
小鼠表皮角化上皮细胞(原代细胞)
- 来源:皮肤组织
- 细胞特征:贴壁 , 上皮细胞样
- 培养基:原代上皮细胞专用培养基
- 其他:表皮角化细胞(KC)是构成表皮的主要细胞成分
小鼠表皮角化细胞分离自小鼠皮肤组织。表皮角化细胞是表皮的主要细胞成分,表皮角化细胞在体内不断增殖。分裂的角化细胞主要分布在基底层,少数位于棘细胞层。随着细胞向表层推移,其分化程度逐渐增加,同时丧失分裂活性。
小鼠表皮角化上皮细胞是先通过中性蛋白酶消化,然后采用胰蛋白酶和胶原酶的混合消化法。
小鼠表皮角化上皮细胞特性
表皮位于动物皮肤的外层、由胚胎时期外胚层形成、具有抗摩擦和抗损伤的作用
表皮角化细胞(KC)是构成表皮的主要细胞成分
表皮角化细胞在体内处于不断增殖过程中、分裂的角化细胞主要位于基底层,少数位于棘细胞层
随着向表层的推移,细胞的分化程度逐渐增加,并丧失分裂活性
小鼠表皮角化上皮细胞参数表
产品名称 | 小鼠表皮角化上皮细胞(原代细胞) |
组织来源 | 昆明小鼠、C57小鼠(出生1-3天) |
产品规格 | 5×10⁵ cells/T25 细胞培养瓶 |
细胞简介 | 小鼠表皮角化细胞分离自皮肤组织。 |
细胞制备方法 | 先中性蛋白酶消化,后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养基 | 原代细胞专用培养基 |
包被条件 | 鼠尾胶原Ⅰ (2-5 μg/cm²) |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
传代特性 | 可传1-2代左右 |
传代比例 | 1:2 |
消化液 | 0.25% 胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相:空气(95%),CO₂(5%) |
细胞污染检测 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性 |
质量检测 | 实验室分离的经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上 |
培养教程
小鼠表皮角化上皮细胞培养
贴壁细胞消化
吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
添加0.25%胰蛋白酶消化液1ml至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3分钟。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5ml,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
细胞实验
由于原代细胞贴壁的特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因未贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)、多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml)、明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
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