传代
待细胞达到80%汇合时传代。
吸出培养基,用PBS清洗细胞一次。
添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,37℃温浴3分钟左右。
倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养基终止消化。
用吸管轻轻吹打混匀,按1:2的比例进行接种传代。
加入新鲜的完全培养基,放入37℃、5% CO2细胞培养箱中培养。
细胞观察
细胞贴壁后,可在显微镜下观察细胞形态。
ATⅡ细胞呈立方形,细胞体积较小,表面有微绒毛。
细胞核大而圆,胞质染色较浅,常见空泡。
注意事项
ATⅡ细胞对体外培养条件要求较高,应严格按照操作规程进行培养。
细胞传代时应注意操作无菌,避免细胞污染。
细胞培养过程中应定期观察细胞状态,及时更换培养基。
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