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小鼠表皮角化上皮细胞(原代细胞)货号:STM-CE-2210 规格:5×10⁵cells/T25细胞培养瓶

小鼠表皮角化上皮细胞(原代细胞)

  • 来源:皮肤组织
  • 细胞特征:贴壁 , 上皮细胞样
  • 培养基:原代上皮细胞专用培养基
  • 其他:表皮角化细胞(KC)是构成表皮的主要细胞成分
价格:¥ 4,300.00

小鼠表皮角化细胞分离自小鼠皮肤组织。表皮角化细胞是表皮的主要细胞成分,表皮角化细胞在体内不断增殖。分裂的角化细胞主要分布在基底层,少数位于棘细胞层。随着细胞向表层推移,其分化程度逐渐增加,同时丧失分裂活性。

小鼠表皮角化上皮细胞是先通过中性蛋白酶消化,然后采用胰蛋白酶和胶原酶的混合消化法。

小鼠表皮角化上皮细胞特性

  • 表皮位于动物皮肤的外层、由胚胎时期外胚层形成、具有抗摩擦和抗损伤的作用

  • 表皮角化细胞(KC)是构成表皮的主要细胞成分

  • 表皮角化细胞在体内处于不断增殖过程中、分裂的角化细胞主要位于基底层,少数位于棘细胞层

  • 随着向表层的推移,细胞的分化程度逐渐增加,并丧失分裂活性

小鼠表皮角化上皮细胞参数表

产品名称小鼠表皮角化上皮细胞(原代细胞)
组织来源昆明小鼠、C57小鼠(出生1-3天)
产品规格5×10⁵ cells/T25 细胞培养瓶
细胞简介小鼠表皮角化细胞分离自皮肤组织。
细胞制备方法先中性蛋白酶消化,后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备
生长特性贴壁
细胞形态上皮细胞样
培养基原代细胞专用培养基
包被条件鼠尾胶原Ⅰ (2-5 μg/cm²)
换液频率每2-3天换液一次
传代特性可传1-2代左右
传代比例1:2
消化液0.25% 胰蛋白酶
培养条件气相:空气(95%),CO₂(5%)
细胞污染检测HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性
质量检测实验室分离的经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上

培养教程

小鼠表皮角化上皮细胞培养

贴壁细胞消化

  • 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。

  • 添加0.25%胰蛋白酶消化液1ml至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3分钟。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。

  • 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5ml,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

  • 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

细胞实验

  • 由于原代细胞贴壁的特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因未贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)、多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml)、明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项

  • 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

  • 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

  • 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。


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